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【摘 要】 目的：建立参芪健胃颗粒中芍药苷含量的HPLC测定方法。方法：采用ShimpackVP-ODS C18色谱柱,流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(14:86),检测波长为230nm,流速为0.8mL•min-1,柱温为30℃。结果：芍药苷进样量在0.1626～1.0841μg 范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9996)；平均回收率为98.45% ,RSD为1.28% （n=6）。结论：该方法简便，可行、重现性好，可作为参芪健胃颗粒的质量控制方法。
【关键词】HPLC法；参芪健胃颗粒；芍药苷；含量测定
Determination of Paeoniflorin in Shen Qi Jianwei particles by HPLC
Wang Chunli
(Zhoukou institute for food and drug control,Henan Province,466000)
【Abstract】Objective To establish a HPLC method to detdrmine the content of Paeoniflorin in Shen Qi Jianwei particles .Methods Shimpack VP-ODS C18 column was used, The mobile phase of acetonitrile -0.1% phosphoric acid (14:86) at a flow rate of 0.8mL•min-1 and the detection wavelength was set at 230nm， the column temperature was 30℃. Results The calibration curve of Paeoniflorin was in a good linearity over the range of 0.1626～1.0841μg (r = 0.9996).The average recovery was 98.45%. with RSD of 1.28%（n=6）. Conclusion The method is simple, feasible and reproducible, and it can be used for the quality control of Shen Qi Jianwei particles
【Keywords】HPLC；Shen Qi Jianwei particles；Paeoniflorin；Determination
参芪健胃颗粒由党参、当归、白芍、黄芪、桂枝等十四味药经加工制成。具有温中健脾，理气和胃之功效。主治脾胃虚寒型的慢性萎缩性胃炎，适用于胃脘胀痛、痞闷不适，喜热喜按，嗳气呃逆等症。参芪健胃颗粒收载于卫生部药品标准中药成方制剂第十册[1]，标准中只有鉴别项，为有效控制产品质量，本文参考有关文献[2-3]，采用高效液相色谱法(HPLC)对处方中白芍的有效成分芍药苷含量进行了测定，经方法学验证,结果较满意。
1 仪器与试药
LC-2010CHT型全自动高效液相色谱仪(日本岛津公司), 92SM-202A-DR电子分析天平，超声波震荡器。
芍药苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号:0736-200934,含量:95.7%)。参芪健胃颗粒样品（河南辅仁堂制药有限公司，批号：20091210、20100215）。乙腈为色谱纯，重蒸馏水，磷酸、乙醇、甲醇为分析纯。
2 溶液的制备
2. 1对照品溶液
精密称取芍药苷对照品4.72mg，置25mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取15mL置50mL量瓶中, 加甲醇稀释至刻度,摇匀，即得。
2.2 供试品溶液
取本品内容物,精密称取2.0610g,置具塞锥形瓶中，精密加入60%甲醇50mL,称定重量，超声处理(功率：250W，频率：40kHz)30min，放冷，再用60%甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.3 阴性样品溶液
按处方比例及制备工艺，配制不含芍药苷的阴性对照样品，照“2.2”项下方法制备阴性样品溶液。
3 方法与结果
3.1 色谱条件与系统适用性试验
色谱柱：ShimpackVP-ODS C18（4.6mm×15cm，5μm）；流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液(14:86)，检测波长为230nm，流速为0.8mL•min-1,柱温为30℃,进样量10μl。
在上述条件下理论板数按芍药苷峰计算为5299，芍药苷峰与其它峰能达到基线分离，阴性对照无干扰，色谱图如下：
a
b
c
a.对照品； b.样品； c.阴性样品； 峰为芍药苷。
3.2 线性关系考察
分别精密吸取芍药苷对照品溶液(浓度为0.0542mg•mL-1)3、5、8、10、12、15、20μl注入液相色谱仪，测定峰面积，以进样量（μg）为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标，求得回归方程：Y=1740053X+28345 r=0.9996
实验结果表明：芍药苷进样量在0.1626～1.0841μg 范围内，线性关系良好。
3.3 精密度试验
精密吸取对照品溶液（批号：20091210），连续进样6次，测得芍药苷峰面积的平均值为995802，RSD为0.79%。
3.4 稳定性试验
取供试品溶液（批号：20091210 ），按上述色谱条件分别于0、2、5、8、12h测定，其峰面积的平均值为484723，RSD为1.12%，结果表明供试品溶液制备12h稳定。
3.5 重复性试验
取同一批号样品(批号：20091210 ）6份，按“2.2“项下制备供试品溶液，在上述色谱条件下测定，芍药苷含量的平均值为0.6401mg•g-1，RSD为1.24%。结果表明，重复性良好。
3.6 加样回收率试验
精密量取已知含量的供试品溶液（0.02638 mg•mL-1 ） 3mL 共6份,分成3组,各置于10mL量瓶中,每组各精密加入对照品溶液3、5、7 mL，再加甲醇至刻度，摇匀，按上述色谱条件测定其含量，计算回收率，测定结果见表1。
表1 加样回收率试验结果(n=6)
样品含量（mg） 加入量（mg） 测得量（mg） 回收率（%） 平均回收率（%） RSD（%）
0.07914 0.1626 0.2370 97.1
0.07914 0.1626 0.2389 98.3
0.07914 0.2710 0.3458 98.4 98.45 1.28
0.07914 0.2710 0.3506 100.2
0.07914 0.3794 0.4475 97.1
0.07914 0.3794 0.4570 99.6
3.7 样品测定
取2批样品,依法制定供试品溶液,分别按以上方法,按峰面积以外标法计算其含量,结果见表2。
表2 2批样品的测定结果（mg•g-1）
批号 测得含量 平均含量
20091210 0.6491 0.6502 0.6496
20100215 0.6811 0.6806 0.6808
4 讨论
参照有关标准[2],选择230nm作为芍药苷含量测定的波长。
参考文献[2-3]的样品制备方法,分别以稀乙醇溶液、60%甲醇溶液作为超声提取溶剂, 实验发现以60%甲醇、超声30min处理的样品溶液峰形较好,保留时间适中,且峰面积和出峰时间较稳定。
本文采用高效液相色谱法,选用芍药苷作为指标性成分,对参芪健胃颗粒中的白芍含量进行有效的质量控制。在分别对精密度、稳定性、重复性和回收率进行考察后，认为所建立的方法稳定、准确、可行，能有效的控制该药的内在质量。
参考文献
[1] 卫生部药品标准[S].中药成方制剂第十册，WS3-B-1973-95.
[2] 中国药典[S]. 一部,2010：96-97.
[3] 贾乐陶，王慧，陈进等.高效液相色谱法测定心舒宝胶囊中芍药苷含量[J].中国药业,
