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[摘要] 目的:建立镇静安神类中成药及保健食品中非法添加的地西泮等14种化学成分的薄层色谱快速检测方法。方法:样品经甲醇提取后点于硅胶GF254薄层板上;以二氯甲烷-甲苯-丙酮-甲醇(8∶8∶3∶1)为展开剂,检测地西泮等10种苯并二氮杂卓类添加成分;以正庚烷-甲苯-丙酮-三乙胺(6∶5∶4∶1)为展开剂,检测巴比妥等4种巴比妥类添加成分;展开后置紫外光灯(254 nm)下检视。结果:在选定的色谱条件下,14种化学成分能得到较好的分离。结论:本法快速、简便,可作为镇静安神类中成药及保健食品中非法添加地西泮等14种化学成分的快速筛查方法。
[关键词] 镇静催眠药物;快速检测;TLC
[中图分类号] R965.1[文献标识码]A [文章编号]1674-4721(2009)07(b)-015-02
现代生活节奏加快,越来越多的人面临失眠的困扰,镇静安神类中成药及保健食品的市场需求日益增长,某些不法厂商为了增强产品功效、牟取暴利,擅自在镇静安神类中成药及保健食品中非法添加化学药品,对消费者的身体健康造成极大威胁[1-3]。针对这种现象,我们采用薄层色谱法检测安神类保健品及中药制剂中违法添加的地西泮、艾司唑仑、硝西泮、氯硝西泮、奥沙西泮、三唑仑、阿普唑仑、氯氮卓、马来酸米达唑仑、劳拉西泮、巴比妥、异戊巴比妥、司可巴比妥钠、苯巴比妥等14种镇静催眠化学成分,为食品、药品监管部门的打假行动提供一种操作简便的快速筛查方法。
1 仪器与试药
1.1 仪器
939型全自动薄层制造器(重庆南岸贝尔德仪器技术厂)、薄层数码照相装置(德国卡马公司)。
1.2 试剂和材料
地西泮等14种对照品均购自中国药品生物制品检定所;硅胶GF254薄层板为自制;甲醇、二氯甲烷、丙酮、甲苯、正庚烷、三乙胺等试剂均为分析纯;安神类中成药及保健食品为药监部门市场监管抽样。
2 方法与结果
2.1 TLC色谱系统Ⅰ(适用于地西泮等10种苯二氮卓类添加成分)
2.1.1 对照品溶液的制备分别精密称取地西泮、艾司唑仑、硝西泮、氯硝西泮、奥沙西泮、三唑仑、阿普唑仑、氯氮卓、马来酸米达唑仑、劳拉西泮对照品适量(约5 mg),置于10 ml量瓶中,加甲醇适量,超声10 min使之溶解,用甲醇稀释至刻度,摇匀,即得[4]。
2.1.2 供试品溶液的制备取供试品1次服用量(必要时研细),置于具塞锥形瓶中,加甲醇5 ml,超声提取10 min,放冷至室温,摇匀,滤过,即得。
2.1.3 测定法吸取上述对照品溶液5 μl、供试品溶液10 μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以二氯甲烷-甲苯-丙酮-甲醇(8∶8∶3∶1)为展开剂,展开、取出、晾干,置紫外光灯254 nm下检视[5]。
2.2TLC色谱系统Ⅱ(适用于巴比妥等4种巴比妥类添加成分)
2.2.1 对照品溶液的制备分别精密称取巴比妥、异戊巴比妥、司可巴比妥钠、苯巴比妥对照品适量(约10 mg),置于5 ml量瓶中,加甲醇适量,超声10 min使之溶解,用甲醇稀释至刻度,摇匀,即得[6]。
2.2.2 供试品溶液的制备取2.1.2项下供试品溶液,即得。
2.2.3 色谱条件吸取上述对照品溶液5 μl、供试品溶液10 μl,分别点于同一硅胶GF254薄层板上,以正庚烷-甲苯-丙酮-三乙胺(6∶5∶4∶1)为展开剂,展开、取出、晾干,置紫外光灯(254 nm)下检视[7]。色谱图见图2。
2.3 检测分析
检测13个生产厂家19批次样品,发现其中4批样品中非法掺入氯硝西泮,2批样品中非法掺入硝西泮,各有1批样品中分别非法掺入劳拉西泮、氯氮卓、艾司唑仑。其中有一标示厂家的同一品种样品有的批次非法掺入氯硝西泮,有的批次非法掺入硝西泮;另一标示厂家的同一品种样品有的批次非法掺入氯硝西泮,有的批次非法掺入劳拉西泮。
3 讨论
薄层色谱法系统Ⅰ中10种苯二氮卓类成分大多能得到较好的分离,但是硝西泮与氯硝西泮、奥沙西泮与劳拉西泮、三唑仑与阿普唑仑3组化合物斑点的Rf值较接近,如果供试品在对照品相应位置检出斑点,可根据前述情况进行预判断,最终结果的甄别需用气质联用法或液质联用法进行[8]。本文中检出添加化学成分的供试品经气质联用法及液质联用法验证,与本法检测结果一致。实验过程中我们发现巴比妥类成分在薄层色谱法系统Ⅰ不显示斑点,而在展开剂中加入少量的碱,则可以出现斑点,因此本法采用薄层色谱系统Ⅱ进行检测,4种巴比妥类成分分离良好,斑点清晰。
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(收稿日期:2009-03-18)
