微流芯片检测流感病毒多重逆转录聚合酶链反应产物的实验研究_流感病毒是逆转录吗

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  摘要:[目的]建立应用微流芯片检测甲1型、甲3型、乙型流感病毒多重逆转录聚合酶链反应(mRT-PCR)产物的方法,在mRT-PCR扩增核酸的基础上自动化录敏的定量检测扩增产物,快速检测甲亚洲、已型流感病毒,帮助临床快速诊断和鉴别诊断其他和呼吸道病毒感染,以及明确流感病毒在人群中感染、流行情况。[方法]采用经MDCK细胞分离培养的甲1型、甲3型、已型流感病毒毒株病毒液,使用3组特异引物经mRT-PCR扩增枋酸,扩增产物分别采用毛细管电泳技术经Caliper1000微流芯片分析仪自动化检验和经2%琼脂糖凝胶电泳法检测。[结果]设计三组引物对相应甲1型、甲3型、已型流感病毒靶基因的mRT-PCR扩增产物片段分别为430bp、210bp、391bp,本实验mRT-PCR扩增产物经2%琼脂糖凝胶电泳,与Marker比照,DNA条带基本在此位点附近;产物采用毛细血管电泳法经Caliper1000微流芯征分析仪后,分别于413bp、203bp、379bp出现陡峭的峰,如图所示。[结论]应用微流芯片采用毛细血管电泳法可对流感病毒mRT-PCR产物进行定位及相对定量,有助于快速诊断病毒感染,有助于对流感的临测。
  关键词:微流芯片;多重逆转录聚合酶链反应;流感病毒
  中图分类号:R117 文献标识码:A 文章编号:1004-9231(2004)04-0157-04

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本文来源:http://www.zhangdahai.com/xindetihui/jingshijiaoyuxindetihui/2019/0329/42749.html

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