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【摘要】 目的 观察红花黄色素注射液对肾间质纤维化大鼠肾小管上皮细胞凋亡的的影响，探讨其肾脏保护机制。方法 45只雄性SD大鼠，随机分为假手术组(A组)、单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction; UUO)组(B组)、UUO联合红花黄色素治疗组(C组)，各15只。C组红花黄色素5 mg/(kg•d)，造模术前1 d开始腹腔注射给药，各组术后10 d处死大鼠，处死后取术侧肾组织行HE、Masson染色，TUNEL法检测肾小管上皮细胞凋亡。结果 B组、C组可见明显肾间质纤维化的病理改变，可检测到凋亡细胞。C组与B组相比，肾间质纤维化病变程度较轻，凋亡细胞明显减少(P2O2室温孵育阻断内源性过氧化物酶，滴加反应混合溶液20 μl (TdT 2 μl，荧光素连接的核苷酸混合缓冲液18 μl)在湿盒中37℃孵育60 min。切片滴加1:2稀释的转化剂POD(HRP连结的抗荧光素抗体)20 μl，在湿盒中37℃孵育30 min，进行免疫反应，扩大信号。DAB H2O2显色。苏木精复染。梯度酒精脱水,二甲苯透明,树胶封片。
1.5.4 图象分析、结果判定
1.5.4.1 肾皮质相对间质容积及肾皮质相对胶原含量 采用真彩色病理图像分析系统(北航 4.0)，Masson染色切片在高倍镜(×200)下随机选择10个不含肾小球及血管的肾皮质视野，以肾间质面积占一个视野场面积的百分比，作为相对间质容积值。Masson染色绿色为胶原纤维，测定绿色胶原面积占一个视野面积的百分比，作为肾皮质相对胶原含量。
1.5.4.2 肾小管上皮细胞凋亡检测 阴性对照片为省去TUNEL反应液。光镜下分析结果。凋亡细胞胞核呈棕黄色颗粒沉着，应用真彩色病理图像分析系统计算结果，每张切片随机选取10个不含肾小球和小血管的肾皮质视野(×400)，计算每个视野凋亡阳性细胞总个数占统计场总面积的百分比(数密度)。
1.6 统计学方法 所有数据应用 SPSS 10.0统计软件处理。计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，组间差异比较采用单因素方差分析，以P
