【www.zhangdahai.com--村官述职报告】
【摘要】 目的 测定大卫颗粒中黄芩苷的含量。方法 采用高效液相色谱法，色谱柱为C18柱（4．6 mm ×250 mm ，5μm），流动相为甲醇-0．2％磷酸（50�∶�50）检测波长280 nm。结果 黄芩苷在1．504～15．04μg范围内呈线性，平均回收率为99．04%，RSD＝0．87％（n＝6）。结论 本方法简便、灵敏，准确，可用于大卫颗粒的质量控制。�
【关键词】 HPLC法；大卫颗粒；黄芩苷�
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To establish the determination method of baicalin in Dawei Keli By HPLC method
WANG Ming-jun ，TU Wei-jun， KUANG Cui-yi，et al.Department of Pharmacy,The First Affiliated Hospital of Sun Yat-Sen University,Guangzhou 510080,China�
【Abstract】 Objective To establish the determination method of baicalin in Dawei Keli． Methods The HPLC method for baicalin was used． Column：ODS-C18（4．6 mm ×250 mm ，5μm）, mobile phase：methanol:0．2%H�3PO�4(50:50),UV wave length：280 nm。Result There was a good linear relationship in the range of 1．504～15．04μg, The average recovery was 99．04％,RSD was 0．87％（n＝6）.Conclusion This method is simple,accurate and reliable．It can be used for the quality control of Dawei Keli .�
【Key words】 HPLC；Dawei Keli；baicalin
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大卫颗粒是由金银花、连翘和黄芩等六味药材组方而成，具有清热解毒，疏风透表的功效。用于感冒发热，头痛，咳嗽，鼻塞流涕，咽喉肿痛等症，对病毒性感冒、高热者尤适用。黄芩为方中主药之一，主要有效成分是黄芩苷，对其进行含量测定，可用于本品的质量控制。�
1 实验部分�
1．1 仪器与试药 Agilent 1100液相色谱仪包括紫外检测器（美国惠普），CLASS－vpV5．03色谱数据处理工作站（日本岛津）；CQ－250型超声波清洗器（330kHz，250W）。黄芩苷（供含量测定用，批号：715－200111）；甲醇为色谱纯，重蒸馏水（自制），其他试剂均为分析纯；大卫颗粒（自制）。�
1．2 方法与结果�
1．2．1 色谱条件 色谱柱为Agilent Zorbax SB-C18色谱柱（4．6 mm ×250 mm ，5μm），流动相为甲醇－0．2%磷酸（50:50），流速1．0 ml/min�检测波长280 nm，柱温30℃，对照品溶液和供试品溶液各进样10 μl，理论板数按黄芩苷计算不低于5 000。其色谱图见图1。供试品中黄芩苷与其他组分峰均能达到基线分离，大卫颗粒中其他成分对测定无干扰。�
1．2．2 检测波长的选择 黄芩苷对照品用流动相制备溶液，在200～500 nm范围内扫描，在280 nm处有最大吸收，故以此波长进行含量测定。�
1．2．3 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥至恒重的黄芩苷7．52 mg，置25 ml量瓶加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得黄芩苷0．3008 mg/ml对照品溶液。�
1．2．4 供试品溶液的制备 取本品内容物适量，研细，取约0．1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入70％乙醇50 ml，称定重量，超声处理20 min，放冷，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，用0．45μm的微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。�
1．2．5 线性关系考察 分别精密吸取黄芩苷贮备液（0．3008 mg/ml）0．5、1．0、2．0、3．0、4．0、5．0 ml，于10 ml量瓶中，用70％乙醇稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取上述各浓度对照品溶液10μl进样，按上述色谱条件测定。以峰面积为纵坐标，进样量为横坐标，进行线性回归，得回归方程y=1．70504×105C-1261．2；线性范围为1．504～15．04μg，结果表明存在良好的线性关系。�
1．2．6 精密度试验 精密吸取黄芩苷对照品溶液10μl，按“1．2．1”项的色谱条件，连续进样9次，根据测定的峰面积积分计算，RSD＝0．66％。结果表明精密度良好。�
1．2．7 稳定性试验 取“1．2．4”项下的供试品溶液，于放置0、2、4、8、12、24 h后分别精密吸取10μl，注入液相色谱仪，按“1．2．1”项下方法测定，其峰面积的RSD＝0．86％，表明供试品在配置后24 h内稳定。�
1．2．8 重复性试验 取同一批号供试品共6份，按“1．2．4”项下方法制备，取10μl注入色谱仪，按“1．2．1”项下方法测定，其含量的RSD＝1．11％，表明分析方法重复性好。�
1．2．9 回收率试验 取已知含量的同一批供试品6份，每份0．1g，精密称定，分别加入黄芩苷对照品适量，按“1．2．4”项下方法制备测定，计算回收率。结果平均回收率为99．04％，RSD＝0．87％（n＝6）（表1）。�
1．2．10 样品的含量测定 按“1．2．4”项下方法和测定条件，测定了3批样品中黄芩苷的含量，其结果为批号：20060301为1．21％、批号：20060302为1．25％和批号：20060303为1．23％。�
2 讨论�
以70％甲醇、70％乙醇作为提取溶媒，超声提取20 min，其黄芩苷含量分别为1．22％、1．21％、1．18％和1．19％，其结果含量差异都不大，以甲醇和乙醇提取溶出成分较多，为减少毒性，故以70％乙醇为提取溶媒最佳。�
以70％乙醇为提取溶媒，分别超声、回流提取，结果黄芩苷含量分别为1．21％和1．19％，超声提取操作简便，提取效率高，故选择超声提取。�
本品中的金银花为方中君药，其有效成分绿原酸的含量2005年版药典[1]152页金银花项下规定不得低于1．5％，参考该项下的含量测定方法对本品中的绿原酸进行含量测定，发现本品中其他组分对测定有干扰，调整流动相乙腈－0．4%磷酸的比例（13∶87）、（10∶90）、（7∶93）和甲醇－水－冰醋酸（50∶50∶1）[2]、甲醇－水－冰醋酸（50∶50∶0．3）[3]都未能使绿原酸与其他组分达到基线分离。以50％甲醇、50％乙醇、甲醇和乙醇为提取溶媒，结果都未能排除干扰。使用高效液相色谱法测定方中臣药黄芩中黄芩苷的含量，该方法干扰小，操作简便，色谱峰之间有较好的分离度，结果准确可靠，可作为本品的质量控制。�
参考文献
［1］ 中华人民共和国国家药典委员会．中国药典.化学工业出版社，2005.�
［2］ 刘贤耀.高效液相法测定清喉咽颗粒中黄芩苷的含量. 现代中药研究与实践，2005,19(6):49.�
［3］ 唐晓霞.银黄胶囊中黄芩苷的含量测定.中国药师，2005,8(11):913.�
