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文章编号：1009-5519（2008）12-1835-02 中图分类号：R392 文献标识码：A 系统性红斑狼疮（SLE）主要是由多克隆自身反应性B细胞介导的自身免疫性疾病，其直接的致病因子是多克隆自身抗体，并以免疫复合物的形式造成多种组织器官损伤。SLE患者普遍性的特点是其血清中存在多种自身抗体。其中，抗双链DNA抗体不仅具有诊断学价值，而且是导致皮肤黏膜、关节和肾脏疾病的主要致病性抗体[1，2]。作为抗双链DNA抗体来源的DNA特异性B细胞，在发病中扮演关键角色[3]。其致病机制在于：(1)抗双链DNA抗体是由相应激活并扩增的DNA特异性B细胞克隆产生；(2)由于B细胞表达MHC-I类和II类分子以及共刺激分子，它作为Th细胞的抗原提呈细胞(APC)，参与了SLE中Th1/Th2免疫偏移；(3)B细胞能分泌多种细胞因子及趋化因子，起到介导炎症反应及调节免疫应答的作用。
目前临床上主要使用糖皮质激素及其他广谱免疫抑制剂治疗SLE，但其不良反应明显并且效果有限。因此寻求新的治疗手段成为临床上的迫切需求。当前以DNA特异性B细胞为靶标的干预治疗策略已成为治疗SLE的热点[4，5]，本文就其治疗策略和存在问题做相关综述。
1 干扰DNA特异性B细胞的活化
B细胞的活化扩增依赖于特定Th细胞辅助，以含MHC-II类分子限制性表位的疫苗，或者靶向Th细胞的抑制分子，都可以通过诱导自身反应性Th细胞的免疫耐受，达到抑制B细胞活化的目的(见图1)。如Mohan等[6]体外共同培养的狼疮鼠Th细胞和B细胞，经抗CD40L单克隆抗体处理后，可明显降低细胞活化程度和自身抗体的滴度。动物实验发现应用CD40L单克隆抗体不仅可以延迟新生狼疮鼠发生狼疮性肾炎的时间，而且对已发生肾炎的狼疮鼠也有明显的治疗作用。具体表现为蛋白尿水平降低、组织病变改善。另外Sfikakis等[7]运用B7-1和B7-2单克隆抗体同样可以影响自身反应性Th-B淋巴细胞的相互作用。狼疮易感鼠(NZB/NZWF1) 同时用B7-1和B7-2处理，可以降低ds-DNA抗体水平，抑制肾炎的发生，延长生存时间。但这种基于“限制”而非“清除”的手段，容忍了病理性B细胞克隆的持续存在，而且其抑制效果不太稳定和持久。
2 诱导针对自身反应性B细胞的CTL（Cytotoxin T Lymphocyte）杀伤效应
Guo-Chang Fan等[8]利用生物信息学技术，预测并鉴定了DNA抗体的重链可变区中能与MHC-I类分子结合的表位多肽。并用能编码多肽的DNA免疫狼疮易感鼠（NZB/NZWF1）。实验结果发现DNA疫苗能诱发针对自身反应性B细胞的CTL（Cytotoxin T Lymphocyte）杀伤效应，降低血清中抗DNA抗体水平，减缓肾炎的进展，并提高动物的生存率。然而研究发现自身反应性B细胞在抗原呈递及共刺激分子表达方面存在缺陷，因此它能够逃避DNA疫苗诱导的CTL的“识别或杀伤”。同时DNA疫苗的安全性和应用于人体后免疫效果明显减弱等问题，也尚未完全解决。
3 重组免疫毒素杀伤靶细胞
将毒素分子与细胞表面标志性分子的抗体制成融合蛋白，即重组免疫毒素，注入体内后可在抗体的引导下特异杀伤靶细胞。在研究重组免疫毒素对寻常型天疱疮患者外周血淋巴细胞的影响中，翟志芳等[9]用重组免疫毒素Dsg3EC(1-2)PE40作用于寻常型天疱疮患者外周血淋巴细胞， 通过ELISPOT法、MTT比色试验及3H-TdR掺入试验来观察重组免疫毒素对T、B淋巴细胞的影响。结果显示重组免疫毒素能够特异性与天疱疮抗体IgG结合，而与正常人IgG不结合。重组免疫毒素可使寻常型天疱疮外周血产生抗体的B细胞数量减少约40％左右，T细胞的增殖、代谢明显降低。另外黄文广等[10]构建含人乳腺癌DF3启动子和白喉毒素A链基因的表达载体pGL3-DF3-DTA，转染DF3阳性的乳癌细胞MCF-7，逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测DTA基因的表达；噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞生长活性；免疫组织化学法和流式细胞术检测细胞凋亡。结果显示转染pGL3-DF3-DTA的MCF-7细胞生长受到了抑制，流式细胞术检测到的凋亡率达39.43%，而对照组仅有0.28%。基于免疫毒素的治疗策略同样为靶向DNA特异性B细胞的治疗提供了思路。但重组免疫毒素的缺点也很明显：（1）天然蛋白质或多肽在机体很易降解，其血清半衰期短；（2）其它细胞吞噬后可能造成非特异性损伤；(3)可能诱发机体针对重组免疫毒素的免疫应答。
4 基因治疗
基因治疗也是当前治疗SLE中的研究热点。利用CTLA-4基因抑制T细胞活化，从而可以间接阻抑自身反应性B细胞。有研究报道用腺病毒基因转染技术使狼疮易感鼠Fas受体水平表达增高或表达CTLA-4Ig，可以明显缓解小鼠的淋巴细胞增生和高球蛋白血症，延长小鼠生存时间[11，12]。但显然其作用的靶向性不强，而且腺病毒本身能激发宿主强的免疫应答，这些都有待克服和完善。另外人类SLE 利用基因治疗的策略还有许多问题亟待解决，比如SLE是一种多基因遗传病，其易感基因目前仍无统一的认识。另外基因产物能否在体内稳定、持续地表达还不能确定。可见，现有的治疗手段有不容忽视的局限性。在SLE的治疗过程中，如何特异、高效地清除致病性B细胞克隆-DNA特异性B细胞，是目前要解决的关键问题和努力方向。
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[8] Fan GC，Singh RR.Vaccination with minigenes encoding V(H)-de-rived major histocompatibility complex class I-binding epitopes acti-vates cytotoxic T cellsthatablateautoantibody-producing B cells and inhibit lupus[J].J Exp Med，2002，196(6):731.
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[11] Hong NM，MasukoHK，Sasakawa H，et al. Amelioration of lymphoid hyperplasia and hypergammaglobulinemia in lupus2prone mice (gld) by Fas-ligand gene transfer[J].J Autoimmun，1998，11(4):301.
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收稿日期：2008-03-04
