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[摘要]目的探讨谷氨酰胺(Gln)对铅致学习记忆减退小鼠的学习记忆能力的效果。方法小鼠饮用0.1%醋酸铅溶液2个月,再分别给予补充1%、2%Gln的饲料喂养2周后,用穿梭、避暗等实验方法测定小鼠学习记忆能力,同时测定小鼠脑单胺氧化酶(MAO)和超氧化物歧化酶(SOD)。结果铅中毒小鼠记忆能力明显降低,表现为避暗实验潜伏期缩短,穿梭实验主动回避次数减少,谷氨酰胺各剂量组潜伏期延长,主动回避次数增加,同时脑MAO降低,脑SOD升高。结论谷氨酰胺对醋酸铅所致小鼠记忆障碍具有保护作用,能增强学习记忆能力。
[关键词]谷氨酰胺;学习记忆;逃避潜伏期
铅是环境中广泛存在的一种强神经毒物,近年来我国环境铅污染也日益突出[1]。铅中毒主要表现脑发育期低水平接触铅所致的中枢神经系统不可逆的功能障碍,低水平铅暴露对成年人学习和记忆的影响也有报道[2,3]。
研究表明,脑内注射Glu或其受体激动剂具有促进记忆作用[4],谷氨酰胺(Gln)作为脑内Glu代谢的前体物质,可能通过Glu递质系统对脑功能发挥调节作用。本实验采用慢性醋酸铅染毒建立小鼠记忆障碍模型,观察谷氨酰胺对其学习记忆的影响。
1材料与方法
1.1实验材料
1.1.1实验动物18~22g雄性昆明小鼠40只,体质量(202)g。
1.1.2实验药品L-谷氨酰胺(上海贝基生物科技有限公司),SOD试剂盒、MAO试剂盒(南京建成生物工程研究所)。
1.1.3实验仪器7551型避暗反射箱、7533型穿梭反射箱(意大利UGOBASILE公司);TU-1901型紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)。
1.2实验方法
1.2.1实验动物分组与模型制备:小鼠随机分为4组,每组10只:对照组,模型组,谷氨酰胺低剂量组,谷氨酰胺高剂量组。模型组、谷氨酰胺低、高剂量组饮用0.1%醋酸铅溶液染毒,连续2个月,建立铅诱导记忆障碍小鼠模型,对照组饮用蒸馏水。空白组、模型组给予普通颗粒饲料,谷氨酰胺低、高剂量组在普通颗粒饲料基础上分别补充1%、2%Gln。
1.2.2小鼠避暗实验:小鼠头部背对洞口放入明室,计时开始,小鼠天生喜暗怕光,由通道进入暗室,计时结束,小鼠受到电击,记录小鼠由放入明室到进入暗室的潜伏期(Latency,L),此为训练成绩,24h后再测,为测试成绩。
1.2.3小鼠穿梭实验:小鼠放入一侧,适应2min。实验时,蜂鸣声音信号(70Hz)持续10s,小鼠如在10s内通过通道进入对侧,记为主动回避反应(activeavoidresponse,AV)一次,主动回避反应所需时间称为主动回避潜伏期(activeavoidlatency,AVLAT);小鼠如在10s内不进入对侧,则受到持续10s的电击,受到电击进入对侧则记为被动回避反应(passiveescaperesponse,ESC)一次。循环20次,24h后进行记忆保持实验。
1.2.4MAO和SOD的测定:小鼠处死,取脑称重,1g脑组织加入3ml磷酸缓冲液,匀浆,-80℃保存,按试剂盒方法测定MAO和SOD活性。
1.2实验数据处理与分析
所有数据用(±s)表示,采用spss11.0软件进行统计分析,组间以t检验进行统计处理,P
