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【摘要】 目的 建立测定人血浆中尼美舒利浓度的方法。方法 采用反相高效液相色谱法。结果 尼美舒利在0．4～12．8 μg/ml范围内有良好线性关系，r=0．999 7，血浆中药物最低检测浓度为0．15 μg/ml，血浆中3种浓度0．4、3．2、12．8 μg/ml回收率分别为99．8%、101．0%、100．5%，日内、日间RSD分别为5．58%、2．97%、2．22%及5．54%、3．82%、2．91%。结论 本法操作简便、结果可靠，适用于尼美舒利血药浓度及生物利用度的测定。
【关键词】 尼美舒利;血药浓度; HPLC
尼美舒利(Nimesulide)是一种新型非甾体抗炎药，具有抗炎、镇痛、解热作用，毒副作用小，临床常用于风湿关节炎、软组织损伤、泌尿系统炎症、术后疼痛及各种发烧等疾病［1，2］。关于尼美舒利血药浓度测定国内已有报道，但操作繁琐，本文建立了简便、分离效果好的HPLC测定方法。
1 材料
1．1 仪器 HPLC系统(日本岛津LC-10A，配有SPD-10A紫外检测器，CTO-10A柱箱，LC-10AD泵，C-R6A记录仪)，Force-7高速台式离心机(美国丹法)。
1．2 试药 尼美舒利标准品由哈尔滨天然药物研究所提供；甲醇(色谱纯)，山东禹王实业有限公司禹城化工厂；内标苯乙酮、乙酸乙酯、高氯酸均为分析纯；水为重蒸馏水；空白人血浆由沈阳中心血站提供。
2 方法与结果
2．1 色谱条件 色谱柱：Sphersorb C��18�(200 mm×4．6 mm,�10 μm�大连依利特)；流动相：甲醇-水(40：60)；流速：1．0 ml/min；紫外检测波长：307 nm；检测灵敏度为0．001AUFS；柱温：40℃。
2．2 标准溶液及内标溶液的配制
2．2．1 尼美舒利标准储备液 精密称取尼美舒利标准品�20 mg�置100 ml量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度。取此溶液配成含尼美舒利10、20、40、80、160、320 μg/ml的标准系列溶液。
2．2．2 内标溶液 精密量取苯乙酮4 ml，置1 000 ml量瓶中，甲醇溶解并稀释至刻度，配成4 μg/ml的内标液。
2．3 测定方法
2．3．1 血浆样品处理 取血浆样品0．5 ml，置于2 ml具塞离心管中，加内标液苯乙酮10 μl，再加10%高氯酸0．6 ml，振荡1 min，离心10 min(10 000 r/min)；取上清液0．8 ml，置于�5 ml�具塞试管中，加乙酸乙酯2 ml，振荡1 min，离心10 min�(3 000� r/min)；取上清夜1．9 ml，在50℃水浴中用氮气吹干，残留物用流动相80 μl溶解，取20 μl进样，记录色谱图(见图2)，同时记录空白血浆色谱图(见图1)。
2．3．2 标准曲线的制备 取空白血浆0．5 ml，分别加入尼美舒利标准系列溶液20 μl，使血浆中尼美舒利浓度分别为0．4、0．8、1．6、3．2、6．4、12．8 μg/ml，按“血浆样品处理”项下操作，记录色谱图；以血浆中尼美舒利的浓度为横坐标、以尼美舒利与内标的峰面积比值为纵坐标，所得数据经回归计算，求得标准曲线。本方法在0．4～12．8 μg/ml之间有良好的线性范围，方程为Y=0．2330+9．6245X，r=0．9997，定量限为�0．4 μg/ml�。
2．4 回收率及精密度取空白血浆加入尼美舒利储备液使浓度分别为0．4、3．2、12．8 μg/ml、加入内标按“血浆样品处理”项下操作，连续测定6 d，回收率及精密度，见表1、2。
3 讨论
3．1 文献报道［3，4］以苯或乙醚为提取剂，磷酸盐缓冲液为流动相，本文以乙酸乙酯提取，增加了回收率同时又减少了以上试剂的危害及危险性。
3．2 本法洗脱效果好，血浆中内源性物质和尼美舒利及内标能良好的分离，尼美舒利及内标保留时间分别为6．27、�9．83 min�，本法适用于尼美舒利的血药浓度测定及生物利用度研究。
参考文献
1 李俊，陈学广，张运芳,等.国产尼美舒利片剂的药代动力学和相对生物利用度研究.中国临床药理学杂志 1994，10(2)：106-108.
2 汤广璐.新型消炎药-尼美舒利.中国药理学通报,1996，12(1)-86.
3 李红，汪平君.HPLC法测定国产尼美舒利血浆浓度.中国现代应用药学杂志，1999,16(3).
4 王晓燕，李淑芳，赵洁生，等.HPLC测定血浆中尼美舒利浓度.中国药学杂志，1998，33(5):295-297.
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