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王飞马
作者单位：511500 广东清远，清远市中医院检验科
乙型病毒性肝炎（乙肝）是一种在全球范围内广泛流行的传染性疾病，主要由乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染所致。据统计，在目前乙肝疫苗和各种抗病毒药物广泛应用的背景下，HBV慢性感染者在全球范围内仍高达3.5亿，而我国更是慢性乙肝的高发地区［1］。此外，随着病情加重，慢性乙肝会逐渐演变为肝硬化、肝癌等疾病，严重威胁患者的生命安全，因此，加强慢性乙肝的防治已刻不容缓［2］。目前，临床普遍采用乙肝病毒e抗原（hepatitis B e antigen，HBeAg）监测乙肝患者的抗病毒治疗效果。然而临床实践证实，单纯通过监测HBeAg不足以真实反映乙肝患者体内病毒的复制情况，因此无法准确掌握患者的真实病情，继而影响其预后［3］。此外，鉴于临床尚未完全揭示乙肝发病的生理和病理机制，加之患者临床症状的复杂性，诸多肝功能指标和乙肝标志物虽可以反映患者的大致病情严重程度，但在疾病确诊方面仍存在较高的漏诊率和误诊率［4］。随着生物监测技术的不断发展和水平的不断提升，采用实时荧光定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction，PCR）可以快速、准确地反映乙肝患者体内病毒的复制水平，进而为临床诊断提供更加可靠的依据［5-6］。本研究选择2018年 10月—2021年5月清远市中医院收治的60例乙肝患者和同期60名健康体检者为研究对象，旨在探讨不同HBV-DNA水平对肝功能指标及乙肝标志物的影响，现将结果报告如下。
1.1 研究对象 选择2018年10月—2021年5月本院收治的60例慢性乙肝患者作为观察组，另外选择同期在本院进行健康体检的60名健康体检者作为对照组。
1.1.1 纳入标准 观察组：① 患者均符合《慢性乙型肝炎防治指南》诊断标准［7］；
② 经相关实验室检查确诊为乙肝；
③ 精神状况正常，意识清楚；
④ 临床资料完整。对照组：① 经血常规检测肝功能指标正常；
② 未感染肝炎病毒；
③ 近6个月内未服用影响肝功能的药物。
1.1.2 排除标准 ① 因其他因素导致的肝功能损伤患者；
② 合并其他类型病毒感染者；
③ 酒精性肝炎和脂肪肝患者；
④ 妊娠期和哺乳期女性。
1.1.3 伦理学 本研究符合医学伦理学标准，并经本院伦理批准（审批号：20211210），对受检者进行的检测均已获得知情同意。
1.2 检测方法 所有受检者均于空腹状态下采集 5 mL静脉血，以3500 r/min（离心半径10 cm）离心 10 min，分离血清后置于2～8 ℃环境中保存待检。于标本采集后28 h内，采用日立7600全自动生化分析仪检测血清学相关指标，包括天冬氨酸转氨酶（aspartate transaminase，AST）、丙氨酸转氨酶（alanine aminotransferase，ALT）、α-L-岩藻糖苷酶（α-Lfucosidase，AFU）。采用德国STAGO R MAX全自动血凝分析仪检测受检者凝血酶原时间（prothrombin time，PT），所有检测试剂均由德国STAGO公司提供。采用罗氏Cobas E601电化学发光仪检测患者乙肝标志物水平，包括乙肝表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）、乙肝表面抗体（hepatitis B surface antibody，HBsAb）、乙肝e抗体（hepatitis B e antibody，HBeAb）、HBeAg、乙肝核心抗体（hepatitis B core antibody，HBcAb）。采用宏石SLAN-96P扩增仪检测观察组患者的血清HBV-DNA水平，检测时设置5种标准品，浓度依次为3.0×107kU/L、3.0× 106kU/L、3.0×105kU/L、3.0×104kU/L、3.0×103kU/L， 同时设置阴性对照和阳性对照，最低定量为1.0× 102kU/L，阳性标准为5.0×102kU/L。
1.3 观察指标 ① 根据乙肝标志物检测结果，比较不同血清学模式乙肝患者HBV-DNA的阳性检出率和平均DNA含量。② 比较观察组HBV-DNA和HBeAg 的阳性检出率。③ 根据血清HBV-DNA水平，将观察组患者分为观察1组（38例，＜5.0×102kU/L）、观察2组（11例，5.0×102～＜1.0×104kU/L）、观察3组 （7例，1.0×104～＜1.0×106kU/L）和观察4组（4例， 1.0×106～1.0×108kU/L），比较各组ALT、AST、AFU、PT水平的差异。
1.4 统计学方法 采用SPSS 23.0统计软件对所得数据进行分析处理。符合正态分布的计量资料以均数±标准差（±s）表示，采用t检验，多组间比较行方差分析；
计数资料以例（%）表示，采用χ2检验。P＜0.05为差异有统计学意义。
2.1 一般资料 观察组与对照组受检者性别、年龄等一般资料比较差异均无统计学意义（均P＞0.05），有可比性。见表1。
表1 观察组和对照组的一般资料比较
2.2 观察组不同血清学模式乙肝患者HBV-DNA阳性检出率和平均DNA含量比较 不同血清学模式乙肝患者HBV-DNA阳性检出率和平均DNA含量比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表2。
表2 观察组不同血清学模式乙肝患者HBV-DNA阳性检出率和平均DNA含量比较
2.3 观察组HBV-DNA与HBeAg阳性检出率比较
观察组中HBV-DNA的阳性检出率明显高于HBeAg（P＜0.05）。见表3。
表3 观察组HBV-DNA与HBeAg阳性检出率比较
2.4 观察组与对照组肝功能指标比较 观察组AST、ALT、AFU和PT水平均明显高于对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表4。
表4 观察组和对照组肝功能指标比较（±s）
表4 观察组和对照组肝功能指标比较（±s）
注：AST为天冬氨酸转氨酶，ALT为丙氨酸转氨酶，AFU为α-L-岩 藻糖苷酶，PT为凝血酶原时间
PT（s）观察组 60 61.39±4.7345.48±5.0435.95±3.9915.62±2.54对照组 60 19.05±3.6821.19±4.6919.46±4.3011.56±0.92 t值 54.725 27.329 21.775 11.641 P值 0.001 0.001 0.001 0.001组别 例数（例）AST（U/L）ALT（U/L）AFU（U/L）
2.5 不同HBV-DNA水平各组乙肝患者的肝功能指标比较 随着HBV-DNA水平升高，乙肝患者的AST、ALT、AFU、PT水平也逐渐升高，组间比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）。见表5。
表5 不同HBV-DNA浓度各组乙肝患者的 肝功能指标比较（±s）
表5 不同HBV-DNA浓度各组乙肝患者的 肝功能指标比较（±s）
注：HBV-DNA为乙肝病毒DNA，AST为天冬氨酸转氨酶，ALT为 丙氨酸转氨酶，AFU为α-L-岩藻糖苷酶，PT为凝血酶原时间
PT（s）观察1组 38 35.45±4.82 34.61±5.1527.96±3.8512.67±1.25观察2组 11 50.48±5.57 42.58±5.2035.64±4.2813.48±1.21观察3组 7 74.63±5.93 65.89±4.7736.52±4.2516.66±2.03观察4组 4 90.36±4.46 92.63±3.7936.99±3.8921.05±2.41 F值 520.558 328.963 71.548 82.710 P值 0.001 0.001 0.001 0.001组别 例数（例）AST（U/L）ALT（U/L）AFU（U/L）
有研究表明，采用实时荧光PCR测定乙肝患者血清HBV-DNA含量较传统的检测方式能更直接地反映出患者体内的病毒水平［8］。而本研究中60例乙肝患者测定乙肝标志物结果显示，大三阳患者血清中HBV-DNA的阳性率和平均病毒DNA含量均明显高于小三阳患者和HBsAg、HBcAb均为阳性的患者。表明大三阳患者体内HBV能够快速复制且具有较强的传染性。此外，小三阳患者HBV-DNA的阳性率和平均病毒DNA含量虽低于大三阳患者，但其体内仍存在HBeAb，足以证明HBV的复制并未完全停止，可能出现缓解或发生基因变异，但该类型患者仍有较强的传染性［9］。
此外，本研究结果显示，观察组HBV-DNA的阳性检出率为48.33%，明显高于HBeAg阳性检出率（30.00%），该研究结果与张雪丹和翁跃颂［10］的研究结果一致，由此表明，检测HBV-DNA水平对判断乙肝患者病毒复制情况具有较高的应用价值。分析原因可能为乙肝患者机体内HBeAg水平的高低与病毒的复制程度有密切关系，且HBeAg为阴性而HBV-DNA为阳性的患者发展为肝硬化的风险更高，因此将HBV-DNA作为判断乙肝患者体内病毒复制情况的指标也具有更高的敏感度，而在此基础上结合乙肝标志物检测可以更好地反映患者体内的HBV复制情况［11］。另外本研究还表明，随着病毒DNA含量的增加，乙肝患者的肝功能指标（AST、ALT、AFU和PT）水平也会随之上升；
而王斌和黄汉菊［12］研究结果显示，HBV-DNA载量的对数值与ALT和AST呈正相关，分析原因可能是AST和ALT均可用于反映乙肝患者肝脏内炎症反应的严重程度，是临床用于判断肝细胞损伤情况的重要指标。二者与HBV-DNA载量之间的关系主要有以下几个观点：① 当肝细胞表面HBV抗原载量增加时，会引起人体的细胞免疫和体液免疫应答反应，而这两项机制是造成肝细胞损伤的主要原因；
② 大量病毒复制使中间产物在细胞内累积，进而引发肝细胞损伤；
③ 部分乙肝患者在服药治疗期间，受药物影响导致HBV的复制活性降低，但鉴于患者病情和个体差异的影响，可能引发药物性肝损伤。
AFU是一种催化含岩藻糖基的糖蛋白、糖脂等生物活性大分子水解酶的溶酶体酸性水解酶，被临床视为一种新的原发性肝癌肿瘤标志物，其水平高低与HBV感染有密切关系［13］。有研究表明，HBV在复制活跃的情况下会激发肝脏组织发生炎症反应，从而引发肝细胞变性、炎症细胞浸润，促使肝脏纤维组织增生，最终增加乙肝患者各项肝细胞和乙肝标志物的活性［14-15］。PT属于外源性凝血系统功能反应因子，PT的延长与纤维蛋白原（fibrinogen，Fib）缺失、获得性凝血因子缺乏有密切关系，推测其原因可能与肝脏功能损伤严重，从而导致由肝脏合成的各种凝血因子不足有关。因此对乙肝患者肝功能指标和相关血清标志物的检测，能够为判断患者的病情严重程度提供可靠的依据。
综上所述，随着HBV复制量的增加，患者各项肝功能指标水平也在不断升高，通过对HBV-DNA的定量检测可以及时有效地评估患者体内病毒复制情况，同时联合各项肝功能指标的检测，能及早发现患者肝功能损伤情况，从而为疾病治疗方案的确定提供可靠的依据。
利益冲突作者声明不存在利益冲突
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