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【摘要】 目的 探讨不孕患者血浆血小板活化因子(PAF)、血小板活化因子乙酰水解酶(PAF-AH)活性的变化,以及外周血中单个核细胞(PBMC)PAF 受体(PAF-R)的表达。方法 对10 例女性不孕患者采用生物法检测血浆中PAF 含量,酶水解底物显色法测定PAF-AH 活性,流式细胞仪检测PBMC 上PAF-R 的表达。并与10 例有正常生育功能的女性健康体检者对照。结果 不孕患者血浆中PAF 含量(5．21 ±1．81)μgPL,PAF-AH 活性(24．50 ±7．76)μmol/(min•L)、PBMC 上PAF-R 的表达与健康体检者比较差异有统计学意义(P[1-2]。�
1．2．3 血浆PAF-AH 活性检测 采静脉抗凝血2 ml,浓缩为0．5 ml,按试剂盒操作,酶标仪读取不同时间的A 值,用PAF-AH 标准品对照,计算出各样本PAF-AH 的活性。�
1．2．4 外周血PBMC上PAF-R的表达 采静脉血1 ml,分离出PBMC,取1 ×10�5 细胞悬液,加鼠抗人PAF-R 单抗40 μl,FITC 标记的兔抗小鼠单抗40 μl,对照管加FITC 标记的正常兔IgG 40 μl,混匀后置4 ℃3 min,PBS 洗3次,弃上清液,加固定液0．5 ml,尼龙网过滤后用流式细胞仪分析。�
1．3 统计学方法 实验数据用SPSS 10．0 软件包进行处理,结果以均数±标准差(x±s)表示,数据统计用t检验、单因素方差分析和直线相关分析。�
2 结果�
2．1 两组血浆PAF 含量及PAF-AH 活性比较 两组血浆PAF 含量及PAF-AH 活性比较见表1。�
2．2 两组外周血PBMC中PAF-R 阳性细胞比例及表达 两组外周血PBMC 中PAF-R 阳性细胞比例及表达见表2。�
3 讨论�
血小板活化因子(PAF)是Benveniste在1972年用IgE刺激嗜碱性粒细胞时发现一种能使血小板聚集的可溶性脂类物质[1]。1979年证实这种具有强烈生物学活性的脂质结构为1-烷基-2-乙酰基-Sn-甘油-3-磷酸胆碱[2]。现已知道，PAF通过对黄体细胞的作用，在排卵期间影响卵泡细胞的功能以及黄体的形成；PAF增加着床前鼠胚的氧化代谢；PAF可直接作用于胚胎或作为胚胎自身分泌的生长因子，直接刺激自身的发育；PAF活化母体血小板产生的PDGF，促进胚胎发育；PAF引起子宫内膜的的蜕膜反应；PAF调节细胞免疫，抑制淋巴细胞的增殖，降低IL-2的产量，增加抑制性T细胞的活性，在妊娠早期对胚胎母体之间进行免疫调节，保护胎儿不受到免疫排斥。�
PAF 在不孕妇女中降低并维持的机制复杂，在实验中发现不孕妇女患者血浆中PAF-AH(PAF-AH有血浆型和细胞型两种)活性显著降低，其可能的机制为：PAF-AH的降低，致使PAF的半衰期延长，同时刺激巨噬细胞分泌IL-1、TNF及PG，并与之协同增加氧自由基(OFR)的产生，这种非细菌性的炎性反应使盆腔内生殖环境发生改变，包括病灶及周围组织的渗出、纤维素沉着、腹腔液容积及成分变化,致使卵子的发育、排卵、精子的运动及精卵结合而导致不孕。�
同其他细胞因子作用方法一样，PAF主要通过与细胞表面的PAF-R结合，通过Ca��2+�,IP3和Zn��2+�,NF-κbeta,TNF,LFA-1,丝氨酸蛋白酶等参与介导生物学反应。PAF-R 广泛存在于血小板、中性粒细胞、T 淋巴细胞及肺组织等上面，人类子宫内膜PAF-R 的cDNA 与人类白细胞PAF-R 几乎完全一样[3]。在实验中发现不孕妇女PBMC 中PAF-R 阳性细胞比例及表达数目均显著降低。国外2 期临床实验证实PAF抑制剂Iloprost及PAF受体拮抗剂SRI63441能和小鼠体内PAF-R的结合，抑制小鼠胚胎着床，在妊娠第1、4天每天使用，引起妊娠第8天子宫内着床数减少50%，PAF拮抗剂对着床的影响一是在胚胎水平，抑制胚胎的发育；二是对母体的影响，消除子宫内膜的蜕膜反应。�
总之，检测PAF 与PAF-AH 可为不孕妇女的辅助诊断、预后判断提供重要的依据，PAF 类似物的开发应用可为不明原因不孕妇女提供新的治疗手段与方法。�
参考文献
［1］ Muirhead E,et al.Antihypertensive functions of the kidney.Hypertension Dallas,1980,10(2):444-464.�
［2］ Benveniste M,Tence P,Varenne J,et al.Semisynthese or structure purposee dufacteur activant less plaquettes:PAF-acther,unalkyl ether analogue de la lysophosphosphatidylcholine.CRAcad Sci Paris.1979,18(9):1037-1040.�
［3］ Tiemann U,Viergutz T,Jonas L,et al.Fluorometric detection of platelet activating factor receptor in cultured oviductal epithelial and stromal cells and endometrial stromal cells from bovine at different stages of the oestrous cycle and early pregnancy.Domest Anim Endocrinol,2001,20(3):149-164.�
