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摘要目的：探讨针刺对高血脂合并脑缺血损伤大鼠海马区Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法：雄性SD大鼠，随机分为空白对照组、脑缺血模型组、针刺治疗组，每组10只。采用化学刺激诱导血栓性闭塞大脑中动脉造成大鼠局灶性脑缺血模型。“针刺百会”、“水沟”，每日1次，治疗7d，治疗结束后，应用免疫组化方法观察针刺前后大鼠海马区Bcl-2、Bax蛋白表达的变化。结果:大鼠局灶性脑缺血后Bcl-2表达降低，Bax表达升高，Bcl-2/Bax比值下降(均P 1．6检测方法
免疫组化法(北京中杉试剂公司)检测。具体步骤如下：①组织切片常规脱蜡至水；②蒸馏水冲洗，PBS浸泡5min；③3%H2O2去离子水，室温下放置5-10min，以灭活内源性过氧化酶活性；④滴加空白山羊血清封闭液，室温放置10-15min，甩去多余液体，不洗；分别滴加适当稀释的Bcl-2和Bax的一抗(兔IgG)，4 0C过夜；⑤PBS(pH7.2-7.6)冲洗，3 min×3次；⑥滴加生物素标记山羊抗兔IgG，20-37 0C下放10-15min；⑦PBS(pH7.2-7.6)冲洗,3min×3次；⑧滴加辣根酶标记链霉卵白素工作液，20-370C下放10-15min；PBS冲洗,3min×3次；⑨滴加DAB显色剂，室温显色脱水、透明、封片。阴性对照切片省略第4步，其它处理同上。光镜观察、照相。采用多功能真彩色病理图像分析管理系统(CMIAS2001A型，北京煤炭总医院提供)对脑组织切片进行定量分析。每只动物于海马区各选3张切片，每张切片随机选取10个视野。观察并对阳性细胞数进行计数分析(每10个观察细胞中阳性细胞所占比例)。
1．7 统计处理
实验数据应用SPSS统计软件处埋，采用均数±标准差（X±SD）表示，进行单因素方差分析，并进行组间多重比较，以P [4]hWhite FA,KellerPeck CR,Knudson CM,et al.Widespreade lim ination of naturally occurring neuronal death in Bax-deficient mice[J].JNeurosci,1998,18(4): 1428-1439.
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作者简介:马惠芳(1963-11),女,博士,副教授,从事针灸的教学及科 研工作
