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ELISA以其特异性好、灵敏度高、操作简便等优点,广泛应用于各个临床实验室。根据ELISA测定乙肝HBsAg的 原理,其基本操作过程是:样本 加酶标记物 洗板 加底物液 加终止液酶标仪比色 判定结果。针对加终止液酶标仪比色 判定结果这一步操作,为探讨终止反应后延时不同时间比色的样本OD值变化对结果的影响,作者对13名HBsAg阳性的血清标本进行测定。现将结果报告如下。
1材料和方法
1.1标本来源从428名来我院进行体检的体检者中检出的13例HBsAg阳性血清标本。
1.2仪器与试剂
1.2.1仪器KHB ST-360酶标仪,KHB ST-36W洗板机。
1.2.2试剂潍坊三维生物工程集团有限公司提供的乙型肝炎病毒表面抗原诊断试剂盒(酶联免疫法)。
1.3方法
1)对13例血清标本进行随机编号,依次为1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13号,用ELISA法检测13例血清标本HBsAg,按照试剂盒中的说明书操作。
2)在加入终止液混匀后立即在酶标仪上比色,记为
0 min的OD值。然后依次在加入终止液后的10 min、
20 min、30 min、40 min在酶标仪上比色,分别记为10 min、20 min、30 min、40 min的OD值。
3)结果判断。本试验的C.O.为0.105,以0 min的OD值/C.O.≥1者判为HBsAg阳性,13例血清全部阳性。
4)将0 min的OD值分别与10 min、20 min、30 min、40 min的OD值配成对子,共4对。用配对t检验,分别比较
0 min的OD值与10 min、20 min、30 min、40 min的OD值,结果(表1)。
2结果
从表1中可以看出,终止反应后延时10 min、20 min的OD值与0 min的OD值比较,P>0.05,无统计学差异。终止反应后延时30 min、40 min的OD值与0 min的OD值比较,P
