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[摘要] 目的 探讨急性脑梗死合并糖尿病患者血小板活化状态及通心络治疗对血小板活化状态的影响。方法 采用流式细胞检测方法,对急性脑梗死合并糖尿病患者血小板活化标记物P选择素(CD62p)及PAC-1进行检测研究。结果 急性脑梗死合并糖尿病患者血小板活化标记物表达高于单纯脑梗死组,明显高于正常对照组,通心络及阿司匹林能明显抑制血小板活化标记物表达,两组比较差异无统计学意义。结论 急性脑梗死发生过程中,血小板活化起着重要作用,且高血糖促进体内血小板活化,加重脑血管病的发生;通心络及阿司匹林在治疗急性脑梗死及脑梗死合并2型糖尿病中能明显抑制血小板活化,在一定程度上阻断了血小板活化过程,具有治疗作用。
[关键词] 通心络; 脑梗死; 糖尿病; CD62P; PAC-1
[中图分类号] R743 [文献标识码] A [文章编号] 1673-9701(2009)33-53-02
血小板活化在急性缺血性脑血管病的发生过程中起着重要作用。研究表明,血小板膜表面蛋白标记物P选择素(CD62p)及PAC-1为检测血小板活化程度和功能状态的灵敏指标,流式细胞技术的应用为评价血小板在体内的活化程度提供了可靠方法[1]。
本研究我们通过流式细胞技术,对急性脑梗死患者采用不同抗血小板治疗,分析对照阿司匹林及通心络两种抗血小板药物对血小板活化标记物表达的影响,为急性缺血性脑血管病的预防、治疗提供可靠理论依据。
1 对象和方法
1.1 一般资料
脑梗死患者32例,男20例,女12例;年龄43～76岁,平均(60±8.2)岁。脑梗死合并2型糖尿病患者86例,男50例,女36例;年龄45～75岁,平均(58.3±7.8)岁。全部病例选自2006年6月～2007年12月神经科住院治疗患者,诊断符合第四届脑血管病制定的诊断标准,2型糖尿病诊断符合WHO在1985年制定的糖尿病诊断标准,血糖控制理想,同时经头颅MRI检查证实,排除大面积脑梗死患者,病程在起病6h～3d以内,排除肿瘤、血液系统疾病及免疫性疾病,患者入院后按随机分组的原则分成三组,第一组(n=42)给予通心络口服,每次4粒,每天3次;第二组(n=40)给予拜阿司匹林治疗,首次200mg,次日始每次100mg,1次/日,顿服;第三组(n=36)不用抗血小板药物治疗,所有患者在入院第1日开始治疗,基础治疗相同,全部给予疏血通注射液静脉滴注,6mL每日一次连用2周,2周后复查血小板活化标记物的表达。阴性对照组30例,男18例,女12例;年龄28～60岁,平均(48.3±7.9)岁;为同期医院体检中心健康者,排除高血压、糖尿病、冠心病、血液系统疾病。
1.2 试剂与仪器
FITC、PE标记的血小板对照IgGl、IgM,PE标记的抗血小板α颗粒膜蛋白-140(CD62P)McAb,FITC标记的PAC-1,PerCP标记CD61,均为美国BD公司产品。流式细胞仪为BECTONDICKISON公司的FACS Galibur,用Cell Quset软件。
1.3 方法
取两只试管,一只加入5μL全血,再加入血小板阴性对照IgG-FITC、IgM-PE和CD61-PerCP McAb各10μL;另一只试管加入5μL全血及PAC-FITC、CD62P-PE和CD61-PerCP McAb各10μL。PerCP McAb各10μL,混匀后室温避光孵育30min,加入0.5mL PBS缓冲液,立即上机检测。
样品测试前,用标准荧光微球调整荧光检测CV值在2%以下,并设定血小板光散射的最佳阈值,消除其他细胞和噪声干扰。荧光检测经对数放大,收集30000个血小板。测试完毕数据存盘后用Cell quest分析软件分析结果。
1.4 统计学处理
采用统计软件SAS8.0进行统计分析,三组间两两比较采用q检验(Newman-Keuls法),组内治疗前后比较用配对t检验,以P
