【www.zhangdahai.com--整改措施】
摘 要 目的：建立高效液相色谱法测定小儿退热口服液中丹皮酚的含量。方法：采用C18柱，乙晴―水（45：55）为流动相；检测波长为254nm。结果：线性关系良好，平均回收率为100.5%，RSD为1.0%。结论：本方法精密度高，分离度良好，可用于小儿退热口服液的质量控制。�
关键词 高效液相色谱法 丹皮酚 含量测定��
小儿退热口服液为部颁标准提高标准的品种之一，但由于原质量标准过于简单，仅有鉴别项，无含量测定项［1］，无法控制产品的质量，针对厂家提出的要求，增加本品的含量测定项，在此，采用高效液相色谱法测定本品中所含有效成分丹皮酚的含量。液相色谱法操作简便、精密度好、稳定、结果可靠，由于本品为液体制剂，采用本法可直接进样，且分离较好，减少误差。采用高效液相色谱法测定小儿退热口服液中丹皮酚的含量提高了药品质量标准，可控制成品的质量。�
1 仪器与试药�
1.1 仪器 LC-10A型高效液相色谱仪（日本岛津公司），SPD-10A检测器，威马龙色谱工作站。�
1.2 试药 小儿退热口服液及阴性样品由新天药业有限公司提供，丹皮酚对照品由中国药品生物制品鉴定所提供（供含量测定用）。乙腈为色谱纯，水为二次重蒸馏水。�
2 方法与结果�
2.1 色谱条件 色谱柱为SphevisorbC18(5μm，250mm×5.0mm)，流动相∶乙腈―水（45∶55），柱温：25℃，流速：1ml/min，检测波长：254nm。�
2.2 对照品溶液的制备 取丹皮酚对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，摇匀，即得。对照品溶液HPLC色谱图见图1。�
2.3 样品溶液的制备 取本品适量，过滤，弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液。供试品溶液HPLC色谱图见图2。�
2.4 标准曲线的制备 精密吸取丹皮酚对照液（0.0501mg/ml）2，6，10，14，18μl进样，记录色谱，以峰面积为横坐标，以进样量（μg）为纵坐标作图，计算回归方程为：C=5.4684×10-7A-6.5334×10-3（r=0.9998）。结果表明丹皮酚在0.1002μg~0.9018μg范围内线性关系良好。�
2.5 精密度试验 分别精密吸取供试品溶液10μl，重复进样5次，按正文所述色谱条件测定，记录色谱，计算，RSD为0.87%，说明有良好的精密度。�
2.6 重现性试验 取一样品按供试品溶液制备方法制备5份供试品溶液，分别精密吸取供试品溶液10μl进样，记录色谱，计算，RSD为1.2%，说明有良好的重现性。�
2.7 加样回收率试验 采用加样回收，精密吸取已测定含量的样品1ml，再加入丹皮酚对照品（0.0501mg/ml）1ml，按正文所述色谱条件测定，计算回收率，结果见表1，丹皮酚的回收率为100.5%，RSD为1.0%，说明本法有良好的回收率。
2.8 空白试验 按处方比例及生产制备方法制得阴性样品，按“样品溶液制备”项下制备阴性溶液，进样10μl，记录色谱图，结果样品色谱图在对照品色谱图出峰处无对应的峰，表明阴性样品溶液在丹皮酚出峰处没有干扰峰。阴性样品溶液HPLC色谱图见图3。�
2.9 测定法 分别精密量取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。�
3 样品测定�
取所有样品按样品溶液制备操作，分别吸取对照品溶液与样品溶液各10μl进样，按上述色谱条件测定，记录色谱，计算，结果见表2。�
4 讨论�
在样品溶液的制备中，曾采用浓缩后乙醚提取，蒸干，加甲醇定容后进样，但由于丹皮酚易挥发，操作过程容易损失，造成结果不准确，经色谱试验筛选，结果采用直接进样，分离度好，丹皮酚出峰处无杂质干扰，故在此取本品直接进样。流动相［２］［３］［４］曾采用以甲醇-水-冰[CM（14]醋酸（55∶45∶2）、甲醇-水（55∶45）、乙腈-水-冰醋酸45∶55∶0.2）、乙腈-水�（43∶57）为流动相进行试验，在其他条件相同时，采用乙腈-水-冰醋酸（45∶55∶0.2）、乙腈-水（45∶55）为流动相分离效果均较好，但由于酸对色谱柱有一定的损害，导致使用寿命缩短，故在此选择乙腈-水（45∶55）为流动相。本实验结果表明，在此色谱条件下，采用高效液相色谱法测定小儿退热口服液中丹皮酚的含量，方法简便，快速，重现性好。�
参考文献
1 中华人民共和国卫生部药品标准中药成方制剂.中药成方制剂.第6册.1990.19.�
2 苗明三，李振国.现代实用中药质量控制技术.人民卫生出版社，2000.�
3 中华人民共和国国家药典委员会.中华人民共和国药典（一部）.化学工业出版社，2000.�
4 中药化学对照品工作手册.中国医药科技出版社,2000.61.�
(收稿日期：2007年5月4日)
