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【摘要】目的：建立了解忧软胶囊中刺五加苷E的含量测定方法。方法：采用HPLC法测定，使用Diamonsil C18（4.6mm×250 mm，5μm）色谱柱，流动相：0.1%冰乙酸�乙腈（86:14），流速：1.0ml/min，检测波长：210nm。结果：刺五加苷E在20.10～160.80μg/ml范围内有良好线性关系（r=0.9998），平均回收率为99.35%，RSD=1.1%（n=6）。结论：该法操作简便、准确、重现性好，可用于解忧软胶囊中刺五加苷E的质量控制方法。
【关键词】解忧软胶囊；刺五加苷E；HPLC
中药6类新药解忧软胶囊处方由刺五加、贯叶连翘、五味子、巴戟天等6味中药组成，经不同提取与精制工艺得到的提取物加定量植物油和赋形剂经特殊制剂工艺制成。产品具有抗抑郁、抗忧郁的功效。本实验建立了一种采用HPLC法测定解忧软胶囊中刺五加苷E[1]含量的方法，该方法简便、准确、重现性好。
1仪器与试剂
美国Agilent 1100色谱仪；刺五加苷E对照品(中国生物制品检定所，供含量测定用）；乙腈为色谱纯，其他试剂为分析纯；水为纯化水。
2方法与结果
2.1检测波长的选择
取刺五加苷E对照品适量，加甲醇溶解，在200～400nm波长扫描，结果本品在210.4nm处有最大吸收，故选择210nm作为检测波长。
2.2色谱条件
色谱柱：Diamonsil C18（4.6mm×250 mm，5μm）；流动相：乙腈�0.1%冰乙酸（14:86）；流速：1.0ml/min；检测波长：210nm；进样量：10μl。
2.3对照品溶液的制备
精密称取刺五加苷E对照品10.05mg，置50ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，作为对照品贮备液。精密量取对照品贮备液5ml，置10ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，即得浓度为100.5μg/ml对照品溶液。
2.4供试品溶液的制备
取本品6粒，剪开，置100ml锥形瓶中以少量正己烷洗尽油分,加甲醇50ml，超声30min，放冷，抽滤，滤液回收至干，残渣加2mol/L的H2SO4溶液30ml,沸水浴回流2h，稍冷，加氯仿20ml回流30min,再用氯仿萃取3次,每次20ml，水洗两次,每次30ml，氯仿液回收至干，加甲醇定容至10ml，微孔滤膜滤过，取续滤液，即得。
2.5方法学考察
2.5.1线性关系考察
分别精密量取刺五加苷E对照品贮备液1ml、2ml、4ml、6ml、8ml，置10ml容量瓶中，加甲醇定容至刻度，摇匀，照高效液相色谱法,分别量取10μl 注入液相色谱仪,测定。以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标进行线性回归,方程为Y=30.159X+18.617，r=0.9998。结果表明, 刺五加苷E在20.10～160.80μg/ml范围内呈良好线性关系。
2.5.2精密度试验
取同一样品溶液连续进样6次，测得刺五加苷E的峰面积RSD=1.0%。
2.5.3重复性试验
取同一批解忧软胶囊，按2.4项下的方法操作，平行制备6份样品溶液，依样品测定法测定，计算刺五加苷E的含量，结果RSD=1.5%。
2.5.4稳定性试验
将同一样品溶液室温条件下放置，分别于0、2、4、6、8、12h按上述色谱条件测定样品液峰面积，并计算相对标准偏差。结果RSD=1.5%。表明样品溶液在12h内稳定。
2.5.5回收率试验
采用加样回收法，取已知含量的解忧软胶囊6粒，添加一定量的刺五加苷E对照品溶液，按2.4项下的方法操作，制备成加样回收供试溶液，依样品测定法测定。结果，刺五加苷E的平均回收率为99.35%，RSD=1.1%。
2.6样品测定
取三批样品，按2.4项下的方法操作，制成供试品溶液，在上述色谱条件下，分别精密量取对照品溶液和供试品溶液各10μl注入液相色谱仪，依法测定。结果三批样品含量均符合规定。
3讨论
在测定刺五加苷E含量时，在流动相的选择中，曾比较了不同比列的0.1%冰乙酸�乙腈流动相系统，结果0.1%冰乙酸�乙腈（86:14）分离效果最佳。
通过以上实验测定解忧软胶囊中刺五加苷E的含量，结果表明此方法简便、准确、稳定性与重复性好，可有效控制产品质量。
参考文献
[1] 彭新生, 赵英日, 崔红花. HPLC 法测定刺五加中刺五加苷B的含量[J].实用中西医结合临床, 2006, 3( 6) : 79
[2] 胡广东，胡新海，宋铁兵，刺五加中刺五加苷E的含量测定[J].HEILONGJIANG M EDICINE AND PHARM ACY Oct. 2009, Vol. 32 No. 5
[3] 李晓峰，余威，刺五加苷E含量测定的探讨研究[J].医药与保健：166.
