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【摘要】目的:探讨宫颈细胞DNA定量分析结合液基细胞学诊断方法进行宫颈癌普查的意义。方法:对参与宫颈癌普查的1220名妇女,进行液基细胞学检查和细胞DNA定量分析诊断, 对细胞检查结果在LSIL以上病例和全自动DNA倍体分析系统检查可见异倍体细胞或异倍体细胞峰的病例,建议做宫颈病理组织学活检,以病理诊断结果为标准。结果:液基细胞学诊断阳性156例,阳性率为12.8%(156/1220),细胞DNA异倍体检出阳性169例,检出率13.9%(169/1220),细胞DNA定量分析结合液基细胞学诊断检出阳性173例,总阳性率为14.2%。在细胞学诊断≥LSIL或细胞DNA分析有≥3个异倍体细胞,每个细胞DNA指数≥2.5者,并根据临床症状和特征,99例患者需做宫颈组织学或子宫内膜组织诊刮活检,活检结果:阳性93例,阳性率为94%(93/99)。结论:细胞DNA定量分析结合液基细胞学诊断方法,能明显提高宫颈癌普查阳性检出率。
【关键词】宫颈细胞DNA定量分析;液基细胞学;宫颈癌普查
【中图分类号】R446 【文献标识码】A 【文章编号】1006-1959(2009)09-0219-02
宫颈癌是最常见的女性生殖道恶性肿瘤,严重威胁妇女的健康和生命,对宫颈癌及癌前病变(宫颈上皮内瘤变)的早发现、早诊断是妇科防治宫颈癌的重点。10年来,宫颈细胞学的检测技术和方法不断地提高和发展,尤其是在取材和制片方法上取得了较大进展[1],宫颈细胞DNA定量分析也开始应用于临床筛查宫颈癌,本研究采用使宫颈细胞DNA定量分析结合液基细胞学检查筛查,旨在探讨其应用的临床意义,结果如下。
1 资料与方法
1.1 研究对象:2008年7月-2009年3月到那坡县人民医院参加宫颈癌筛查的1220名妇女,年龄在20~50岁之间。
1.2 方法:妇科医生在阴道扩张器直视下,手持宫颈刷刷柄,通过扩阴器将刷头中央较长的刷丝从宫颈外口插入子宫颈管内(约8mm),周边刷丝顶部抵触在子宫颈粘膜面,顺时针旋转5周,取出宫颈刷后,拔脱刷头,将刷尖向下垂直方向浸泡在样本收集管固定液内,旋紧管盖后摇晃,然后将贴上标签的标本送检,将装有固定液和刷头的标本收集管,加入0.1% DDT消化液,置震荡器上震荡2h;消化后的细胞悬液离心5min,弃上清液,放入50%乙醇分别清洗,离心2次;将固定液稀释后的混悬液放入细胞涂片离心机制片,每例制成2张薄层细胞学片,分别进行巴氏染色做常规细胞学诊断及Fenlgen DNA染色做DNA定量测定。
1.2.1 细胞学诊断:采用TBS(the Bethesda syslem)分级系统[2],正常范围(WNL);意义不明的不典型鳞状上皮细胞或腺细胞(LSIL);鳞状上皮内高度病变(HSIL);鳞癌:腺癌。以ASCUS或AGUS以上病变为阳性。
1.2.2 DNA分析:Fenlgen染色片用Accell全自动细胞图像分析系统进行扫描处理[3,4]。根据AcCell系统诊断软件所做的细胞DNA倍体分析结果和建议有如下3种情况:①以正常LC细胞为主,未见异倍体细胞及异倍体细胞峰;建议1~2年后复查;②出现DNA指数>2.5细胞及DNA指数1与2之间的细胞数>被测细胞总数的10%;建议活检;③出现异倍体细胞峰及大量DNA指数>2.5细胞;建议活检。
1.2.3 宫颈活检:对LSIL以上病变或多个(≥3个)DNA异倍体细胞者行宫颈活组织检查,于宫颈鳞-柱交接部的3、6、9、12点处活检作病理检查,以病理诊断为宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ级以上病变为阳性,病理报告为慢性宫颈炎或湿疣样变者为阴性,对检出1~2个DNA异倍体细胞或ASCUS者,3~6个月重新刷片作液基细胞学检查和DNA倍体检测。
2 结果
2.1 宫颈液基细胞学检查与DNA倍体检测结果,见表1,液基细胞学诊断阳性156例,阳性率为12.8%(156/1220),细胞DNA异倍体检出阳性169例,检出率13.9%(169/1220),只有异倍体细胞≥3个而细胞形态无改变者13例,未能检出DNA异倍体细胞学诊断为LSIL者4例,液基细胞学结合DNA异倍体分析检出阳性173例,总阳性率为14.2%,而且随着DNA异倍体细胞数量的增加,细胞病变的严重程度相应增加。
2.2 99例宫颈或内膜诊刮病理组织学活检查结果,见表2,在细胞学诊断≥LSIL或细胞DNA分析有≥3个异倍体细胞,每个细胞DNA指数≥2.5者,活检结果者,并根据临床症状和特征,99例患者需做宫颈组织学或子宫内膜组织诊刮活检,活检结果:阳性93例,阳性率为94%(93/99)。
3 讨论
3.1 DNA倍体检测联合液基细胞学检查在宫颈癌早诊早治的应用价值:早期宫颈癌一般无症状或仅有轻微的症状,不足以引起患者注意,筛查是发现早期宫颈癌的重要手段。发现宫颈癌前病变是恶性肿瘤早期诊断的重要环节,对肿瘤的治疗、预后有重要的意义[5]。目前已有关于宫颈癌前病变的DNA倍体改变的报道,多数人认为具有非整倍体的癌前病变较之相同形态之整倍体者更倾向于病变持续或复发,而非整倍体的出现是癌前病变进展为癌的标志[6]。测定细胞核DNA的含量,可作为恶性肿瘤的客观指标[7]。全自动细胞DNA倍体分析系统可以对细胞进行定量分析检测,作为辅助诊断癌前病变发展至癌变的一个有价值的指标,本研究结果显示, DNA异倍体分析结合液基细胞学检出阳性173例,其中只有异倍体细胞≥3个而细胞形态无改变者13例,未能检出DNA异倍体细胞而细胞学诊断为LSIL者4例,而且随着DNA异倍体细胞数量的增加,细胞病变的严重程度相应增加,说明两者结合检查不但能及早发现宫颈早期癌变,而且能减少漏诊,可使患者做到早诊断、早治疗,从而提高患者的存活率。
3.2 细胞DNA倍体检测结合液基细胞学检查普查宫颈癌的意义:宫颈癌主要危害经济条件差和无条件参加宫颈癌普查地区妇女,如何使经济落后地区的大多数妇女能参与宫颈癌普查是当今必须解决的问题之一[8]。我们分析总结,一方面采用宫颈刷取材和液基薄层制片技术,同时使用全自动化的DNA倍体分析系统分析进行筛查,并根据诊断结果,对中、重度宫颈糜烂者采取相应的治疗措施;并及时治疗CIN以阻断宫颈癌发生。另一方面是通过普及防癌知识,提倡晚婚、少育、开展性卫生教育,发挥妇女防癌保健网作用,对基层妇女进行教育,凡已婚妇女定期开展宫颈癌的普查普治[9],做到早发现、早诊断和早治疗,并将宫颈癌普查工作与计生工作相结合,受到了广大育龄妇女欢迎并积极参与。
综上所述,用全自动DNA倍体分析系统合液基细胞学检查进行宫颈癌普查有效解决基层开展大规模宫颈癌普查,该方法敏感性较高,成本效益合理,是一种适合于大规模基层妇女普查宫颈癌筛查方法[10]。
参考文献
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作者单位:533900 那坡县人民医院�1
533000 右江民族医学院附属医院�2
