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【摘 要】：目的：分析测定不同采收期桑叶的总黄酮含量，为桑叶资源的利用提供科学依据。方法：以甲醇为溶剂，采用索氏提取及分光光度法测定桑叶中总黄酮。结果：由测定结果得知9月23日采收的桑叶总黄酮含量最高为7．29％。结论：不同采收期桑叶总黄酮含量变化差异较大，在桑叶开发及利用时应注意采收期对总黄酮含量的影响。
【关键词】：桑叶总黄酮分光光度法
【中图分类号】R282．71；R284．2【文献标识码】A【文章编号】1007－8517（2008）08－0044－02
Analysis of the Total Flavonoid Content in Mulberry Leaves in Different Growth Stages
Xu LiZhaoMeiJinGuanWeiDai
Liaoning Institute of Traditional Chinese Medicine，Shenyan，110161
Abstract：Objective To determine the contents of total flavonoids of mulberry leaves in the different growth stages， and provide the scientific evidence for the better exploit and utilize the leaves． Method Using Soxhlet method and extract with methanol for the leaves then determine the total flavone by pectrophotometry． Results The total flavonoid content measured was the highest 7．29％ in the leaves on September 20． Conclusion The differences of the total flavonoid content of mulberry leaves among different growth stages were very significant， and the collecting time must be considered when we utilize them．
Keywords：Mulberry leaves；Total flavonoid；Spectrophotometry
桑叶为桑科Moraceae桑属Morus L．植物的叶，我国大部分地区均产。本品为桑科植物桑（Morus alba L．）的干燥叶。初霜后采收，除去杂质，晒干。桑叶甘、苦，寒。归肺、肝经。具有疏散风热，清肺润燥，清肝明目。用于风热感冒，肺热燥咳，头晕头痛，目赤昏花，收载于2005版中国药典一部1。现代药理研究2表明，桑叶具有降糖降脂、抗氧化、抗肿瘤等多种活性。近年来对桑叶化学成分的研究3表明，桑叶中含有黄酮类、生物碱类、苯丙素类、有机酸类、甾体及三萜类等多种化合物。黄酮类化合物是桑叶的重要活性成分之一。笔者采用分光光度法首次测定了不同采收期桑叶总黄酮含量，为桑叶资源的合理开发利用提供科学依据。
1 仪器与药材
1．1 仪器 3010紫外分光光度仪日本日立公司；AR2140电子分析天平（上海奥豪斯公司）；HH－4数显恒温水浴锅（常州国华电器有限公司）；索氏提取器。药材：桑叶采集于辽宁丹东（2007年5月28日～10月21日）共21周，自然干燥，经鉴定为桑科植物桑（Morus alba L．）的干燥叶。对照品：芦丁（中国药品生物制品检定所，批号110752－200501）。试剂：甲醇（天津市百世化工有限公司）；无水乙醇（安徽特酒总厂出品）；石油醚（天津市元立化学有限公司）；5％亚硝酸钠溶液、10％硝酸铝溶液、1mol／L氢氧化钠溶液采用分析纯试剂均为自配。其它试剂均为分析纯。
1．2 实验方法与结果
1．2．1 标准品溶液制备 精密称取120℃常压干燥至恒重的芦丁对照品25mg，以少量甲醇溶解，置100mL量瓶中，用甲醇定容至100mL，摇匀，静置，配成含芦丁0．25mg／mL的标准溶液。
1．2．2 供试品溶液制备 取干燥桑叶，粉碎成细粉过5号筛，精密称取5g，置索氏提取器中，加甲醇60mL，于恒温水浴锅上提取4h，滤过，定容于100mL量瓶中。精密量取1mL，置于25mL量瓶中，加水至6mL，加5％亚硝酸钠溶液1mL，摇匀，放置6min，加10％硝酸铝溶液lmL，摇匀，放置6min，加1mol／L氢氧化钠溶液10mL，加甲醇定容至25ml，摇匀，放置15min，即得供试品溶液。
1．2．3 标准曲线绘制 精密量取标准品溶液0．0，1．0，2．0，3．0，4．0，5．0，6．0mL，分别置于25 mL量瓶中，按1．2．2的方法制备。以不加标准溶液的相应溶液为空白，在波长510nm处测定吸光度值，得到标准液浓度与吸光度之间的回归方程为：Y＝0．121361＋0．02176，r＝0．9992，该回归方程在0～60mg／mL范围内呈现良好的线性关系。
1．2．4 最大吸收波长选择 取标准溶液和供试液各1mL，分别置于25mL量瓶中，按1．2．2的方法项下平行制备标准溶液及供试液的测定液。在200～800nm波长范围内进行连续波长扫描，结果表明标准液及供试液均在510nm有最大吸收，故选择510nm为测定波长。
1．2．5 提取溶剂及提取方法的选择 分别以乙醇、甲醇为提取溶剂，又分别用石油醚脱脂、不脱脂，进行了提取溶剂及提取方法的筛选。结果表明，先用石油醚脱脂，再用溶剂提取，并不能提高桑叶总黄酮的得率；分别用乙醇和甲醇作提取溶剂，总黄酮的提取效率相当。因此，拟以甲醇提取，用硝酸铝显色法，在510nm测定桑叶总黄酮的含量。
1．2．6 不同采收期桑叶总黄酮含量测定按照上述供试品溶液制备方法，每份样品均平行制备3份，以不加供试
液的相应溶液为空白，在波长510nm处测定吸光度值，按回归方程计算测定浓度，测定结果见图1。结果表明：不同采收期桑叶的总黄酮含量相差较大，9月23日（第17周）总黄酮含量最高为7．29％。
2 讨论
通过甲醇提取、硝酸铝显色、分光光度法测定，分析了不同采收期桑叶总黄酮含量。该方法操作简便、结果可靠、重现性好，适于桑叶总黄酮含量测定。试验结果表明，不同采收期桑叶的总黄酮含量差异极显著，总之，在桑叶的利用上，应该重视其不同季节所含黄酮类成分的变化，以利于其采收及临床应用。
参考文献
1国家药典委员会．中华人民共和国药典．2005版．一部． 北京：化学工业出版社，2005．
2顾关云．桑的化学成分和生物活性研究进展．国外医药（植物药分册），World Phytomedicines，2007，01．
3王晓静，王元书，邱进等．桑叶化学成分研究．食品与药品，2007，09．
（收稿日期：2008．6．22）
