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[摘要] 目的 探讨乙肝病毒(HBV)感染者血清中前S1蛋白(Pre-S1)、HBV-DNA与HBeAg的检出情况,评估Pre-S1在乙型肝炎诊断中的作用。方法 收集本院2008年1月至3月175例乙型肝炎患者的血清,采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测HBV Pre-S1与HBV血清标志物,荧光定量PCR法检测HBV-DNA,以HBV-DNA>5×10�2拷贝•ml-1为阳性诊断标准。结果 不同HBV-M模式中,Pre-S1与HBV-DNA的阳性检出率比较无显著性差异(P>0.05);Pre-S1与HBV-DNA的阳性符合率高于HBeAg与HBV-DNA的符合率;在HBeAg阴性患者血清中仍可不同程度地检出Pre-S1与HBV-DNA。结�论 Pre-S1可作为HBV感染、复制的一项新指标,对乙型肝炎的诊断具有重要价值。�
[关键词] 乙肝病毒(HBV)Pre-S1;HBV-DNA;乙肝血清标志物;病毒复制�
[中图分类号] R512.62
[文献标识码] A
[文章编号] 1671-7562(2009)04-0289-03
Effect of Pre-S1 of hepatitis B virus in diagnosis of Hepatitis B
GAO Xia,LI Zhuo-cheng,SHE Ji-jia,CHEN Jian-xiong,LI Li-ming
(Department of Clinical Labolatory,the Second People�s Hospital of Shenzhen,Shenzhen 518035,China)
Abstract:Objective To investigate the detections of hepatitis B virus(HBV)Pre-S1,HBV-DNA and HBV pre-S1 antigen in patients� serum and to evaluate the effect of Pre-S1 antigen in diagnosis of hepatitis B.Methods In studied 175 patients, both HBV serum marker and pre-S1 antigen were detected by ELISA and HBV-DNA were detected by PCR.HBV-DNA>5×10�2 copies•ml-1 is set as positive for virus duplication. Results The positive ratio between Pre-S1 and HBV-DNA have no statistically significant difference in different HBV-M models(P>0.05). The correlation of Pre-S1 and HBV-DNA is higher than that of HbeAg and HBV-DNA.Pre-S1 and HBV-DNA could be detected in the patients with HBeAg negative.Conclusions Pre-Sl may be used as a new and reliable serum detector for HBV infection and duplication because of its closecorrelation with �HBV-DNA,and it can play a great role in diagnosis of hepatitis B.�
Key words:hepatitis B virus(HBV) pre-S1 antigen;HBV-DNA; HBV serum marker;viral replication�
(Modern Medical Journal,2009,37:289-291)
近年来,对乙肝病毒(HBV)前S1蛋白(Pre-S1)的检测已引起国内外学者的关注与研究。Pre-S1是由HBV基因组S区编码的病毒衣壳蛋白,与前S2蛋白(Pre-S2)和HBsAg共同构成HBV的表面大蛋白分子,主要存在于具有传染性的Dane颗粒中,在介导HBV感染和免疫清除中具有重要作用[1]。经检测证实,HBV Pre-S1可以反映HBV在体内感染并复制的状况,是判断乙肝感染和DNA是否发生突变一项新的重要指标[2]。本研究通过对175例乙肝患者血清标志物和病毒Pre-S1及HBV-DNA的检测,探讨Pre-S1在乙型肝炎诊断中的作用。�
1 材料与方法�
1.1 标本来源 �
175例乙肝患者血清标本均来自本院2008年�1月至3月的门诊和住院病人,其中男97例,女78例,年龄17~58岁,诊断均符合2000年9月全国病毒性肝炎学术会议修订的标准。收集患者做HBV-DNA和HBV-M血清标志物标本,于-20 ℃冷冻保存,分批检测Pre-S1。1.2 检测方法 �
HBV Pre-S1抗原检测试剂盒由上海复星长征医学科学有限公司提供,采用ELISA双抗体夹心一步法。HBV血清标志物HBV-M试剂盒由珠海丽珠生物工程有限公司提供,采用ELISA法测定。酶标法判断结果,仪器为瑞士汉密尔顿公司Fame2420酶标仪。血清HBV-DNA检测用荧光定量PCR法,试剂由深圳匹基生物工程有限公司提供,仪器为美国Bio-RAD icycler PCR荧光定量分析仪。�
1.3 实验分组 �
按不同HBV-M进行分组:HBsAg、HBeAg和HBcAb(+)为A组,HBsAg、HBeAb和HBcAb(+)为B组,HBsAg和HBcAb(+)为C组,其他模式为D组。�
1.4 统计学处理�
采用配对资料的χ2检验。�
2 结果�
2.1 各组Pre-S1与HBV-DNA检出情况比较�
见表1。Pre-S1与HBV-DNA的检出率A组为91.8%和95.9%;B组为46.8%和41.5%;C组为�41.9%和38.7%。各组HBV-DNA与Pre-S1的检出率比较无显著性差异(P>0.05)。说明HBV-DNA与Pre-S1检测结果具有一致性。�
2.2 Pre-S1、HBV-DNA阳性与HBeAg的关系�
见表2。在49例HBeAg阳性标本中,Pre-S1与HBV-DNA的阳性检出率分别为91.8%和95.5%,三种指标的检出率比较无统计学意义(P>0.05),说明HBV-DNA、Pre-S1与HbeAg三者的阳性率相近。在126例HBeAg(-)标本中,Pre-S1与HBV-DNA的检出率分别为39.68%和35.71%,说明虽然HBeAg转阴但仍可能有病毒复制。
2.3 HBV-DNA、HBeAg与Pre-S1检测结果比较�
以HBV-DNA≥5×10�2拷贝•ml-1为判断HBV复制的标准,在95例Pre-S1(+)标本中,检出HBV-DNA(+)92例,检出率为96.84%,与Pre-S1(+)检出率比较无显著性差异(χ2=3,P>0.05);而HBeAg阳性仅49例,检出率为51.58%,与Pre-S1检出率比较有显著性差异(χ2=40.33,P[3]报道一致,说明Pre-S1与病毒复制密切相关。在HBV-DNA(-)的83例中,检出12例Pre-S1,说明Pre-S1与HBV-DNA存在着交叉阳性和交叉阴性,两者具有互补性。�
3 讨论�
3.1 HBV Pre-S1的结构及致病机制 �
HBV基因组轻链有4个开放读码框架(S、C、P、X),其中S区分为Pre-S1、Pre-S2及S区,分别编码HBV包膜上的Pre-S1、Pre-S2蛋白及HBsAg,三者合称为大分子蛋白,Pre-S1蛋白为108或119个氨基酸组成的肽链,主要存在于具有传染性的dane颗粒上,因此被认为是一个传染性标志。Pre-S1蛋白具有肝细胞膜受体,在介导病毒附着及入侵肝细胞中起重要作用,是病毒感染复制的一个重要指标〔2〕。�
3.2 Pre-S1与HBeAg的关系 �
HBeAg是一种可溶性蛋白,自肝细胞内复制装配完成后释放到血清中,其消长与病毒体的消长基本一致,HBeAg阳性表示HBV正在复制,是具有很强传染性的一个指标。本研究中A组49例HBeAg阳性标本中,HBV-DNA与Pre-S1的检出率分别是95.5%和�91.8%,HBV-DNA与Pre-S1的检出率比较差异无统计学意义;Pre-S1、HBV-DNA与HBeAg的检出率相一致。Pre-S1与HBeAg双阳性能更准确地反映病毒的复制情况。本研究126例HBeAg阴性标本中,仍可检出50例Pre-S1和45例HBV-DNA阳性,说明HBeAg转阴不能说明病毒复制停止,且HBeAg也有可能出现假阴性。HBeAg的假阴性可能是由以下原因引起:一是在长期抗病毒压力下DNA前C区发生突变,一旦突变病毒株在血清中占主要优势,基因缺失部分就在病毒复制中起重要作用;二是其前体中氨基酸发生移位而病毒本身复制不受影响[3-4]。因此,在反映病毒复制方面Pre-S1较HBeAg敏感,同时Pre-S1也可作为判断病毒前C区是否发生突变的一个重要指标。�
Pre-S1的检测可避免由于抗病毒药物等其他原因导致HbeAg阴性而病毒仍然复制的情况,对指导抗病毒治疗有重要作用。荧光定量PCR检测HBV-DNA虽能灵敏反映病毒复制的存在及程度,但因其操作复杂,影响因素多,技术要求高,价格比较贵等,在一些基层医院目前尚未普及。而用ELISA法检测Pre-S1,其技术要求和成本均低,在基层医院易于实施。Pre-S1和HBV-DNA联合检测对HBV-M的诊断意义更大。�
[参考文献]�
[1]江浪进,李云慧,刘政.前S1蛋白在乙型肝炎诊断及预后判断中的临床价值[J].中国实验诊断,2006,10(11):1296-1299.�
[2]宋爱云,王占英.乙型肝炎病毒前S1蛋白与病毒复制的关系[J].包头医学,2008,32(3):129-130.�
[3]朱合,吴书笔.检测乙肝病毒前S1蛋白的临床意义[J].人民军医,2006,49(2):80-81.�
[4]杨益,李琪玲.前S1蛋白与乙肝病毒复制及HBV-DNA的关系[J].实用医技杂志,2006,13(12):2038-2039.�
[收稿日期] 2009-01-14
