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摘要：[目的] 探讨番茄红素对免疫系统的作用及机制。 [方法]经口给小鼠每ks体重1．67mg,3．33rug、10mg番茄红素，观察番茄红紊对小鼠免疫功能及抗氧化能力的影响。 [结果] 番茄红素对小鼠迟发型变态反应有促进作用，ConA诱导的脾淋巴细胞增殖能力明显增强，溶血空斑数、血清溶血素也显著高于对照组，巨噬细胞对鸡红细胞吞噬率、吞噬指数明显高于对照组。10mg／kg番茄红素组血清超氧化物歧化酶(SOD)活力为133．8U／ml，谷胱甘肽过氧化物酶(GSH―h)活力为158，9U／ml，丙二醛(MDA)含量为4.1nmol／mg，与对照组差异有显著性。 [结论] 番茄红素能够增强小鼠单核巨噬细胞作用及体液免疫和细胞免疫功能，这与其提高抗氧化能力有关。
关键词：番茄红素；免疫；超氧化物歧化酶；丙二醛；谷胱甘肽过氧化物酶中图分类号：R151．4+3文献标识码
番茄红素是最主要的类胡萝卜素之一，无维生素A原活性，人体主要从番茄及其制品中获取。番茄红素是一种抗氧化剂，具有预防和缓解某些肿瘤及心血管疾病的作用。目前各国尚未建立番茄红素的膳食参考摄入量，因其未被任何卫生组织承认是一种营养素。番茄红素许多生物学功能还不十分清楚，本研究就番茄红素对免疫系统的作用及其可能的作用机制进行探讨。
1 材料与方法
1．1 材料
1．1．1 番茄红素 上海某生物工程公司提供，纯度，99％。
1．1．2 实验动物 清洁级ICR小白鼠，雄性，体重18～22g，由中国科学院上海实验动物中心提供。将其分成4组，每组40只。
1．2 方法
1．2．1 剂量选择 番茄红素设3个剂量组、1个溶剂对照组。番茄红素剂量分别为1．67 mg／kg、3．33mg／kg、10mg／kg。各组经口灌胃1次／d，连续喂饲30d后进行免疫指标和抗氧化能力测定。
1．2．2 迟发型超敏反应(DTH)测定 小鼠腹部去毛，用1％DNFB溶液50ч1致敏小鼠。5d后用1％DN―FB溶液10чl于小鼠右耳进行攻击。24h后颈椎脱臼处死小鼠，用打孔器取下直径8mm的左右耳片，称重并计算肿胀度。
1．2．3 小鼠脾淋巴细胞转化测定 将小鼠脾脏制成2x10°个／ml细胞悬液，分两孔加入24孔培养板中，一孔加50чl ConA液，另一孔作对照，在5％CO2和37℃环境下培养72h。培养结束前4h，每孔吸去上清液0，7ml，加人0．7ml PRMl 1640培养液，同时加入MTr50чd／孔，继续培养4h，每孔加入lml酸性异丙醇，使紫色结晶完全溶解后，在570nm处测定吸光度。
1．2．4 血清溶血素测定 用脱纤维SRBC免疫5d后，从内眦静脉采血，分离血清。在微量血凝板上加25：Al血清，以生理盐水倍比稀释，加入等量0．5％SR-BC悬液，装入湿润的平盘，37℃保温3h，当血球对照出现沉落时观察结果。
1．2．5 抗体生成检测 SRBC免疫5d后，将脾脏制成5x10°个／ml细胞悬液。表层培养基加热溶解后，与等量pH7．2的Hanks液混合，分装小试管，再向管内加入50цl10％SRBC，20цl脾细胞悬液，涂于已刷琼脂薄层的平皿上，在CO2培养箱温育1．5h，然后用SA缓冲液稀释的补体(1：10)加入到平皿中，继续温育1．5h后，计数溶血空斑数。
1．2．6 小鼠碳廓清测定 动物连续给样30d后，于尾静脉注射1：3稀释的印度墨汁，立即计时。分别于注入墨汁后2min、10min，从眼内眦静脉采血20цl，加到2mlNa2CO3溶液中，在600nm波长处测OD值，以Na2CO3溶液作空白对照。根据动物体重、肝重和脾重计算廓清指数。
1．2．7 巨噬细胞吞噬能力 每鼠腹腔注射20％鸡红细胞悬液lml，30min后，将小鼠颈椎脱臼处死，固定于鼠板上，注射生理盐水2ml，吸出腹腔洗液lml，分滴于2片玻片，于37℃孵箱湿孵30min，以1：1丙酮甲醇溶液固定，4％Giemsa―磷酸缓冲液染色3min，漂洗晾干镜检，计算吞噬百分率和吞噬指数。
1．2．8 抗氧化酶及脂质过氧化物测定 血清超氧化物歧化酶(SOD)活力：黄嘌呤氧化酶法。血清丙二醛(MDA)含量：硫代巴比妥酸法。血清谷胱甘肽过氧化物酶活力(GSH―Px)：DTNB比色法。这3种方法均采用南京建成生物工程研究所提供的试剂盒。
1．2．9 统计分析 采用SPSS11．5软件对数据进行单因素方差分析。
2 结果
2．1 番茄红素对小鼠细胞免疫的影响
表1显示，10mg／kg番茄红素组经DNFB刺激后DTH增加值为22．8mg，与对照组比较户P+4)增加，CD+4／CD+8、比率提高，增强细胞免疫功能。Watzl等研究发现，番茄红素可以促进白介素2(IL-2)、白介素4(IL-4)的分泌，增强体液免疫能力，提高老年人免疫力。番茄红素对非特异性细胞免疫也有明显的促进作用。
番茄红素不但直接清除自由基，而且可以通过增强抗氧化酶的活性提高机体抗氧化能力。本次研究发现，番茄红素能显著提高血清SOD、GSH―Px活力，使脂质过氧化产物MDA明显降低，从而增强机体的抗氧化能力。保护细胞膜磷脂免受降解，调节细胞膜的通透性，保持细胞膜完整性。Pan等对荷S180肿瘤的小鼠给予番茄红素，发现番茄红素能显著促进脾淋巴细胞增殖，增强NK细胞的活性，同时增强SOD和GSH―Px的活性，以及降低MDA的含量等。
番茄红素有效地抑制脂质、蛋白质和DNA的氧化，维持体内氧化与抗氧化平衡，有机体保持自稳态，可以诱导正常的细胞间隙连接通讯(GJIC)。GJIC可传输细胞群体内生长调控信号，调节细胞的正常增殖与分化，促进细胞间的正常结合。番茄红素可以增强正常细胞间GJIC，促进吞噬细胞、淋巴细胞间的相互作用，通过分泌的细胞活化因子活化细胞，最终表现为对吞噬能力及淋巴细胞转化的促进，增强免疫功能。
番茄红素作为一种新型功能性天然色素，在防癌、防病等方面有着重要的生物学作用，在食品、药品及医疗保健等方面有良好的应用前景，其与机体的作用机制还需大量的深入研究。
(收稿日期：2006-03-13)
