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【摘要】 目的 探讨食管癌组织中p53蛋白的表达水平和临床意义。方法 用免疫组织化学染色SP法,检测62例食管癌组织p53蛋白过度表达情况。分析其与食管癌患者性别、年龄、肿瘤分化程度、肿瘤浸润程度及淋巴结转移等之间的关系。结果 p53蛋白在62例食管癌组织中表达的阳性率为48.4%。在男性和女性患者分别为50.0%和45.0%(P>0.05);低于60岁年龄组和高于60岁年龄组分别为46.9%和50.0%(P>0.05):高、中分化组和低分化组分别为47.6%和50.0%(P>0.05);肿瘤浸润黏膜及肌层的患者表达阳性率为61.1%,浸润全层时为30.8%(P[1]。当前临床就诊的病例多属于中晚期,其中能够行根治性切除术者只有1/3,且手术切除的5年存活率仅25%左右[2]。因此,就目前的状况来看,降低食管癌患者死亡率的关键是早期发现、早期诊断和早期治疗。食管癌的发生和发展是一个涉及多因素、多阶段、多基因变异积累及相互作用的复杂过程。在分子水平上涉及多个原癌基因、抑癌基因以及蛋白质的改变。所以,分子生物学方法现已成为EC早期诊断、判断预后、治疗及预防的重要手段和途径。
1 材料与方法
1.1 一般资料 2006~2007在我院行食管癌手术的62例患者,其中男42例,女20例,年龄34~76岁,平均56岁,术后病理检查结果均为鳞癌。其中高、中分化48例,低分化14例,伴有淋巴结转移的患者38例,无淋巴结转移的患者24例,癌浸润至黏膜下层3例,肌层23例,全层36例,所有病例术前均未经放化疗。
1.2 实验材料和方法 SP试剂盒、抗p53单克隆抗体购自福州迈新生物技术公司。免疫组织化学染色:常规切片,脱蜡水化。3%H20。溶液作用5 min,微波炉抗原修复。加10%正常山羊血清,室温下孵育5 min。倾去血清,加入P53单克隆抗体工作液,置于4度冰箱中过夜。PBS液洗片后加入二抗,37度恒温箱中孵育20 min。洗片后加入LSAB复合物,37度恒温箱中孵育20 min。PBS液洗片,配制DAB显色液,加入切片中显色,封片。
1.3 免疫组化结果判断 P53基因蛋白阳性表达呈棕褐色颗粒定位于细胞核内,阳性细胞75%为(+++)。
1.4 统计学处理 采用spss 13.0统计,各项目内的计数资料采用卡方检验,P0.05);低于60岁年龄组和高于60岁年龄组分别为46.9%和50.0%(P>0.05):高、中分化组和低分化组分别为47.6%和50.0%(P>0.05);肿瘤浸润黏膜及肌层的患者表达阳性率为61.1%,浸润全层时为30.8%(P[3]。同时,这些突变引起氨基酸的取代,出现蛋白质结构的变化,所表达的蛋白质半衰期较长,且突变型P53蛋白具有癌蛋白活性且稳定性增高,因此可以检测出来,即提示利用免疫组化检测p53基因蛋白表达是突变型[4]。在食管癌中,有30%~50%的患者存在P53基因的突变。P53基因突变可能是食管细胞癌变的一个早期事件,这在早期的研究中已经被证实。目前开展了多项针对P53基因的靶向治疗的研究[5]。(食管癌组织和癌旁组织)
国外有学者研究证实,P53基因突变与肺癌易发生局部淋巴结转移、预后差有关J[6],就其在食管癌中的研究鲜有报道。本研究结果显示的P53基因蛋白表达与肿瘤的浸润深度和淋巴结转移状态有关,而后者已经证实食管癌预后不良主要因素,因此本结果提示P53蛋白的表达可能食管癌预后不良指标之一。
参 考 文 献
[1] Parkin D M .Globalcancer statistics in the year2000.Lancet Oneol,2001,2(9):533-543.
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[3] 李辉,阎天生,张晓娜.食管癌早期诊断的研究进展 .河北医药,2006,28(8):755-757.
[4] 苗战会,路平,陆志红,李荣.p 5 3蛋白在食管鳞癌中的表达及其临床病理参数关系 .Medical Information Medicine&Surgery,2009,22(8):696-797
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[6] MishinaT,Dosaka A H,HommuraF,et al.Cy clinEexpress,apotentialprognosticmarkerfornon-small celllungCancer.ClinCancer Res,2006,12:11-16.
