紫红獐牙菜对糖尿病小鼠抗氧化功能的影响|小鼠抗氧化

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  【摘要】目的:探讨紫红獐牙菜(Swertia Punica,SP)对四氧嘧啶糖尿病模型小鼠抗氧化功能的影响。方法:建立四氧嘧啶糖尿病小鼠动物模型,观察SP对四氧嘧啶糖尿病小鼠抗氧化功能的作用,检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量。结果:SP能提高糖尿病小鼠心、肝、肾组织SOD活性和降低MDA含量,且呈量效关系。结论:SP有显著的抗糖尿病组织过氧化的作用。
  【关键词】紫红獐牙菜;超氧化物歧化酶;丙二醛
  文章编号:1009-5519(2008)16-2381-02 中图分类号:R28 文献标识码:A
  
  紫红獐牙菜(Swertia Punica,SP)系龙胆科(Gentianaceae)SP属植物,局部地区用于治疗肝炎和糖尿病。该药含有紫药苦甙、獐牙菜苦甙、齐墩果酸、胡萝卜甙、獐牙菜甙等,现已列入云南省药材标准。彭芳等[1]研究表明SP对多种原因引起的高血糖均有一定的降糖作用和较好的改善糖尿病的临床症状的作用。体内氧自由基增加是引起糖尿病的原因之一,同样机体内氧自由基也能引起糖尿病并发症及其它疾病。自由基是一种生物氧化剂,能使脂质过氧化及蛋白质氧化,损害细胞及细胞膜的正常结构,破坏细胞的正常生理功能,使许多组织造成过氧化损伤,引起并发症,可累及心、肾、脑和肝等器官的损伤,产生严重后果,目前越来越受到人们的重视。糖尿病模型小鼠和糖尿病患者体内自由基反应明显增强,脂质过氧化产物增加[2]。本实验对糖尿病小鼠心、肝、肾组织的超氧化物歧化酶(SOD) 活性和丙二醛(MDA)含量进行检测分析。探讨SP对糖尿病模型小鼠的重要器官是否有抗脂质过氧化损伤作用,从而为SP对糖尿病并发症的防治提供实验数据。
  
  1 材料与方法
  
  1.1 药品与试剂:SP浸膏制备(SP由大理学院药学院刘光明教授提供):将SP粉碎,乙醇浸泡3次,每次48小时,过滤,合并滤液,浓缩得浸膏(1 g浸膏相当于生药8.4 g)。四氧嘧啶(Alloxan)美国Sigma公司产品,临用前配成0.4%四氧嘧啶-生理盐水溶液。葡萄糖测定试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司提供,(批号3060968);SOD试剂盒(批号20060317)和MDA试剂盒(批号20060313)由南京建成生物工程研究所提供。
  1.2 动物:健康ICR小鼠(SPF级),体重(20±2)g,由云南生物制药有限公司提供,合格证号:SCXK(滇)2005-0010。
  1.3 仪器:722光栅分光光度计 (上海第三分析仪器厂)。
  1.4 方法:按文献[2]方法1次性尾静脉注射四氧嘧啶80 mg/kg,制作糖尿病小鼠模型。72小时后从存活小鼠眼静脉取血,测血糖值为16~25 nmol/L者被选用。取符合条件的小鼠30只,随机分为模型组、SP低剂量组(7 g生药/kg)和SP高剂量组(14 g生药/kg),每组10只,另取健康小鼠10只作正常对照组。正常小鼠组和模型组分别用生理盐水灌胃(ig),SP低、高剂量组分别ig SP,各组给药量均为0. 2 ml/10 g,每天1次,连续14天。末次给药后禁食16小时后处死各组小鼠,迅速剖腹取出心、肝、肾,按试剂盒说明书方法制备组织匀浆,并测定心、肝、肾组织匀浆中SOD的活性(U/mg )和MDA的含量(nmol/mg)。
  1.5 统计学处理:实验数据均以(x±s)表示,组间差异显著性比较采用t检验。
  
  2 实验结果
  
  2.1 SP对糖尿病小鼠SOD的影响:与正常组及模型组比较均SP能提高心、肝、肾组织中SOD的活性,且呈剂量依赖关系。其中高剂量组作用明显,见表1。
  
  2.2 SP对糖尿病小鼠MDA的影响:SP能降低心、肝、肾组织中MDA的活性,与模型组比较P<0.01或P<0.05,且呈剂量依赖关系。其中高剂量组作用明显,见表2。
  
  3 讨论
  
  糖尿病是一种较常见的内分泌代谢障碍性疾病,主要病为胰岛素B细胞受损引起胰岛素分泌不足或因细胞膜上胰岛素受体缺陷导致胰岛素不敏感、不能发挥作用,造成糖代谢紊乱。近年来,国内外均有文献报道认为体内氧自由基增加是引起糖尿病的原因之一,同样机体内氧自由基也能引起糖尿病并发症及其它疾病。正常生理状态下,机体代谢过程中氧自由基与氧抑制剂处于动态平衡。体内经常产生超氧化物阴离子自由基等代谢产物,氧自由基又引起脂质过氧化物的生成,MDA是脂质过氧化物的最终产物,它能使蛋白质、核酸、脂类发生交联,使生物膜变性、细胞突变、衰老或死亡。因此,测试MDA的量能反映出机体内脂质过氧化的程度,间接地反映出细胞损伤的程度。而细胞内存在清除氧自由基的体系,即在需氧代谢细胞中都含有SOD,它能促使超氧化物阴离子变为H2O2和氧分子,清除氧自由基保护细胞免受损伤。自由基与糖尿病的关系日益受到人们的重视,脂质过氧化物水平的升高及机体自由基清除酶活性下降可促进病情的发展及并发症的出现[3,4]。
  
  
  参考文献:
  [1] 彭 芳,方春生,杨再康,等.紫红樟牙菜对实验性糖尿病保护作用的研究[J].中国中医药科技,2003,10(2):96.
  [2] 陈 奇.中药药理研究方法学[M]. 第二版.北京:人民卫生出版社,2006.100.
  [3] 蔡英兰,李相伍,金香子.榛花对糖尿病小鼠血清SOD活性及MDA含量的影响[J].延边大学医学学报,2005,28(4):251.
  [4] 舒思洁,闵 清,吴基良.脂糖舒对糖尿病小鼠组织SOD活性和MDA含量的影响[J].威宁医学院学报,2002,16(1):23.
  收稿日期:2008-04-18

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