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【摘要】 目的 探讨应用布氏镜相差显微镜监测2型糖尿病合并冠心病治疗前后活血片中血小板聚集状况的临床意义。方法 选择2型糖尿病合并冠心病患者101例，进行常规治疗，治疗前后应用布氏镜相差显微镜在同一条件下检测患者活血片中的血小板聚集状况，与32例正常对照组的检测结果对比分析。结果 2型糖尿病合并冠心病各年龄组患者治疗前、治疗后检测的结果比较，P0.05差异无显著性。结论 与传统诊断2型糖尿病合并冠心病患者的疗效检测方法比较，布氏镜相差显微镜可直接观察血液中血小板的聚集状况，并且能跟踪观察其治疗效果，其方法简便可行，值得推广。
【关键词】 2型糖尿病合并冠心病；布氏镜；活血片；血小板聚集
The state of platelet aggregation of type 2 DM in coronary heart disease before and after treatment monitored by BVPM
WANG Ru,ZHAO Bin,CHEN De-qin，et al.The People’s Hospital of Shanting,Zaozhuang City,Shandong Province 277100,China
【Abstract】 Objective To investigate the clinical significance of the state of platelet aggregation of the activating blood film of the type 2 DM with coronary heart diseaseby usingBradford variable projective microscopy (BVPM).Methods To contrast 101 cases of Type 2 DM with coronary heart disease with routine treatment with BVPM at the same testing conditions with 32 patients of control group.Results To investigate the results of the testing of all age patients groups of type DM 2 with coronary heart disease,P0.05 There was no significant difference.Conclusion Contrast with the traditional diagnosis detection methods of Type 2 DM with coronary heart disease,the difference was that BVPM can be directly observed situation of the blood platelet aggregation and it can be able to follow their treatment.It is simple and feasible,it is worth promoting.
【Key words】 Type 2 DM with coronary heart disease; Bradford variable projective microscopy (BVPM) ; Activating blood film ;Platelet aggregation
心血管疾病是糖尿病患者死亡的主要原因之一。糖尿病患者中冠心病发病率高于非糖尿患者群，2型糖尿病合并冠心病发生年龄通常在50~60岁，具有病死率高、预后差和再发等特点。因此必须重视糖尿病合并冠心病的防治。2型糖尿病合并冠心病的治疗，主要是针对与胰岛素抵抗相关的高血糖、高血脂和高胰岛素血症诱发的凝血异常、血小板聚集、纤维蛋白原和纤溶酶原激活物升高等危险因子而实施的 ［1］ ；其疗效监测相对复杂，且费时费力，价格昂贵。本项研究利用美国布氏镜相差显微镜直接观察患者治疗前、后活血片中的血小板聚集情况，进行对比分析，取得满意的效果。
1 资料和方法
1.1 研究对象 2006年1月至2007年12月收治住院2型糖尿病合并冠心病患者101例，男48例，女52例，年龄40~70岁；全部患者均符合WHO诊断标准。对照组32例，男15例，女17例，年龄45~70岁。入选标准：无高血压、糖尿病、高脂血症、感染、肿瘤、肝肾功能不全、缺血性心脑血管病及其他血管性病变。
1.2 方法
1.2.1 所有患者诊断后即可采血，最迟不超过发病后4~6ｈ，然后给予临床常规治疗，经心电图、血液等常规检测，治疗显效后再次采集活血片进行检测，对照组同时给予采血，在同一条件下监测血小板的聚集情况。
1.2.2 活血片制作是否合乎要求直接影响检测结果，采血部位为右手无名指内侧，离指甲中线0.3 cm处，用75%乙醇消毒，再用无菌纱布块擦去小指表面剩余酒精，以专用一次性采血针垂直于指纹线快速进针3 mm，以便血液自然流出，避免挤压，动作要快，以防止血小板自然聚集，用20 μl的微量采血管，先于采血前吸10 μl 0.6 mol/L硫酸镁溶液,滴在消毒洁净的载玻片上，然后再快速吸20 μl血液滴在硫酸镁液体上，用微量吸管吸出吸进几次混匀，0.6 mol/L硫酸镁的作用是减少血小板自然聚集与裂解，但对已形成聚集的血小板块不影响，血液与硫酸镁的比例达2∶1时效果最佳［2］，将洁净盖玻片盖在血滴上并用带橡皮头的铅笔轻击盖玻片几下，使其血滴压平、压薄均匀散开，静置3 min后进行活血片镜检。先选择暗视野（DF）,用高倍镜最大倍数（接物镜头40×）;光亮度调到最亮，然后调焦聚，使监视器上细胞得到最佳清晰度，再转用相差光源，按顺序，全面观察，以防遗漏和重复，计数血小板聚集量，依次予以分级。
1.2.3 血小板聚集程度的量化 以血小板聚集的最大凝集块中的血小板数目分，可分为III级：1级：5~15个/块，轻度聚集；II级：16~35个/块，中度聚集；III级：36个以上/块，重度聚集。血小板聚集5个以上认为就是不可逆的。
1.3 统计学方法 检测结果以均数±标准差(x±s)表示，治疗前、后比较进行t检验，以P0.05差异无显著性；治疗后各组与正常对照组比较，P>0.05差异无显著性；Ⅰ、Ⅱ组血小板（PC）III级聚集治疗前、后比较P 3.2 冠心病的主要病理变化为冠状动脉粥样硬化引起不同程度的管腔狭窄、痉挛、甚至斑块破裂、血栓形成，造成相关动脉的部分或完全阻塞。冠心患者微血管内皮损伤到纤维斑块形成是一件复杂的病理过程。电镜显示，内皮细胞广泛脱落，其表面纤维素和血小板附着，并有脂质、钙盐的沉积。血小板的参与是其生理病理发生不可缺少的因素，血小板首先黏附聚集，血管损伤后，流经此血管的血小板被血管内皮下组织表面激活，立即黏附于损伤处暴露的胶原纤维上。粘附主要是一种表面现象，黏附一旦发生了，血小板的聚集过程也随即发生。聚集是指一些血小板相互粘连在一起的过程。聚集开始时血小板由圆盘形变成球形，并伸出一些貌似小刺的伪足，同时血小板脱粒，即原来储存于致密颗粒内的ADP、5-羟色胺等活性物质被释放，一方面激活血小板和激活内源性凝血途径；损坏的血管组织释放凝血因子Ⅲ，激活外源性凝血途径，于是在此局部迅速形成凝血酶；另一方面血管损伤使局部血管壁前列腺环素（PGI�2）减少。这样，由此血管通过的血小板即粘附于损伤处的胶原纤维上，随即血小板也发生变形、聚集，并激活磷脂酶A�2导致合成磷脂及血栓素A�2(TXA�2),TXA�2可使血小板内CAMP减少而游离Ca2+增多，以至血小板脱粒释放内源性ADP，又使更多的血小板聚集，迅速形成松软的止血栓子，部分聚集的血小板或止血栓子随着血液循环到各毛细血管［3］。
3.3 糖尿病患者血脂增高能促使血管壁细胞摄取脂质和动脉平滑肌细胞和巨噬细胞摄取胆固醇；LDL的糖基化抑制肝细胞上受体对其识别而使其代谢减慢，并通过清道夫受体结合而被巨噬细胞优先吞噬和降解，堆积在巨噬细胞内成为泡沫细胞而促进动脉粥样硬化斑块的形成。糖尿病患者尤其在血糖控制不良时，患者由于LDL∶TG产生过多，同时高血糖产生糖基化反应，长期高血糖环境亦可促使血管内皮细胞受损，并抑制其修复，更容易造成血小板聚集，聚集后的血小板斑块，可随血液循环流经全身。本研究就是通过手指血液来检测血小板聚集状况的。
3.4 本研究发现，2型糖尿病患者中有合并冠心病的都同时有高血糖、高脂血症。因此，对2型糖尿病合并冠心病患者，应该及早采取有效的治疗措施，综合施治，随时监测其疗效。通过本研究发现，应用美国布氏镜相差显微镜动态监测糖尿病合并冠心病患者，具有高效、实用，可准确预测其疗效程度，优于其他诊断方法。
3.5 布氏镜是由美国生产应用于临床检验学的高分辨超显微系统的精密显微镜，其功能特点与普通显微镜相比，放大倍数高，可达3万倍，普通显微镜最多只能放大2千倍左右。布氏镜还采用了最新光导技术，配有暗示、相差、明视野等光源，并可直接应用可见的偏振光导技术，配有大屏幕显示器和彩色记录仪等部分，扩大了光学显微镜的功能范围，更具有现代化和科学性，使得生物活体无需经过任何特殊处理和染色，就能把以往无法探察的活体微观世界直观地显示在眼前［4］。本课题就是利用了布氏镜观察活体血小板聚集状况，来动态监测2型糖尿病合并冠心病患者疗效。
4 结论
本研究应用布氏相差显微镜动态监测患者活血片血小板聚集状况，方法简便，对患者随时可以监测并且痛苦少，节约费用，监测速度快，患者乐于接受，并能跟踪观察其治疗效果，值得推广。
参 考 文 献
［1］ 陈灏珠.实用内科学.人民卫生出版社,2005:1028.
［2］ 俞丁善.临床基础检验学.人民卫生出版社,1997:97-100.
［3］ 张慧玲等.冠心病病人治疗前后血浆溶血磷脂酸水平变化的研究.医学检验与临床,2006,17:27.
［4］ 骆秉铨等.布氏镜活血分析与细胞流变学研究的新方法.微循环杂志,1997,23：30.
