【www.zhangdahai.com--民主生活会发言】
依据所分泌细胞因子的不同辅助性T细胞(Helper T cells,Th)可分为两个亚型,即Th1细胞和Th2细胞,Th1细胞主要分泌以IFN�γ为代表的细胞因子,Th2 细胞主要分泌 IL� 4、IL�10 为代表的细胞因子��[1]�。细胞因子在针对抗原刺激,调节淋巴细胞应答中起到关键作用,Th1/Th2细胞的失衡参与多种免疫性疾病的发生和发展��[2]�。为了探讨IL�4、IL�10和IFN�γ在支气管哮喘(bronchial asthma,简称哮喘)发病机制中的作用,本研究以健康儿童为对照,观察了哮喘儿童血清IL�
��
基金项目:济南市卫生科技发展计划项目(项目编号:2006�27)�
作者单位:250022山东大学齐鲁儿童医院呼吸科�
4、IL�10和IFN�γ水平的变化,以期探讨儿童哮喘的发病机制,并为临床诊疗新方法的开展提供依据。�
1 对象和方法�
1�1 研究对象
随机收集于2008年6月1日至2009年1月31日期间,在山东大学齐鲁儿童医院门诊就诊的哮喘患儿作为哮喘组,患儿皆处于发作期且未用药治疗。哮喘诊断标准全部符合2003年中华医学会儿科分会呼吸学组修订的支气管哮喘诊断标准��[3]�。共计47例,其中男28例,女19例。�
另外,随机选取性别和年龄与哮喘组相匹配的健康查体儿童作为正常对照者组。共计51例,其中男30例,女21例。�
以上受试对象或其家属均对本研究签署知情同意书。�
1�2 研究方法�
1�2�1 血液标本的收集和处理 使用一次性空白采血管采集受试者清晨空腹静脉血2 ml,放置4℃冰箱30~60 min,待血液凝集后3000rpm离心15 min,小心吸取上液,得到血清,�80℃保存待检。�
1�2�2 血清IL�4,IL�10及IFN�γ浓度的测定 血清IL�4,IL�10及IFN�γ浓度的测定采用双抗体夹心ELISA法检测,ELISA试剂盒购自上海西塘生物科技公司,操作严格按照说明书的操作步骤进行。各细胞因子检测的板内、板间变异系数均0�05),具体见表1。�
2�2 哮喘组与正常对照组血清IL�4,IL�10和IFN�γ浓度及其比较
分别以IL�4、IL�10和IFN�γ系列浓度标准品与相应吸光度(OD)制作IL�4、IL�10和IFN�γ标准曲线,并建立回归方程。IL�4标准曲线标准品浓度与相应吸光度(OD)的相关性0�998,回归方程为:Y=�101�451+1242�619X。IL�10标准曲线标准品浓度与相应吸光度(OD)的相关性0�992,回归方程为:Y=�157�564+952�507X。IFN�γ标准曲线标准品浓度与相应吸光度(OD)的相关性0�994,回归方程为:Y=�131�688+1062�686X。以上回归方程中Y代表样品浓度,X代表样品OD值。根据每个样品各细胞因子的OD值,推算相应的浓度大小,结果见表2。�
表2显示哮喘组血清IL�4浓度(346�74±82�92)pg/ml显著高于正常对照组(199�87±59�25)pg/ml(P0�05);哮喘组血清IFN�γ浓度(94�51±22�92)pg/ml低于正常对照组(110�75±47�11)pg/ml(P 总之,哮喘患儿血清主要细胞因子的研究结果说明哮喘患者以分泌IL�4的Th2细胞功能活动为主,而Th1细胞则相对不足,故推测Th1与Th2细胞的不平衡导致IL�4与IFN�γ的不平衡是哮喘发病的重要因素之一。另外,血清IL�4、IFN�γ浓度检测可以发展作为哮喘的诊断手段,同时本研究为使用抗IL�4制剂、补充IFN�γ等免疫学方法治疗哮喘提供了理论依据。�
参 考 文 献�
[1] Lloyd CM, Hawrylowiczo CM� Regulatory T cells in asthma� Immunity,2009,31(3): 438�449��
[2] 上官文姬�支气管哮喘免疫学发病机制的研究进展�上海交通大学学报 (医学版),2009,29(5): 602�606��
[3] 赵德育�儿童支气管哮喘的诊治�中国实用内科杂志,2009,29(4):313�316��
[4] 郑宏宇�白介素�4在支气管哮喘发病学中的作用�北京:中国协和医科大学, 2002��
[5] Kim HB, Jin HS, Lee SY, et al�The effect of rush immunotherapy with house dust mite in the production of IL�5 and IFN�gamma from the peripheral blood T cells of asthmatic children�J Korean Med Sci, 2009, 24(3):392�397��
[6] 黄敬青,李向楠,刘秋亮,等�咳嗽变异性哮喘患者Th1/Th2相关上游转录因子及细胞因子的表达�郑州大学学报 (医学版),2009,44(4):824�826��
[7] 赖新生,付明举,赖火特,等�穴位埋线对哮喘豚鼠血清白介素�4的影响�安徽中医学院学报, 2009,28(3): 23�25��
[8] Ogawa Y, Duru EA, Ameredes BT�Role of IL�10 in the resolution of airway inflammation�Curr Mol Med, 2008,8(5):437�445��
[9] 秦文敬�支气管哮喘患儿治疗前后血清IL�6、IL�10和GM�CSF检测的临床意义�放射免疫学杂志, 2008,21 (5):407�408��
[10] Dittrich AM,Chen HC,Xu L,et al�A new mechanism for inhalational priming: IL�4 bypasses innate immune signals�J Immunol,2008,181(10):7307�7315
