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【摘要】 目的 研究蠲哮汤对哮喘大鼠血管内皮细胞黏附分子（ICAM-1）及白介素12（IL-12）表达的影响。方法 建立由卵蛋白诱发的支气管哮喘大鼠模型；采用ELISA法检测哮喘大鼠静脉血和肺泡灌洗液(BALF)中ICAM-1、IL-12的含量。结果 模型组ICAM-1高表达，IL-12低表达，蠲哮汤能减少造模动物ICAM-1的表达，提高IL-12的表达。结论 蠲哮汤能减少造模动物ICAM-1，提高IL-12的表达，而且随着药物剂量的减少，各分表达呈递增趋势，具有量效关系。
【关键词】蠲哮汤；哮喘大鼠动物；祛瘀化痰法；ICAM-1；IL-12
Effects of Juanxiao decoctionon expression of ICAM-1 and IL-12 in asthmatic rats
HE Ming，YANG Jian-min，ZHANG Jing.Guangdong Xinhai Hospital，Guangzhou 510300,China
【Abstract】 Objective To explore effects of Juanxiao decoction on expression of ICAM-1 and IL-12 in asthmatic rats.Methods Ovalbumin-inducedasthmatic rat modelwas established ; venous blood and Bronchoalveolar Lavage Fluid were collected from asthmatic rats to measure the levels ofICAM-1 and IL-12 with ELISA.Results Higher expression of ICAM-1 and lower expression of IL-12 were found in model group.Conclusion Juanxiao decoctiondecreased expression of ICAM-1 and increased expression of IL-12 in model rats，anddose-effect relationship between the Juanxiao decoction and model rats was showed.
【Key words】Juanxiao decoction; Asthmatic rat model; Removing blood stasis and dissipating phlegm; ICAM-1; IL-12
支气管哮喘是一种以嗜酸性细胞反应为主的慢性气道炎性反应，嗜酸性细胞等分泌TXA�2、PGI2等炎性介质可引起支气管平滑肌收缩、微血管扩张、通透性增高和渗出物增多等一系列的炎性反应。目前认为，白细胞和内皮细胞表面的细胞黏附分子特别是ICAM-1等的相互作用是炎性反应形成的基础。细胞因子诱发黏附分子表达则对气道炎性反应的形成起决定作用，而在哮喘中IL-12缺陷导致IL-4等TH-2类细胞因子增多，诱发黏附分子表达增强而产生炎性反应。研究表明，提高IL-12水平或阻断ICAM-1的激活可以减少炎性介质的释放，减轻气道炎性反应。临床实践表明�血化瘀法(如蠲哮汤)治疗哮喘有满意的疗效，且能改善微循环、减少TXA�2等炎性介质的释放，故推测�血化瘀方蠲哮汤可能通过提高IL-12水平、阻断ICAM-1的激活或使其处于低表达水平，抑制炎性介质的释放，从而达到治疗哮喘的目的。本文以临床经验为基础，研究蠲哮汤对哮喘大鼠血管ICAM-1及IL-12表达的影响，从子生物学水平探讨祛痰化瘀法治疗哮喘的作用机理，现报告如下。
1 材料和方法
1.1 材料
1.1.1 动物 SPF级SD大鼠48只，体质量200~250 g，雄性，由中山医科大学动物实验中心提供(实验动物合格证号：医动字第26-98A001)，随机分为6组，包括正常对照组、哮喘模型组、蠲哮汤大、中、小剂量组、阳性药对照组各8只。
1.1.2 实验药物 蠲哮汤组成：葶苈子10 g、青皮10 g、陈皮10 g、槟榔10 g、大黄10 g、生姜10 g、牡荆子15 g、鬼箭羽15 g。中药饮片购自广州中医药大学第一附属医院，均为合格药材，将各个组成成分均研细末过100目筛，然后按比例混合，加蒸馏水煎汁浓缩到0.5 g生药/ml备用。
1.1.3 试剂 Elisa试剂盒IL-12，ELISA试剂盒由深圳晶美生物工程有限公司提供。卵白蛋白(OVA)为Sigma公司产品。
1.1.4 主要仪器 PE480热循环仪，高速冷冻离心机(SORVALLRC5C Plus)，UV1601型紫外分光光度仪(SHIMADZU)，ZF型紫外分析仪(上海嘉鹏科技有限公司)，凝胶图像分析仪(SYNGENE)。
1.2 方法
1.2.1 造模及各组干预措施 参照文献方法造模［1，2］，先以10%卵蛋白生理盐水1 ml腹腔注射，2周后将致敏大鼠放入半密闭的有机玻璃罩内，以50 kPa(1 kPa=7.5 mm Hg)恒压喷入2%卵蛋白生理盐水20 s后再在雾室中放置30 s；隔日诱喘1次共5次；以大鼠腹肌明显收缩为阳性。①正常对照组：用0.9%生理盐水1 ml腹腔注射，2周后用同样的方法雾化吸入0.9%生理盐水。分别于第3、4、5次雾化吸入0.9%生理盐水诱喘后胃内注入蒸馏水3 ml；②哮喘模型组：按上法制备哮喘动物模型，于第3、4、5次诱喘后胃内注入蒸馏水3 ml；③蠲哮汤大、中、小剂量组药物组：按上法制备哮喘动物模型，分别于第3、4、5次诱喘后胃内注入(灌胃)已煎好的中药3 ml(用药量相当于成人每千克用药量的3倍)；④阳性药对照组：按上法制备哮喘动物模型，分别于第3、4、5次诱喘后胃内注入。
1.2.2 标本采集及处理 ①末次给药后禁食12 h，在各组动物的胃内分别灌入相应的药物或生理盐水，40 min后以0.4%的戊巴比妥钠麻醉动物，剖腹抽取腹腔静脉血5 ml，4℃、3000转/min离心5~10 min，取上清液-20℃保存待检ICAM-1、IL-12。②10 ml生理盐水注入各组大鼠支气管肺组织内反复抽吸3次，将抽吸的BALF放入离心管中1000转/min离心5~10 min，取上清液-20℃保存待检ICAM-1、IL-12。按照试剂盒说明书检测血清及支气管肺泡灌洗液中ICAM-1、IL-12。
1．3 统计学方法 计量资料均以均数±标准差（x±s）表示，各组数据均用t检验。采用SPSS 10.0统计软件进行分析，以P为差异有统计学意义。
2 结果
蠲哮汤可以减少细胞黏附因子(ICAM-1)的表达，蠲哮汤药物组与正常对照组、哮喘模型组和阳性药物对照组比较差异有统计学意义(P
注：与正常组、哮喘模型组、阳性药物对照组比较,�#P
