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【摘要】 目的 探讨全自动生化分析仪测定TG结果失真的原因以及解决的方法。方法 全自动生化分析仪D�360终点法检测。结果 有一些TG测定结果偏高或偏低,经重新测定,其结果与以前相差甚远。结论 遇到结果过高而目测血清不浑浊等情况,要寻找原因,避免报告失真。�
【关键词】
TG全自动生化分析仪终点法;结果偏高或偏低
血清三酰甘油(TG)是一项重要的临床血脂测定指标。TG不仅对动脉粥样硬化(AS)和冠心病(CHD)的防治具有重要意义,而且已经渗透并应用于其他诸多临床相关专业疾病的研究,如高血压、糖尿病等。测定方法为甘油磷酸氧化酶终点法。在工作中,经常遇到目测血清很清而测得结果明显偏高及重度脂血的标本出现升高不明显的情况,经重新测定结果良好。现选11列结果报告如下。�
1 材料和方法�
1�1 标本来源来源于门诊和住院患者的标本。�
1�2 仪器和试剂南京D�360全自动生化分析仪试剂为北京科美生物技术有限公司提供的甘油磷酸氧化酶终点法液体单试剂。�
1�3 方法做好仪器每天的维护及保养,使仪器处于最佳状态,要严格按照仪器的操作规程进行操作,作好室内质控。对TG明显异常与目测相差很大的、反应曲线异常的标本及严重脂血(用生理盐水按照1:5的比例稀释后)再重新测定。�
2 结果�
见表1。�
3 讨论�
3�1 测定TG为甘油磷酸氧化酶终点法 此法的原理是trinder反应(被测物通过酶作用产生的过氧化氢,在4�氨基安替比林、过氧化物酶的存在下,可生成红色醌亚胺化合物)。催化trinder反应的过氧化物酶对底物专一性差,维生素C、尿酸、谷胱甘肽及胆红素等还原性物质也与色原性物质竞争过氧化氢,从而使氧化过程中产生的过氧化氢被消耗,导致色素形成减少,测定结果偏低,此外,工具酶中如果夹杂有较多过氧化氢酶,也能消耗氧化产物过氧化氢,使被测物的测定值偏低,造成TG测定的负干扰。临床上关于TG测定负干扰这方面的研究和报道不少。我院应用D�360测定TG时,时有目测血清很清但测定值偏高的现象,如上表所列。TG高于3�33 mmol/L时才出现肉眼浑浊,有些标本肉眼观不浑浊,但测定值却远高于此值,这说明存在TG测定的正干扰。分析原因: 1、分析仪使用同一根试剂针吸取试剂,虽然分析仪有清洗系统,但试剂针很难通过一次短暂快速的清洗程序就清洗干净,一个项目对随后的一个项目甚至几个项目都会带来一定程度的试剂污染,并且随着仪器使用时间的增加,试剂交叉污染程度会有所加剧。试剂间的交叉污染原因是多方面的,主要有三个:第一,试剂成分中含有某种被污染的项目;第二,试剂中含有下一个测试所要测定底物或含有的某种试剂成分,与下一反应所测定的底物有作用,因而直接影响下一反应测定的结果;第三,该试剂所引导的反应给下一个项目反应进程带来了间接干扰。用全自动生化分析仪随机组合检测项目时 ,原则是将具有相同反应原理的项目放在一起 ,相同酸碱度反应的项目放在一起 ,试剂内含相同被测成分的和该项目相隔两个项目位置以上 ,易污染项目测定前吸样针设置清洗 2次以上等。因此要想获得正确可靠结果,不但需要熟练掌握仪器原理、性能操作 ,而且需要掌握反应原理 ,试剂组成等方面知识��[1]�。2、酶法测定血清TG时,当Hb1 g/L时反映出正干扰,但Hb≤2 g/L时干扰不显著,明显溶血标本不宜作为TG测定。3、仪器自身缺陷 ,据工程师介绍D�360全自动生化分析仪有这方面缺陷,偶尔出现重复性差,结果明显异常,避免办法就是结合标本及临床必要时再行复查。4、标本处于半凝固状态,导致加样不准确,标本一定要用血清。�
3�2 血清FG(游离甘油)对TG测定结果的影响一直是临床十分关注的问题。我国正常人血清FG 水平平均约为0�08 mmol/L,约占总TG7�19%。虽然临床标本中FG显著升高者很少见,但有些异常或病理情况下如应激反应(肾上腺素激活LPL促进体内脂肪水解),剧烈运动,服用含甘油的药物如硝酸甘油,静脉输入含甘油的营养液,肝素治疗,某些严重的糖尿病、肝病与肾病,取血器材或试管塞上带有甘油等时,可见血清FG显著升高,并给临床决策带来误导��[2]�。�
3�3 近年来糖尿病血脂代谢紊乱,家族性高血脂患者不断增加,高血脂症患者越来越多。日常标本中甘油三脂(TG)在10～20 mmol/L屡见不鲜,血清似奶油状无法报告结果。另一方面临床上患者静脉注射脂肪乳也出现同样的情况。11号标本就是高度脂血。由于脂血中大量的乳糜微粒对人射光产生散射,使生化分析仪不能准确测定吸光度的变化,从而使测定结果失真。用生理盐水稀释后可以消除乳糜微粒对人射光产生的散射,从而消除脂浊对测定的干扰。对于重度脂血标本除了用生理盐水稀释外,还可以通过高速离心(5000/min)后取脂肪层下面的下清液进行测定其结果与用生理盐水稀释后测定的结果非常相近��[3]�。�
3�4 在正常工作中由于标本量大,有些异常结果易被忽视,所以要加强工作责任心,对异常结果要密切注意,查找原因。除了要密切注意当天仪器的工作状况,当天的质控状况外,还要密切注意异常结果的反应曲线,特别注意少数偏离常规的特殊异常,结合临床结合标本必要时及时复检,为临床提供科学的诊断依据。�
参 考 文 献�
[1] 于雷.生化自动分析仪项间的交叉污染及其避免方法.临床检验杂志,2003,21(3):168.�
[2] 康格非.临床生物化学和生物化学检验.人民卫生出版社,1998:59�160.�
[3] 石凌波.利用高速离心消除脂血对生化测定的干扰.检验医学,2004,19(2):138�140��
