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【摘要】 目的 探讨葡萄球菌的耐药性,为临床用药提供参考依据。方法 采用K-B法药敏试验对158株葡萄球菌进行耐药性分析、琼脂扩散法测MRS、Nitrocefin纸片法测定其β-内酰胺酶。结果 158株葡萄球菌中耐药菌占67.1%,其中MRSA 为38.0%,MRSCoN 为29.1%。结论 临床医生在治疗葡萄球菌引起的感染时应根据药敏试验结果选择适宜的抗菌药物。 【关键词】葡萄球菌;耐药性;MRSA;MRSCON
葡萄球菌是医院感染的重要病原菌之一,其中以耐甲氧西林葡萄球菌尤为严重。随着抗菌药物种类的不断增加及临床的广泛使用,耐甲氧西林葡萄球菌的感染日渐增多,常常导致治疗失败、感染复发、延长住院日、增加昂贵抗生素的使用等。为了解九台市部分医院的葡萄球菌感染及耐药状况,我们收集了从九台市人民医院及九台市中医院临床各类标本中分离的158株葡萄球菌,对其耐药性进行了分析。
1 材料和方法
1.1 菌株来源 收集2008年6月至2010年5月间九台市人民医院临床各类标本158株,其中呼吸道标本55株、尿34株、分泌物30株、粪便9株、血液12株、其他标本18株。
标准质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923和大肠埃希菌ATCC25922,苯唑西林敏感对照菌为金黄色葡萄球菌ATCC29213,苯唑西林耐药对照菌株为金黄色葡萄球菌ATCC38591[1],均购自国家卫生部临床检验中心。
1.2 抗菌药物 苯唑西林等16种抗生素纸片均购自浙江军区后勤部卫生防疫检验所。
1.3 培养基 MH琼脂培养基购于中国药品生物制品检定所。
1.4 β-内酰胺酶测定纸片 由大连辉瑞制药有限公司提供。
1.5 方法
1.5.1 按常规方法培养分离和鉴定葡萄球菌,并做血浆凝固酶试验。
1.5.2 药敏实验 K-B法,按美国临床实验室标准化委员会(NCCLs)标准进行。
1.5.3 MRSA检测[2]
将药敏试验中耐苯唑西林(1 μg/ml,≤10为耐药,≥13为敏感)的菌株做适度稀释,调整菌量为0.5麦氏单位,接种于含6 μg/ml苯唑西林,4%NaCl的MH培养基上,经35℃培养24 h,生长者为MRSA。
1.5.4 β-内酰胺酶检测[3] 按β-内酰胺酶测定纸片的说明对凝固酶阳性的葡萄球菌进行操作和结果判定。
2 结果
2.1 凝固酶试验及耐药性检测结果见表1。
158株葡萄球菌中,金黄色葡萄球菌87株,凝固酶阴性葡萄球菌71株。MRS 106株,检出率为67.1%,其中MRSA为38.0%,MRSCoN为29.1%,。
表1
凝固酶试验及MRS检测结果
coagulase(+)coagulase(-)
对甲氧西林耐药6046
对甲氧西林敏感2725
2.2 158株葡萄球菌对16种抗菌药的抗菌谱见表2。
表2
158株葡萄球菌对16种抗菌药的耐药率(%)
抗菌药MRSA(60)MSSA(27)MRSCON(46)MSSCON(25)
苯唑西林60(100.0)0(0.0)60(100.0)0(0.0)
万古霉素0(0.0)0(0.0)0(0.0)0(0.0)
利福平3(5.0)2(7.4)5(10.9)6(24.0)
克林霉素51(85.0)15(55.6)41(89.1)10(40.0)
头孢唑啉49(81.7)4(14.8)40(87.0)4(16.0)
庆大霉素54(90.0)8(29.6)26(56.5)11(44.0)
丁胺卡那29(48.3)0(0.0)14(30.4)0(0.0)
红霉素49(81.7)16(59.3)43(93.5)17(68.0)
复方新诺明54(90.0)19(70.4)43(93.5)21(84.0)
青霉素-G56(93.3)25(92.6)45(97.8)8(32.0)
头孢他定55(91.7)14(51.9)44(95.6)5(20.0)
头孢曲松56(93.3)7(25.9)28(60.9)4(16.0)
泰能6(10.0)0(0.0)6(13.0)2(8.0)
哌拉西林43(71.7)14(51.9)41(89.1)9(36.0)
环丙沙星53(88.3)6(22.2)32(70.0)9(36.0)
诺氟沙星55(91.7)5(18.5)31(67.4)17(68.0)
注:MRSA 耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌,MSSA 对甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌,MRSCON 耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌,MSSCON 对甲氧西林敏感的凝固酶阴性葡萄球菌
万古霉素对106株耐药葡萄球菌有良好的抗菌活性,仅有10.0%的MRSA和13.0%的MRSCON对泰能耐药,MRSA、MRSCON对头孢菌素类、氟喹诺酮类抗菌药物的耐药性
作者单位:130500吉林省九台市人民医院检验科(于丽莉);
北华大学医学院(王艾琳 李坚)
明显增加,大多数抗菌药物尤其是头孢菌素类对MSSA作用较好,而MSSA对红霉素、青霉素、克林霉素的耐药率分别为 59.3%、92.6%、55.6%。葡萄球菌对复方新诺明的耐药性在70.4%~93.5%。详见表2。
2.3 β-内酰胺酶检测结果 受试菌产酶株占80.4%,其中MRSA产酶株占85.7%,MSSA产酶株占75.4%,二者无统计学差异。
3 讨论
3.1 158株葡萄球菌中,MRS葡萄球菌的检出率高达67.1%,其中MRSA的平均耐药率为69.0%,显著高于MSSA31.0%的耐药率,并且呈现多重耐药性;对β-内酰胺类、大环内酯类、喹诺酮类、磺胺类抗菌药及克林霉素等高度耐药。MRSCON的耐药率为64.8%也明显高于MSSCON的耐药率35.2%,说明MRS葡萄球菌在我市部分医院临床标本中已成为重要的耐药菌株。
3.2 目前MRSA的临床分离国内报道不尽相同[3],本资料MRSA占金葡菌比率为69.0%,检出率低于北京、上海等地,MRSA对抗菌药物的耐药率普遍略低于上述地区,可能与地区差异、抗生素选择性压力有关。
3.3 MRS对β-内酰胺类抗菌药耐药性可能是由于3种不同机制引起:1MRS产生一种新的青霉素结合蛋白(PBP-2′);2失活酶尤其是β-内酰胺酶的产生;3细胞壁通透性降低。MRS对大环内酯类及克林霉素的耐药性可能是由于MRS的核糖体23SrRNA被甲基化所致[3]。MRS对喹诺酮类和复方新诺明的耐药机制目前还不清楚。本文报道凝固酶阳性葡萄球菌产酶率为80.70%。而MRSA与MSSA产酶率差别不显著,其耐药与产酶量、种类可能有关。
3.4 本资料显示,158株葡萄球菌对红霉素、复方新诺明呈高度耐药,因此,临床医生在治疗葡萄球菌感染的病例时,应尽量根据药敏实验选择敏感药物进行治疗。值得注意的是,体外药敏实验时,虽然MRS对泰能等β-内酰胺抗菌药表现出敏感结果,但用药无效,应向临床解释。因为已知的MRS感染的绝大多数病例对该抗菌药治疗反应很差,而且尚缺乏令人信服的临床数据来证实这些药物的临床效力。
实验结果表明,临床上耐药菌的感染日益严重,正确及时地检出MRS并协助临床制定抗感染方案,避免滥用抗菌药是控制MRS进一步流行的关键。医院内MRS感染的发生与原发疾病轻重、免疫功能、长期广谱抗菌药物应用等多种因素有关,MRS定植或感染者常为感染源,医护人员、医疗机械常为其传播媒介,对MRS感染,除了强调根据药敏试验合理选药外,也应依据感染部位、免疫状况、合并症加强综合治疗,还应重视清除定植,切断传播,最大可能降低感染危险。
参考文献
[1] 李雅卿,黄卫红.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌医院感染临床分析.中华医院感染学杂志,2002,12(2):151.
[2] 宋世平,解晓珍,席道友,等.158株金黄色葡萄球菌的耐药性监测与分析.中华医院感染学杂志,2003,13(4):384-385.
[3] 黄加权,李小丹,杨慧,等.耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药性研究.同济医科大学学报,2000,29(3):264-267.
