【www.zhangdahai.com--校园安全演讲稿】
【摘要】目的：探讨新鲜全血用于不同血细胞分析仪校准的可行性。方法：以KX-2l血细胞分析仪作为参考比对仪器，应用新鲜全血对两台COULTER AC Tbiff2血细胞分析仪进行校准，监测仪器的稳定性和结果的准确性，根据监测结果校准仪器。结果：对COULTER AC Tbiff2血细胞分析仪指标系数进行调整后，本科室内3台血细胞分析仪检测结果具有可比性，可替换使用。结论：新鲜全血用于不同血细胞分析仪的校准可提高同一实验室不同仪器之间检测结果的准确性和一致性。
【关键词】新鲜全血；血细胞分析仪 校准
Calibrate Different Hematology Analyzers Using Fresh Blood
ZHANG MING-hua（Department of Laboratory,The fourth People"s Hospital OF Ziyang city, Ziyang china ,641300)
【Abstract】Objective：To investigate the feasibility of the calibration of hematology analyzers by fresh blood．Methods：The KX-2l hematology analyzer was selected as reference analyzer，and two COULTER AC Tbiff2 hematology analyzers were calibrated by fresh blood．Stability of the hematology analyzer and accuracy of the results were monitored，and to calibrate the hematology analyzer according to the result．Results： Items of these analyzers were calibrated．It showed that the results of the three analyzers of our division had good comparability and could be replaces by each other．Conclusion：To calibrate hematology analyzers with fresh blood can improve the accuracy of the hematology analyzer．
【Key words】Fresh blood；Calibration；Hematology analyzer
血细胞分析仪因其操作简便、快速、精密度高、结果计数准确，已逐渐成为临床实验室的主要检测手段，其检测结果的准确性直接影响患者的诊断和治疗【1】。在我国，同一实验室同时使用不同厂家或同一厂家不同生产型号的血细胞分析仪的现象普遍存在，如果采用各仪器配套校准品进行仪器校准，可能会出现同一血样标本在同一实验室的不同仪器上检测出的结果不一致，给临川诊断带来不确定，妨碍了疾病诊断。我科采用新鲜全血作为校准物，对本实验室内的3台血细胞仪进行校准和评价，效果满意。现将相关情况报道如下。
1 材料和方法
1.1 标本来源
选取我院住正常体检者的乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）抗凝全血，白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（Hb）及血小板（PLT）4个项目分为高、中、低值标本各10份。
1.2 仪器与试剂 2台美国COULTER AC Tbiff2血液分析仪及配套试剂和质控物，1台日本SYSMEX公司的KX-2l血液分析仪及进口配套试剂、校准品和质控物。EDTA-K2真空抗凝管（浙江生产，批号20090520，有效期201105）。
1.3 方法
1.3.1 校准前的准备 对仪器的操作步骤熟练，所校准的仪器内部通道及时清洗，背景计数和携带污染率符合质控要求。
1.3.2 标本的采集 随机抽取成年健康体检者新鲜全血标本10份，每份标本在每台血细胞仪上检测11次，取第2-11次的平均值作为测定结果。每份标本取总量30ml，分别保存于3个EDTA-K2真空抗凝管内，分别用于仪器的定值、校准和校准后验证。保证标本采集后2小时内完成检测【2】。进入校准的标本应满足WBC（4.0-10.0）×109／L，RBC（3.5-5.5）×1012／L ，Hb 100-170 g／L，PLT(100～300)×109／L。
1.3.3 参考比对仪器的确定与新鲜全血标本的定值 根据仪器精密度、参加卫生部室间质评成绩确定KX-2l为参考比对仪器，其他为测试仪器。用配套校准品对参考仪器KX-2l进行严格校准。取第1支抗凝管内新鲜全血在KX-2lN上连续检测11次，去除第1次的结果，计算第2-11次结果的均值作为参数的靶值。
1.3.4 比对仪器的校准
取第2支抗凝管内新鲜全血按高、中、低值对两台待测血细胞分析仪进行校准。以1988年美国临床实验室改进修正案【3】为参照，按照允许误差范围的1/4来确认这3台血细胞分析仪的相对偏差，即按以下标准判断待测仪器是否需要校准：WBC≤3.75%，RBC≤1.50%，Hb≤1.75%，PLT≤6.25%。若待测仪器与参考仪器检测结果偏差小于上述参数范围，且相关系数γ＞0.95，说明这3台仪器检测结果一致性较好，不必更改校正系数；若偏差超出上述偏差范围，则应以参考仪器对新鲜全血进行定值后校准待测仪器，将新的校准系数（新校准系数=原校准系数×靶值/仪器检测值）输入仪器替换原校准系数即可；若偏差大于上诉参数的10%（PLT偏差可＞15%）时，则需请厂商维修人员进行原因检查和处理【4】。
1.3.5 校准结果的验证
取第3支抗凝管内的新鲜全血，在两台待测血细胞仪上严格按仪器操作规程连续检测11此，分别计算第2～11次结果的均值及其与靶值的偏差，观察是否在校准判断标准以内，若不在此范围内，应继续调整。
1.3.6 校准后的处理
每月对3台血细胞仪进行重新保养、维护、校准及比对试验。注意仪器是否存在偶然误差或系统误差，偶然误差应及时查明原因，系统误差应重新进行上述比对校准试验，调整校准系数。
1.3.7 统计学分析
用spssl3.0统计软件对数据进行统计学处理和相关系数分析。检验水准为α=0.05。
2 结果
2.1 三台血细胞分析仪校准前测定新鲜全血的变异系数见表1，仪器重复性很好，符合校准条件。
表1 各仪器重复测定结果的变异系数(CV，%)
2.2 通过对KX-2l血细胞分析仪定值，并把所定值作为靶值。将新鲜全血在其他两台待测血细胞仪上进行结果测定，其与靶值的偏差见表2，计算新的替换校准系数。
表2 校准前新鲜全血测定的各仪器的偏差(％)
注：*偏差超出允许范围，须对系数进行调整
2.3 待测血细胞仪更换为新的校准系数后，检测其与靶值的偏差并确定各项参数的测定结果见表3、表4。
表3 校准后新鲜全血测定的各仪器的偏差(％)
表6校准后新鲜全血在各仪器上的测定结果(Χ±s)
3讨论
随着医疗技术和水平的发展，各种医疗检测仪器不断进入临床，为临川诊断和治疗提供了科学依据和指导思路。其中血细胞分析仪的出现给血液常规检查带来了革命性的变化，特别是近年来推出的各种新型全自动分析仪，无论是检测结果的准确度还是精密度都有很大的提高。但是，血细胞分析仪是否能提供准确、可靠的检测结果关键在于该仪器的校准。绝大多数的质控物和校准物为进口产品，价格昂贵，不便于普遍使用，导致在同一实验室内同一标本若用不同仪器分析，出现测定值的差异。这些差异除了仪器本身的性能，更重要的在于校准方法正确与否。
根据国际血液学标准化委员会的文件要求，血细胞分析仪的检测结果只有溯源国际标准参考方法，才能保证其准确性【5、6】。但考虑到成效比及绝大多数实验室不具备国家认可的参考实验室条件，无法用参考方法直接给新鲜全血定值，从而转向采用间接溯源至国际标准的方法定值，即可溯源的检测系统定值【7、8】。目前临床对用新鲜全血作为校准物进行室内和室间质评进行了相关有益的尝试【9-12】，取得了良好效果。本实验应用新鲜全血对我室3台血细胞分析仪进行校准，结果表明，校准调整后各研究参数与参比仪器具有相当的可比性，之后通过对日常选取的高、中、低值标本进行比对试验，能够很好地监控仪器的稳定性及结果的准确度，且这种方式经济实用，易于操作，值得在中、小型实验室推广。
总之，EDTA-K2抗凝的新鲜全血可代替标准方法测定全血细胞质控物来校准多通道血细胞分析仪，保证其测定结果准确性。而每天以新鲜全血对血细胞分析仪进行质控是了解各仪器测定结果间精密度的有效措施，及时避免系统误差的发生，保证室内多台血细胞分析仪测定结果的准确性，使科室内的不同仪器测定结果具有了可比性。
参考文献
[1] 李金明.临床酶免疫测定技术[M].北京：人民军医出版社．2005：166―178．
[2] 苏庆军，赵燕，陈建国等.血液标本存放条件对检测结果的影响[J].华北国防医药，2007，19(3)：55―57．
[3] 庄俊华，黄宪章，翟培军.医学实验室质量体系[M].北京：人民卫生出版社，2006：217．
[4] 丛玉隆，主编.血液学体液学检验与临床释疑[M].北京：人民军医出版社，2004．294―298．
[5] 彭黎明，王伟鑫，白丽霞.Z2细胞计数仪计数白细胞和红细胞的性能评价及应用研究[J].检验医学杂，2007，22(4)：37―45．
[6]ICSH，ISLH.Platelet counting by the RBC／platelet ratio method．A reference method[J].Am J Clin Pathol，2001，115(3)：4604．
[7] 滕本敬二.血细胞分析的溯源及国际参考方法[J].华检验医学杂志.2004，27(1)：53―54．
[8]Kutzner M.Metrological traceability of values assignedto sysmex SCS21000 haematology calibrator [J].Sysmax J Inernational，2002，12(1)：49―55．
[9]岳育红，丛玉隆，王清涛，等.抗凝新鲜血在血液分析仪质量控制及评价中的应用[J].临床检验杂志，2004，22(6)：466-467．
[10]刘艳，马晓露，王秀伟，等.血细胞分析仪比对实验应用的评价探讨[J].大连医科大学学报，2008，30(4)：387―389．
[11]李军.血细胞分析仪的质控与结果比对[J].检验医学与临床，2008，5(12)：715-717．
[12]樊晓萍，张长菊，李倩男，等.新鲜全血代替校准物在不同系列血细胞分析仪上的应用[J].国外医学临床：生物化学与检验学分册，2005，26(4)：250-251
