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【摘要】 目的 调查产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的革兰阴性杆菌的耐药状况。方法 采用确证试验法检测产ESBLs革兰阴性杆菌，并检测耐药率。结果 187株革兰阴性杆菌中检出ESBLs阳性菌24株，检出率为12.83%；其对常用的13种抗生素耐药率>50%呈现极高的耐药性。结论 产ESBLs的革兰阴性杆菌具有高耐药性及多重耐药性。检测革兰阴性杆菌产超广谱β-内酰胺酶的状况并探讨其耐药谱，有利于指导临床合理使用抗生素。�
【关键词】
革兰阴性杆菌；超广谱β-内酰胺酶；耐药性
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Surveillance of antibiotic resistance of extended spectrum β-lactamase produced by gram negative bacilli
QIU Ge-hui， PAN Ming-zhi. Department of Laboratory,The First Hospital of Pingjinag, Hunan,414500,China
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【Abstract】 Objective To investigate the incidence of extended-spectrum beta-lactamases(ESBLs) in Gram-negative bacilli. Methods ESBLs were detected by the disc diffusion confirmatory test and the drug resistant rate was investigated. Results 24 strains positive ESBLs from 187 Gram-negative bacilli were examined. They were resistant to 13 kinds of antibiotics in common use,and the rate was higher than 50%. Conclusion ESBLs in Gram-negative bacilli has high antibiotic resistance.To investigate the incidence of ESBLs in gram-negative bacilli are necessary for clinic.�
【Key words】
Gram-negative bacilli;Extended spectrumbata-lactamases;Antibiotic resistance
目前，细菌的耐药性问题已成为全球关注的焦点，产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的革兰阴性杆菌具有极高的耐药性及多重耐药性，研究ESBLs细菌的检测及耐药性，对指导临床用药具有重要的意义。我们对本院187种革兰阴性杆菌进行产ESBLs检测，现报告如下。�
1 资料与方法�
1.1 材料�
1.1.1 菌株来源 2005年1月至12月本院住院部及门诊分离的革兰阴性杆菌共187株。其中大肠埃希菌98株，肺炎克雷伯菌58株，阴沟肠杆菌21株。�
1.1.2 质控菌株 大场埃希菌ATCC25922作为不产酶质控株及药敏质控株；肺炎克雷伯菌ATCC700603作为ESBLs的产酶质控株，购自湖南省临床检验中心。�
1.1.3 抗生素纸片 头孢噻肟(CTX)、头孢他啶(CAZ)、头孢噻肟/克拉维酸(CD03)、头孢他啶/克拉维酸(CD02)、头孢西丁(FOX)和其他药敏纸片为英国OXOID产品。�
1.1.4 M-H琼脂平板为本室自制。�
1.2 方法�
1.2.1 革兰阴性杆菌ESBLs的检测 采用NCCLS推荐的复合纸片确证法［1］。将CAZ/CD02、CTX/CD03组药敏纸片分别贴在同一个M-H琼脂平板上，35℃培养18~24 h，若任何一组含克拉维酸的纸片与相应不含克拉维酸的纸片的抑菌环直径差值>5 mm，确定为ESBLs阳性。�
1.2.2 药敏试验 采用纸片扩散法(K-B)法，判断标准按NCCLS 1999版标准执行。�
2 结果�
187株革兰阴性杆菌检出ESBLs 阳性菌24株，检出率为12.83%。其中98株大肠埃希菌中检出11侏，从58株肺炎克雷柏氏菌中检出8株，从21株阴沟肠杆菌中检出5株，检出率分别为11.2%、13.8%、23.8%。与文献报道的16.8%［2］、11.9%［3］、38.3%［4］有一定区别，估计与菌种地域性变化有关。它们对常用抗生素的耐药情况见表1(我们将耐药与中介株均列入耐药株的计算)。�
3 讨论�
ESBLs是近年讨论最多的酶。经典的ESBLs最早发现是由克雷伯菌属和大肠埃菌等肠杆菌科细菌产生的。革兰阴性杆菌的耐药机制种类繁多，变化迅速，已对临床构成严重威胁。ESBLs主要为质粒介导［5］，从TEM-1、TEM-2和SHV-1的1个或数个氨基酸突变而来，通过自体耐药的质粒传递给其他细菌，从而导致感染菌的广泛传播，并形成耐药(特别是耐多药)菌株，造成临床治疗困难。这类酶可有效水解青霉素类、第一、第二、第三代头孢菌素和氨曲南，部分可水解第四代头孢菌素，但对碳青霉烯类和头霉素类药物敏感，它们通常对酶抑制剂敏感。从表1可知，本组ESBLs阳性菌具有极高的耐药性和耐多药性，对氨苄青霉素耐药率为100%，对头孢类抗生素的耐药率高达80%以上，个别头孢类及单环类抗生素体外试验敏感，但因其具有耐药的隐蔽性，按NCCLS建议［1］，也应报告为耐药。所以，实验室开展ESBLs的检测具有十分重要的意义，建议将ESBLs检测作为常规项目开展。目前治疗ESBLs菌最有效的药物仍首选碳青霉烯类一亚胺培南(泰能)。过去认为，头霉烯类抗菌素(头孢西丁)和阿米卡星以及β-内酰胺酶抑制复合物(对氨苄西林/舒巴坦)对ESBLs也有较好作用［5］，但从表1中可发现，其耐率也分别达到50%、66.7%和83.3%。这说明ESBLs菌耐药性进展相当快，应引起我们足够的重视，研究并了解其耐药机制迫在眉睫。�
综上所述，临床上要准确合理使用抗生素，提高医疗质量，避免滥用抗生素，减少耐药菌株的形成，避免耐药菌株的传播而造成的菌群失调等不良后果。因此，在医院中认真开展微生物检验，进行病原学检查及抗生素药敏试验就显得尤为重要。�
参 考 文 献�
［1］ NCCLS Performance standards for antimicrobial susceptibility testing.1999,19：36.�
［2］ 许淑珍,刘广华,张淑兰,等.产超广谱β-内酰胺酶株检出方法的探讨.中华检验医学杂志,2000,23（5）：283-285.�
［3］ 周兵,杜延义,刘海云,等.大肠埃希氏菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的产生及药敏分析.中华医院感染学杂志,2000,10（4）：311-312.�
［4］ 杜延义,周兵,马东亮,等.阴沟肠杆菌超广谱β-内酰胺酶检测及耐药分析.中华医院感染学杂志,2001,11（2）：95-97.�
［5］ 倪语星,毛向群,王志军,等.质粒介导的超广谱β-内酰胺酶的耐药性问题及检测.中华医学检验杂志,1999,9（8）：19.
