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摘 要：山茱萸多糖是山茱萸中的一种主要活性成分之一，具有多种药理作用和生物活性功能，是目前的一个研究热点。笔者对山茱萸多糖的提取、分离纯化、化学结构及生物活性等多方面进行了综述，为山茱萸资源的深入开发起一定借鉴作用。
关键词：山茱萸；多糖；分离纯化；化学结构；生物活性
中图分类号：R282文献标识码：A文章编号：1673-2197（2008）09-0135-03
山茱萸为山茱萸科植物山茱萸(Fructus Corni)的干燥果肉，又名山萸肉、药枣、肉枣等。临床上以除去种子的成熟果实入药，其味酸、涩、微温，归肝肾经，有补益肝肾、涩精固脱之功效，是我国的传统中药材［1-2］。山茱萸果肉中含糖类、有机酸类及其酯类、鞣质类等［3］，是治疗糖尿病、冠心病和高血压病的主要药材。近年来山茱萸多糖的研究已取得一定进展，药理学研究证明，山茱萸多糖是山茱萸生物学活性物质的重要成分。本文就山茱萸多糖的化学和药理学研究情况综述如下。
1 山茱萸多糖的提取
1.1 热水提取法
山茱萸多糖的提取方法通常采用水提醇沉法。一般先将其干燥的果实用95%的乙醇或石油醚脱脂，再经热水提取后，加入一定量的无水乙醇沉淀得粗多糖。粗多糖加水复溶后，再经过透析除去小分子化合物，柱层析纯化醇沉后，即可得山茱萸多糖。张彩莹等［4］利用均匀设计法确定了水提醇沉法的最佳工艺条件：料液比:1∶36，提取温度：100℃，提取时间：180min，多糖的得率为199.36mg/g（相对于预处理的山茱萸粉末）。此法的优点在于提取所用溶剂蒸馏水经济易得，提取率较高，而且操作安全简便，不会造成大的污染。但是此法提取的时间较长且能耗较大。
1.2 稀碱提取法
李平等［5］以四川产山茱萸为原材料，对山茱萸水提取后的残渣用4倍体积2.5mol/L NaOH，4℃提取4h，重复提取两次。滤过，合并滤液，用HCl中和滤液至中性，减压浓缩，浓缩液经过醇沉、洗涤、真空干燥，得褐色山茱萸碱提粗多糖。此法可使多糖含量增加，但酸碱提易破坏多糖的立体结构及活性，且提取后液体需要中和，程序繁琐，所以较少使用［6］。
1.3 超声水提法
研究表明［7］，利用超声波的高频震荡、加速度和强烈的“空化效应”及搅拌作用，可加速有效生物活性成分进入溶剂，从而提高提取率、缩短提取时间、节约溶剂，并可在低温下进行，有利于有效成分的保护，同时设备也较为简单，具有广泛的应用前景。张丽娟等［8］利用超声水提法从山茱萸中提取山茱萸多糖，表明影响提取率的主要因素为料液比，最佳提取工艺为料液比1∶20、提取温度80℃、提取时间60min。多糖的平均提取率为：13.65%。
2 山茱萸多糖的分析
2.1 山茱萸多糖的含量测定
目前山茱萸多糖的含量一般采用苯酚-硫酸法［4，9］来测定。
2.2 纯度检测［10］
山茱萸多糖的纯度可用聚丙烯酰胺凝胶电泳、醋酸纤维薄膜电泳和凝胶色谱法检测。聚丙烯酰胺凝胶电泳所用缓冲液为pH9.5的硼砂液，染色剂是高碘酸-希夫试剂；醋酸纤维薄膜电泳所用缓冲液为pH12.0的硼砂液，甲苯胺蓝染色；凝胶色谱法所用凝胶为Sephadex G-150和DEAE Sephadex A50，0.1mol/L NaCl洗脱，蒽酮-硫酸法检测。多糖经两种电泳均为单一色带，经凝胶色谱柱层析，流出液均为单峰，再用考马斯亮蓝G-250染色法检测蛋白质含量，即可说明它们均为单一组分。
2.3 山茱萸多糖的化学组成分析
杨云等人［11］采用气相色谱法，从粗多糖中分离纯化得到了1个级分Co-4，研究表明它是葡萄糖、木糖、半乳糖和岩藻糖等四种单糖组成，其摩尔比为7.75∶3.88∶3.20∶1。
舒晓燕等人［12］采用薄层色谱和红外光谱分析法，得出酸性多糖M可能是由两种单糖所组成：葡萄糖，甘露糖或半乳糖。
李平等人分别研究了水提［13］和碱提山茱萸多糖的单糖组成，研究表明水提山茱萸多糖PFCAⅢ主要由鼠李糖、阿拉伯糖和葡萄糖以13.74∶50.54∶35.72的摩尔比组成，平均分子量为1.74×10�4，水溶性较差；碱提山茱萸多糖PFCCⅠ由木糖和葡萄糖以18.8∶81.2的摩尔比聚合而成，其水溶性较好。
综上所述，山茱萸多糖的单糖主要由戊糖和己糖构成，如戊糖中的木糖，己糖中的葡萄糖、半乳糖、鼠李糖等，此外还有一些单糖衍生物如甘露糖等。这为确定其结构奠定了良好的基础。
2.4 山茱萸多糖的理化性质分析
糖在浓硫酸的作用下脱水形成糠醛及其衍生物，后者与α-萘酚作用形成紫红色复合物，在糖液和浓硫酸的液面间形成紫环；与蒽酮作用生成蓝绿色复合物；与苯酚作用生成黄棕色复合物。Benedict试剂为含Cu2+的碱性溶液，能使还原糖氧化成酸类化合物，其碱性较Fehling试剂弱、灵敏度高、干扰因素少［14］，可用来检测山茱萸多糖是否具有还原性。
3 山茱萸多糖的药理活性
3.1 抗氧化性和清除自由基的作用
李平等［13，15］用水提山茱萸多糖对油脂抗氧化性能实验表明，该多糖对动物油具有较好的抗氧化能力，其效果接近于VC；对植物油具有一定的抗氧化能力，但效果比VC及TBHQ差。该多糖对Fenton体系产生的羟基自由基有清除作用，清除率为50%，所需药量为430μg/mL；对邻苯三酚体系产生的超氧阴离子自由基有一定的清除作用。该课题组［5］还对碱提所得的山茱萸多糖PFCCⅠ用Fenton反应检测PFCCⅠ对・OH的清除作用，并以羟基自由基・OH清除剂苯甲酸和甘露醇为对照，结果显示三者对・OH的清除率达50%所需浓度分别为18、330、80μg/mL；PFCCⅠ还可有效抑制猪油和芝麻油的氧化，其对O2-的清除率达50%，所需浓度为35.0μg/mL。结果表明碱提山茱萸多糖具有良好的抗油脂氧化和清除自由基能力。
3.2 免疫兴奋作用
苗明三等［16，17］研究了山茱萸多糖对环磷酰胺致免疫抑制小鼠的作用，结果表明山茱萸多糖可显著提高CY，致免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数，促进免疫抑制小鼠溶血素、溶血空斑的形成和淋巴细胞转化，提示山茱萸多糖有较好的免疫兴奋作用。
3.3 抗衰老作用
欧芹等［18，19］研究了山茱萸多糖对HDF细胞β-半乳糖苷酶及p16基因表达的影响。结果表明山茱萸多糖可提高细胞活力、降低β-半乳糖苷酶含量及 p16蛋白表达阳性细胞数，提示山茱萸多糖可通过改变p16的表达而发挥其抗HDF细胞衰老作用。
3.4 保护脑组织的作用
张丽娟等［8］利用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，通过测量脑组织NO含量和NOS活性，探讨山茱萸多糖了对脑缺血再灌注大鼠脑组织的保护作用。结果表明山茱萸多糖能明显降低NO含量及NOS活性，从而保护脑组织。
关于山茱萸多糖的药理活性，目前报道的有其抗衰老、增强免疫的作用，而其它研究却甚少。多糖一般具有抗肿瘤、抗病毒、降血糖血脂、抗辐射、有抗凝血、抗突变、抗溃疡等功能，因此山茱萸多糖的生物活性有待于进一步研究，进而为其产品的开发应用提供理论基础。
4 展望
近年来，由于分子生物学、生物化学等学科的发展，多糖的多种生物活性逐渐被人们发现和认识，已成为当前新药发展的方向之一。山茱萸多糖是山茱萸中所含的重要化学成分和有效成分，具有一定的药理活性。目前对于其化学结构的研究还不够全面和深入，同时关于多糖的高级结构与其生物学活性关系的研究也不清楚。随着现代化分离技术和现代分析仪器的发展和完善，山茱萸多糖的纯化工艺、构效关系及活性研究是今后的主要研究方向，具有巨大的开发潜能。
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（责任编辑：姜付平）
Advancement in Research of Polysaccharide From Fructus Corni
Li Xiaorong，Zhao Peng，Zhang Lihua
(Department of Pharmaceutical，Shanxi University of Chinese Medicine，Xianyang 712046)
Abstract：
The polysaccharide of Fructus Corni，was a kind of the main functional components of the Fructus Corni，possesses various pharmacological and physiological activities and studies on this polysaccharides has become to a research hotspot in recent years.The research progress of extraction，isolation and purification，chemical constitution and bioactivities of the polysaccharides of Fructus Corni were reviewed in this paper，which is helpful to the further research and development of Fructus Corni.
Key words：
Fructus Corni；Polysaccharides；Isolation and purification；Chemical constituti on；Bioactivity
