荧光分析法在药物检测中的应用研究_荧光分析法的应用

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  【摘要】荧光分析是分子发光光谱分析的简称,发光分析包含了化学发光分析、磷光以及分子荧光这三个部分。荧光分析药物检测主要有两种方法,荧光猝灭法和共振光散射法,荧光猝灭法主要应用了依诺沙星的检测,依诺沙星主要用于支气管炎、咽喉炎、肠道以及肺部的感染治疗;共振光散射法主要是对化学药物的检测共振光散射法可以测定肝素等。荧光分析具有灵敏度高、重现性好、选择性好、方法快捷简便、仪器设备便宜且操作简易等优点,故而,近几年来,其被广泛的应用于临床医学或生物化学等研究领域的药物检测工作中。
  【关键词】荧光分析法;药物检测
  【中国分类号】R927【文献标识码】A【文章编号】1044-5511(2011)11-0137-01
  
  发光分析属于分子发光光谱分析的简称,其主要包括分子荧光分析、化学发光分析以及磷光分析这三种分析法。荧光是指第一电子的激发单进行重态,进而产生辐射的跃迁,伴有随发光的现象,而分子荧光光谱法是基于化合物所具有的荧光性质基础上建立的一种分析测量法。1867年,Goppelsroder为人类进行了历史上第一次的荧光分析后,经过100多年的发展,荧光技术又有了突飞猛进的发展,如可通过化学反应使无荧光性的物质转变为可以进行测定且有荧光性质物质,荧光淬灭法以及荧光能量转移外,随着激光技术以及计算机、电子学等新成就的科技发展,导数荧光、荧光反应速率法同步荧光、固体表面荧光分析、荧光光纤化学传感器、荧光探针、时间分辨荧光和固相萃取荧光法等均有了重大的发展。在当前阶段,荧光分析法在不仅在食品分析和生化分析中受到广泛关注,还在药物监测方面有重大突破,荧光分析法已成为一种有效且极为重要的分析技术。在本文中,主要对荧光分析法在药物检测中的应用进行研究。本次研究工作,主要是应用荧光衍生法、共振光散射法以及荧光猝灭法对药物进行检测。
  1.荧光衍生法
  1.1原理:在日常的生活中,大多数药物都具有荧光性。荧光衍生分析其借助化学反应,把某种待测药物对接上特定的某种化学基团,在化学反应中,通过去掉或者改变特定的化学基团,使待测药物的物质结构有所改变,进而使待测药物的荧光特性改变,从而提高了待测物的灵敏度。以下笔者主要研究了荧光衍生法在检测青霉素类药物中的应用。
  1.2青霉素类药物的检测:目前,青霉素是使用最广泛的一种广谱抗菌素药品,其本身无荧光性质,但当将其和一种缩合产物反应后就会生成蓝绿色的荧光,荧光峰的波长为500nm,激发峰波长为420nm,可将其应用到血液和尿液中检测青霉素,测定的范围很小。阿莫西林作为一种光谱的半合成青霉素,毒性较低,而杀菌力很强.用荧光衍生法对其进行研究,以267nm~323nm为测定的波长,通过对其的pH值、溶剂、温度等的影响进行探索。研究结果发现,阿莫西林实质是有较强的荧光性质,在微碱的条件下,测定出荧光强度是最大的,当温度每上升10℃,阿莫西林的荧光强度就下降3%,与无机离子ca2+、Ga3、+AP+等均有配合的作用,和M酽+离子和A13+离子互相配合后,使其阿莫西林的荧光强度下降,降低。
  2. 荧光猝灭法
  2.1荧光猝灭的原理:荧光猝灭是指荧光溶剂分子和物质分子之间反应后导致:荧光的强度发生变化,激发的峰位有所变化,荧光的峰位发生变化,使物理或化学发生作用的全过程。荧光猝灭剂是指荧光物质分子之间发生的相互作用,进而引起荧光的强度发生变化,激发峰位及荧光峰位发生变化生成的物质被称为荧光猝灭剂。荧光猝灭包括静态猝灭及动态猝灭。猝灭剂和基态荧光分子之间,以弱结合引起反应,进而生成新的复合物,该复合物能将荧光完全地猝灭,这种现象被称为静态猝灭。而激发猝灭剂及态荧光分子发生碰撞后,能将荧光猝灭,这种想象则成为则动态猝灭。
  2.2依诺沙星的检测:依诺沙星作为第三代的喹诺酮类药物,对链球菌、葡萄菌、变形杆菌以及大肠杆菌等十多种病菌均具有较强的抗菌作用。其主要是用于有敏感所致的支气管炎、咽喉炎、肠道以及肺等部位的感染治疗。也能治疗软组织和脓皮病组织的感染,由于其具有一定毒性,过量使用则会造成人体肾功能出现障碍,血小板减少和血细胞减少,肠胃功能受损等,过敏反应及中枢相关症状也存在。目前,对于依诺沙星、氧氟沙星、环丙沙星等和DNA互相结合发生荧光猝灭的作用与依诺沙星和体外的黑色素互相结发生导致荧光猝灭等的报导不断出现。因此,当前,需要建立更加简便的快速的检测依诺沙星的较为灵敏的方法。在本研究中,运用依诺沙星能猝灭多巴胺这种荧光猝灭的机理,以Stern-Volmer的非线性为根据,通过运用能猝灭多巴胺这种荧光机理对依诺沙星进行测定。当激发的波长达到300nm时,多巴胺达到最大的发射峰,350nm,相应的,依诺沙星存在下的多巴胺,荧光强度逐渐减弱,由此可见,可以利用荧光猝灭方法来检测依诺沙星。由于实验标本的pH、放置时间、干扰离子等对测定有一定的影响,因此此法能用于测定尿样及血清中的依诺沙星含量。
  3. 共振光散射法
  3.1原理:共振光散射是指利用普通的荧光分光光度法测量散射光的一种新型的散射光分析技术。这种技术具有简单、灵敏和快速等分析特点,发生光散射现象的具体为:由于光和粒子之间相互起作用的一个过程,在这期间,当介质中的粒子直径(d)和入射光的波长之间(λ0)出现d≤0.05 λ0时的情况时,将会产生瑞利散射这种分子散射光,进而以RLS理论为根据,得出散射光的强度和散射的粒子浓度c,它们成正比关系,根据这种关系,能对大分子的物质溶液进行分析测定。
  3.2对化学药物的检测:共振光散射法可测定肝素,肝素能使RhB及CTMAB之间相互起作用,形成三元双亲性复合物,RhB及CTMAB能协同吸附于 H2O/CCl4的界面上,进而引起较强烈的共振光散射,自身的信号增强后,可直接对肝素进行测定。此外,在测定氧氟沙星.茜素紫的3B体系过程中发现,由于杨佛沙星和共振光散射的强度呈一种线性关系,据此可知,氧氟沙星.茜素紫3B体系能用于测定人体内的佛杨沙星的血药浓度,能建立人血清中的抗菌类的四季铵化合物的共振光散射技术这种检测方法。
  
  参考文献
  [1]蔡朝霞,宋功武,李玲.刘立明.荧光素共振光散射法测定脱氧核糖核酸[J]. 分析化学研究简报,2004,(5)
  [2]张远馥.抗生素类药物荧光测定的应用研究[D]. 河南大学,2008,(09)
  [3]郝巧艳,王金中.共振光散射法测定丁胺卡那霉素的研究[J].化学研究,2008,(3)
  [4]郝巧艳,王金中,陈文静.奥硝的荧光分光光变法的测定[J].南阳师范学院学报,2009(3)

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