【喉癌生存素表达临床特征分析】 喉癌有什么特征

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  【摘要】目的:探讨生存素(survivin)表达与喉癌发生、发展及浸润转移的关系。方法:喉癌组为65例肿瘤组织,均经病理确诊为喉鳞状细胞癌。采用免疫组织化学SABC染色法检测survivin蛋白表达情况,并进行统计分析。结果:喉癌组survivin蛋白定位于癌细胞胞浆,阳性率(51/65,78.5%)显著高于癌旁组(2/22,9.1%),淋巴转移组显著高于无转移组,不同临床分期阳性率显著不同。结论:喉癌组织中survivin表达水平较高,survivin表达与喉癌发生、发展及浸润转移有关,对喉癌的早期诊断、预后判断有意义。
  【关键词】喉癌;生存素;免疫组织化学
  文章编号:1009-5519(2008)15-2250-03 中图分类号:R76 文献标识码:A
  
  细胞凋亡受抑制为肿瘤细胞提供生存之机,使细胞的转化突变得以保存,最终导致肿瘤的发生和演进[1]。生存素(survivin)是一种肿瘤特异性凋亡抑制因子,它是凋亡抑制蛋白(inhbitor of apoptosis protein,IAP)基因家族的一个成员,具有抑制细胞凋亡和调节细胞分裂的双重功能[2]。正常情况下survivin基因除在胎盘和胸腺组织有微弱表达之外,在成人终末分化的组织中不表达,但在病理情况下,survivin可表达于大多数恶性肿瘤,在肿瘤的发病机制中起重要作用[3]。本研究应用免疫组织化学染色方法检测65例喉癌组织中survivin的表达,并对结果进行分析,以期了解survivin表达在喉癌的发生、发展和预后中的作用。
  
  1 资料与方法
  
  1.1 一般资料:65例患者均为本院2005年6月~2008年2月住院手术的喉癌原发病例,男40例,女25例,年龄36~78岁,平均(58.2
  ±8.5)岁,>60岁患者35例。所有患者均经病理确诊为喉鳞状细胞癌,肿瘤直径>3 cm 33例。根据UICC 1997年标准进行TNM临床分期:Ⅰ+Ⅱ期26例,Ⅲ+Ⅳ期39例。肿瘤高中分化40例,低分化25例;伴颈淋巴结转移者18例,无颈淋巴结转移者47例。喉癌发生部位:声门上型30例,声门型27例,声门下型8例。对照组癌旁组织22例取自全喉切除标本的远端组织,距肿瘤边缘>3 cm。
  1.2 免疫组织化学染色:免疫组织化学检测采用SABC法,二氨基联苯胺(diamionben zidene,DAB)显色。所用兔抗人survivin单克隆抗体购自美国Santa Cruz公司,免疫组化检测试剂盒(SP-9000)、DAB酶底物显色试剂盒等购自北京中杉金桥生物技术有限公司。免疫组织化学染色步骤如下:标本常规石蜡包埋,5 μm厚组织切片,贴附在经赖氨酸处理过的载玻片上,60℃烘烤1h后二甲苯脱蜡、梯度酒精水化,柠檬酸缓冲液高压锅热诱导抗原修复;3% H2O2抑制内源性过氧化酶作用10 min;血清封闭液室温孵育20 min阻断非特异抗体的着色;加一抗(1:500)4 ℃过夜,0.01M PBS冲洗,加生物素标记的第二抗体,37℃孵育30 min,最后加入链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶,37 ℃孵育20 min,PBS冲洗,DAB显色,HE复染,中性树胶封固。以PBS代替一抗作阴性对照。结果判定标准:胞质内有黄色及棕黄色着色者为survivin阳性染色,主要定位于肿瘤细胞胞质和胞膜中,为粗细不一的棕黄色颗粒,阳性细胞呈局灶性或弥漫性分布。在400倍视野下,任意选择5个高倍视野,每个视野至少含200个细胞,阳性细胞数≥5%定为阳性。
  1.3 统计学方法:所得数据以例数或百分数(%)表示,采用SPSS 12.0软件包进行统计分析。
  
  2 结果
  
  2.1 Survivin蛋白表达免疫组化检测结果:Survivin阳性细胞胞质呈黄色或棕黄色,按阳性标准判断,喉癌组织中的survivin表达阳性例数为51例,阳性率为78.5%,癌旁组织中的survivin阳性例数为2例,阳性表达率为9.1%。Survivin蛋白在喉癌组织和在癌旁组织中的表达差异有显著性(χ2=33.223,P0.05)。喉癌组≥60岁患者35例中survivin阳性28例,0.05)。喉癌组肿瘤≥3.0cm患者33例中survivin阳性25例,0.05)。喉癌组肿瘤高中分化40例中survivin阳性26例,低分化25例中survivin阳性25例,阳性率分别为65.0%和100.0%,统计分析差异有显著性(χ2=11.152,P   本研究采用免疫组织化学SABC染色法检测喉癌组织中survivin的表达,并分析survivin阳性表达与肿瘤临床分期、病理分化程度及淋巴结转移的关系。结果显示survivin在癌旁组织细胞中阳性表达率较低,而在喉癌组织中的阳性表达率为78.5%(51/65),组间比较差异有显著性。在喉癌中,survivin的表达与喉癌患者性别、年龄和肿瘤大小无明显相关性(P>0.05),而与喉癌的临床分期、病理分级及淋巴结转移呈正相关。Survivin阳性表达在喉癌不同临床分期有显著性区别,在伴有颈淋巴结转移组明显高于无转移组,差异有显著性,说明凋亡抑制因子survivin具有一定的特异性,它的异常表达所引起的凋亡抑制与肿瘤浸润、转移及患者的预后相关,也提示survivin不但抑制肿瘤细胞凋亡,可能还参与癌细胞的转移过程的调节,在转移过程中发挥作用。
  Survivin是至今发现作用最强的凋亡抑制蛋白之一,目前其作用机制尚未完全研究清楚。Survivin是一个重要的生物因子,它在癌旁组织中表达率低,在喉癌中高表达,并与淋巴结转移密切相关。Survivin在凋亡和细胞周期的基因调控中发挥重要作用,由于其表达的特异性及对细胞增生和凋亡的双重作用,使其成为一个非常有吸引力的癌症治疗靶点,这对喉癌的诊断及基因治疗,特别是预后判断可能具有重要意义。
  
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  收稿日期:2008-04-14

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