【hBMP-2基因转染的MSC与藻酸钙凝胶的生物相容性研究】 基因转染

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  [摘要]目的 探讨人类骨形态发生蛋白-2(humanbone morphogenetic protein-2,hBMP-2)基因转染的兔骨髓基质细胞(bonemarrowstromalcells,MSC)与藻酸钙凝胶的生物相容性,为骨组织工程中生物材料的选择提供依据。方法 应用脂质体介导的方法将真核表达载体pCDNA3介导的质粒pCDNA3-hBMP-2导人体外培养的兔MSC中,免疫组织化学和RT-PCR检测转染后hBMP-2基因的表达;将CAl8筛选获得的阳性克隆继续扩增培养,与藻酸钙凝胶复合作为实验组,单纯转染的细胞为对照组,在不同的时间行扫描电镜、四甲基偶氮唑蓝(MTF)比色法、碱性磷酸酶(ALP)、台盼蓝染色检查。结果 免疫组织化学和RT-PCR均证实基因转染成功,4周时仍有表达;转染的MSC与藻酸钙复合良好,并能在其中保持活性,活力未受影响。结论 hBMP-2基因转染的MSC能够获得瞬时及稳定表达,是一种新型的种子细胞;其与藻酸钙凝胶复合用于骨缺损的修复具有较强的可行性。
  [关键词]骨髓基质细胞;骨形态发生蛋白;藻酸钙;基因转染
  [中图分类号]R-33;R62
  [文献标识码]A
  [文章编号]1671―7562(2006)03-0145-05

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