薄层扫描法测定枫香槲寄生中齐敦果酸的含量|枫香槲寄生

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  [摘要]目的:建立枫香槲寄生含量测定方法。方法:采用薄层扫描法,波长:λs=520nm,λR=700nm。结果:齐敦果酸在0.621-4.968μg范围内有良好的线性关系,平均加样回收率为96,6%(RSD=2.09%)。结论:本方法准确、重现性好,适用于枫香槲寄生的质量控制。
  [关键词]枫香槲寄生;齐敦果酸;含量测定;薄层扫描
  [中图分类号]R286.0 [文献标识码]A [文章编号]1007-8517(2011)09-0047-02
  
  桑寄生科槲寄生属植物枫香槲寄生,为我国传统中药“桑寄生”的商品药材之一。该种植物植株形态特异,民间称之为螃蟹夹,又称扁枝寄生。由于寄生植物种类的不同,枫香槲寄生在各地有不同的名称,如广东称“枫香寄生”,广西称“枫树寄生”,四川称“桐寄生”。枫香槲寄生药材功能为祛风湿,补肝肾,强筋骨,安胎。用于风湿痹痛,腰膝酸软,胎动不安,与《中国药典》收载的“槲寄生”(Viscum coloratu-m(Komar.)Nakai)具有同等功效。经研究,枫香槲寄生的化学成分主要有齐敦果酸、齐敦果酸酯、古柯二醇等三萜成分及肌醇,为进一步准确地鉴定枫香槲寄生,本文采用薄层扫描测定枫香槲寄生中齐敦果酸的含量,取得良好效果。
  
  1、仪器与试药
  
  岛津CS-9301薄层扫描仪;定量毛细管(U.S.A byDrummond Scientific Co);电子分析天平(XS205DUalRabge);薄层硅胶G板(青岛海浪硅胶干燥剂厂);齐敦果酸对照品(中国药品生物制品检定所提供,供含量测定用);枫香槲寄生(笔者采集并经成都中医药大学峨眉学院祝正银教授鉴定);所用试剂均为分析纯。
  
  2、薄层色谱条件及扫描条件
  
  吸附剂:硅胶G;展开剂:环己烷一三氯甲烷一乙酸乙酯一甲醇(20:5:8:0.1);显色方法:喷以10%硫酸乙醇溶液,于110℃加热至斑点显色清晰。扫描波长:λS=520nm,λR=700nm。
  
  3、方法与结果
  
  3.1对照品溶液的制备
  取齐墩果酸对照品适量,精密称定,加无水乙醇制成每1ml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。
  3.2供试品溶液的制备
  取本品粗粉约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入盐酸乙醇溶液(1-10)30ml,称定重量,超声处理1.5小时。放冷,再称定重量,用盐酸乙醇溶液补足减失的重量,摇匀,滤过。精密量取续滤液15ml,浓缩至约5ml,加水10ml,转移至分液漏斗中,加三氯甲烷振摇提取5次(20ml、20ml、20ml、15ml、15ml),合并提取液,回收溶剂至干,残渣加三氯甲烷5ml使溶解,置中性氧化铝小柱(100-200目,5g,内径0.9cm)上,用三氯甲烷-甲醇(80:1)30ml洗脱,弃去洗液,再用三氯甲烷-甲醇(20:1)50ml洗脱,收集洗脱液,回收溶剂至干,残渣加无水乙醇使溶解,转移至5ml量瓶中,稀释至刻度,摇匀,即得。
  3.3线性关系考察
  精密吸取上述对照品溶液(0.621mg/ml)1、2、3、4、6、8μl,点于同一硅胶G薄层板上,展开,取出,晾干,显色,测定峰面积,见图2。以峰面积为纵坐标,齐敦果酸含量为横坐标,绘制标准曲线并计算得回归方程:Y=858.67X+229.89,r=0.9989。见图1。
  3.4稳定性试验
  精密吸取齐敦果酸对照品2μl,点于薄层板上,展开,显色,每隔15min测定1次斑点的峰面积积分值,共测定5次,结果表明齐敦果酸显色后在1h内稳定,RSD=1.11%。
  3.5精密度试验
  用定量毛细管吸取对照品溶液2μl,点相同浓度的5个点于同一块薄层板上,展开,显色,扫描,测量峰面积的RSD为1.39%。结果表明:本法精密度良好。
  3.6重复性试验
  精密称取扁枝槲寄生药材(峨嵋山市大庙柿子坪)样品5份,每份约1g,按前述供试品制备方法及色谱条件进行齐敦果酸含量测定,结果样品5份平均含量为0.243%,RSD=1.39%。结果表明:本法重复性良好。
  3.7回收率试验
  采用加样回收方法测定回收率。取扁枝槲寄生药材(峨眉山市大庙柿子坪)样品5份(测定含量为0.245%),每份约0.5g,精密称定;分别加入齐敦果酸对照品1.242mg,按正文供试品制备方法及色谱条件进行齐敦果酸"含量测定。结果见表1。
  3.8样品测定
  精密吸取供试品溶液5μl、对照品溶液2μl与4μl,分别交叉点于同一硅胶G薄层板上,按上述条件测定6批样品中齐敦果酸含量,结果见表2。
  
  4、讨论
  
  采用薄层扫描法测定枫香槲寄生中齐敦果酸的含量,其方法简便,结果准确可靠,可以用于枫香槲寄生的质量控制。
  
  参考文献:
  [1]国家药典委员会,中国药典(一部)
  [s],化学工业出版社,2005:258
  [2]中国科学院中国植物志编辑委员会,中国植物志(第24卷)[M],科学出版社,1983:156

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