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【摘要】本文对方中木蝴蝶、野菊花、赤芍等中药的提取纯化、冰片的β-环糊精包合工艺进行了研究。为医学制药提供一定的依据。 【关键词】玉菊泡腾片;木蝴蝶;野菊花;赤芍
doi:10.3969/j.issn.1006-1959.2010.05.236文章编号:1006-1959(2010)-05-1243-01
1.提取工艺路线的设计
玉菊泡腾片的处方为:木蝴蝶、野菊花、赤芍、冰片木蝴蝶为方中君药,主要含有多种黄酮类成分,如黄芩苷、黄芩苷元、千层纸苷、木蝴蝶苷、野黄芩苷元等,根据其化学成份的性质,结合中医传统用药习惯,采用水煎醇沉方法进行提取。野菊花为方中臣药,其主要化学成份为倍半萜类、野菊花三醇、野菊花内酯、黄酮类化合物,尚含挥发油0.1%-0.2%。传统用药多以水煎煮提取,因挥发油的量比较少,工艺中不易提出,故工艺中采用水煎醇沉法。赤芍为方中臣药,主要含有芍药苷、氧化芍药苷、芍药苷元、芍药内酯苷、苯甲酰芍药苷等成分,这些成分大多溶于水,且中医常以水煎入药,可采用水煎醇沉法。冰片主要含有右旋龙脑、β-榄香烯、石竹烯等倍半萜类成分及龙脑香二醇、古柯二醇等三萜类成分。
因其熔点较低,易溶化,故采用β-环糊精包合的方法,对冰片进行包合,以保证其稳定性。因此,根据药物成分和部分研究资料及中医用药习惯,该方中木蝴蝶、野菊花、赤芍采用水煎醇沉法提取,冰片采用β-环糊精包结的方法制备包合物,低温干燥,再粉碎入药的方法。
2.提取工艺条件的研究
2.1 木蝴蝶、野菊花、赤芍提取工艺条件。正交试验筛选称取药材木蝴蝶36g,野菊花32g、赤芍24g为一份,共9份,进行正交试验,提取后滤液合并,浓缩,减压干燥,称取干浸膏重量,以黄芩苷的总含量为指标,用高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)进行测定。
对照品溶液的制备精密称取黄芩苷对照品适量,加甲醇溶解并稀释制成每1ml含32g的溶液,即得。供试品溶液的制备称取上述9份干燥提取物各0.5g,精密称定,置50ml具塞三角瓶中,精密加入甲醇25ml,密塞,称定重量,超声30min。放置至室温,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,滤过,精密量取续滤液1ml,置10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,以微孔滤膜(0.45m)滤过,即得。测定法:分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,以黄芩苷总量为指标,在考察范围内,影响因素A>B>C,因素A有显著性差异,因素B,C无显著性差异。即煎煮3次含量最高,但考虑到大生产中如果煎煮四次,则药渣已煮烂、无法过滤,因此确定提取次数为3次。根据直观分析结果,结合生产实际综合考虑,确定最佳的提取工艺条件为A,B,C,,即加水10倍量,提取3次,每次1.Oh。
2.2 冰片包结物制备工艺优选。冰片采用β-CD包结技术制成冰片β-CD包结物,具有高稳定性、低挥发性、低刺激性等优点,可减少冰片的损失,保证疗效。L(3)正交设计试验,进行包结条件的优选。冰片空白回收率的测定:测得冰片的空白回收率为76%。冰片的包结和包结率的测定:精密称取β-CD一定量,加10倍量蒸馏水,水浴加热使溶解,再降至规定温度,在搅拌条件下,将冰片-乙醇液(1:2)慢慢加入到β-CD水溶液中,继续搅拌包结,冷却,置冰箱中冷藏24h,滤过,包结物分别用少量蒸馏水和无水乙醇洗涤,45℃真空干燥,即得冰片-β-CD包结物。
根据生产实际选定包结工艺为(A3B2C1A,BZC7),即冰片:β-CD:水=1:8:80,50℃包结60min。验证试验:按优选工艺条件进行试验。精密称取β-CD8.00g,置250m1茄形瓶中,加入80ml蒸馏水,60℃水浴溶解,降至50℃,于50℃恒温水浴搅拌,缓缓加入冰片1.0g(用1:2的乙醇稀释),闭塞,继续恒温搅拌60min。置冰箱中冷藏24h,抽滤,分别用少量蒸馏水、无水乙醇洗涤,抽干,在45℃减压干燥至恒重,得白色粉末状包结物7.02g,测得挥发油收得率为78.0%,将包结物提取冰片得0.567g,计算包结率为74.6%。
3.分离、纯化、浓缩与干燥工艺研究
3.1 考察不同醇浓度醉沉黄芩苷的含量称取药材木蝴蝶162g、野菊花144g、赤芍108g一份,加水10倍量,煎煮三次,每次1h,滤过,合并煎液,分成三等份,分别浓缩至相对密度分别为:1.05(50℃测)、1.10(50℃测)、1.15(50℃测),各份再分为三等份,共九份样品,按表5的因素水平进行正交试验,即每个浓缩程度的三个样品分别以50%、60%、70%醇沉,放置过夜,滤过,回收乙醇,浓缩成稠膏,减压干燥,得9份干膏。以黄芩苷的总含量为指标,用高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VI D)分别测定9份干膏的黄芩苷含量,并分别计算总量。并对结果进行双因素方差分析,结果见表6。由表6可知,以黄芩苷总量为指标,在考察范围内,影响因素B>A,但均无显著性差异。根据直观分析结果,确定醇沉条件为A2B3,即水煎液浓缩至比重为1.10(1.08-1.12,50℃测)时,加乙醇使醇含量达70%。
3.2 浓缩与干燥工艺研究浓缩:再采用真空浓缩,条件为真空度0.06Kpa,温度70℃干燥:采用减压干燥,条件为温度70℃;真空度-0.1Kpa,干燥8小时。粉碎成细粉。
3.3 出膏率考察试验为了考察上述提取工艺的出膏率,为成型工艺提供依据,按照一倍处方量投料,共做三批平行试验,计算出膏率,计算后可知提取精制后出膏率在20%左右,根据该实验结果,规定出膏率不得少于16%。
4.结论
对木蝴蝶、野菊花、赤芍的提取按煎煮次数、煎煮时间、加水量三因素进行了考察,确定了提取最佳工艺为:加10倍量水,煎煮3次,每次1小时。对醇沉时煎煮液的浓度、加入酒精的量进行了研究,确定醇沉条件为:将水煎液浓缩至比重为1.10(1.08-1.12,50℃),加乙醇使乙醇含量达70%。
参考文献
[1] 罗延红,廉秀娟,李引乾,等.泡腾片研究进展[J].西北药学杂志,2001,16(1):39-40.
[2] 刘咏芳.中药五黄泡腾片的工艺设计[J].时珍国药研究,1996,7(1):55-56.
