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[摘要]目的 探讨子宫肌瘤患者子宫不同部位的雌、孕激素受体、表皮细胞生长因子受体的变化情况及相互关系。方法 选择我院2008年1月～2010年12月入院治疗的子宫肌瘤患者50例，手术过程中分别留取子宫肌瘤中的组织（A组）、子宫肌瘤临近的肌层组织（B组）、子宫肌瘤远处（距离肌瘤5cm以上）平滑肌组织（C组）各1份，应用免疫组化法检测各标本中的雌、孕激素受体及表皮生长因子受体的表达情况。结果 三种受体进行组内比较，差异均有统计学意义（P＜0.O5），越靠近瘤体处表达越多。A组增生期和分泌期子宫组织中三种受体的阳性表达情况比较，差异均有统计学意义（P＜0.05）。B组雌激素受体、孕激素受体的表达在增生期和分泌期差异均有统计学意义（P＜0.05）。C组中三种受体在增生期和分泌期均无统计学意义（P＞0.05）。结论 雌、孕激素受体、表皮细胞生长因子受体表达与肿瘤的发生发展有密切关系，离肌瘤越近、越处于肌瘤增生期，三种受体的表达则越多。
[关键词] 子宫肌瘤；表皮细胞生长因子受体；雌激素；孕激素
[中图分类号] R737.33[文献标识码]B [文章编号] 1673-9701（2011）20- 48-02
子宫肌瘤（hysteromyoma）又称为子宫平滑肌瘤，是女性生殖器官中最常见的一种良性肿瘤。患者多数无症状，少数临床表现为阴道出血、腹部可触及肿物以及压迫症状等，严重者可继发不孕，威胁着女性健康[1]。常见多发性子宫肌瘤，单发者少见。若发生蒂扭转时可引起疼痛。本病确切病因尚不清楚，治疗方法主要为激素药物或手术治疗。本研究选择我院2008年1月～2010年12月入院治疗子宫肌瘤的患者50例，手术中取一部分组织，检测其雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）、表皮细胞生长因子受体（EGFR）的表达，分析子宫肌瘤的发生与这些指标的相关性，为临床上应用药物治疗子宫肌瘤提供理论依据，现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料
选择我院2008年1月～2010年12月入院治疗子宫肌瘤的患者50例，年龄30～54岁。患者入选标准[2]：①患者于术前3个月内未使用过任何激素类药物；②子宫肌瘤均经B超及病理证实后确诊。③患者满足子宫肌瘤的手术指征。④患者及家属知情同意。术中分别取子宫肌瘤的组织（A组）、子宫肌瘤临近的肌层组织（B组）、子宫肌瘤远处（距离肌瘤5cm以上）的平滑肌组织（C组）。对患者的子宫内膜病理结果进行分析，其中28例患者处于增生期，22例处于分泌期。
1.2方法
1.2.1术中取组织后进行HE染色手术切除子宫肌瘤后，立即取子宫肌瘤组织、子宫肌瘤临近的肌层组织、子宫肌瘤远处（距离肌瘤5cm以上）平滑肌组织各1份，用10%中性甲醛液固定，石蜡包埋后切厚度为4μm的切片。常规HE染色后用光学显微镜观察组织的病理学形态，依次记录病理诊断结果。
1.2.2采用免疫组化法[3]：检测相应组织中ER、PR、EGFR的表达：①将石蜡切片放入二甲苯溶液中脱蜡、去离子化；再放入乙二胺四乙酸（EDTA）缓冲液中进行抗原高压热修复；将处理后的切片放在实验室中自然冷却。②加入打孔剂室温下洗涤10min；标本放入3%过氧化氢溶液10min，用于封闭内源性过氧化物酶，后用PBS缓冲液洗涤标本3次，每次3min。③向标本中滴入特异性抗体，放入浓度5%的CO2培养箱孵育过夜。④第2天取出标本，再用PBS缓冲液洗涤3次，每次3min。⑤向标本中加入PV9000试剂盒中的大分子通透剂（试剂1），于CO2培养箱37℃孵育0.5h；取出后再用PBS缓冲液洗涤3次，随后加入试剂盒中抗鼠／兔抗体酶复合物（试剂2），于CO2培养箱37℃孵育0.5h；取出后再用PBS缓冲液洗涤3次。⑥用二氨基联苯胺（DAB）控制标本的显色，流水冲洗3h，苏木素染色，封片，放在光学显微镜下观察。
1.2.3光镜下的形态判定标准阳性的雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）应为细胞核或细胞质染色，表现为细胞质或细胞核中有棕黄色颗粒；阳性的表皮细胞生长因子受体（EGFR）细胞为细胞质染色，即表现为细胞质中有棕黄色颗粒。细胞计数：高倍镜（×400）下取5个视野，计数阳性肿瘤细胞数目并计算其占肿瘤细胞数的百分比，阳性细胞数量超过10%时判断为阳性表达。
1.3统计学处理
数据以SPSS13.0统计软件分析处理。计数资料之间的比较采用行×列的χ2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1阳性颗粒定位特点
光学显微镜下观察三组细胞的阳性情况，结果显示，三组细胞均可见三种受体不同程度的表达。其特点分别为：表皮细胞生长因子受体的阳性棕黄色颗粒主要位于细胞膜和细胞质处，染色较弱、分布不均（图1，光镜下放大400倍）。雌、孕激素受体的阳性棕黄色颗粒大部分位于细胞核内，少部分位于细胞质内（图2，光镜下放大200倍）。
2.2三组组织中三种受体的表达情况
见表1。结果显示，三种受体进行组内比较时，差异均有统计学意义（P＜0.05）。雌激素、孕激素受体及表皮生长因子受体在子宫不同部位的组织中表达有差异，越靠近瘤体处表达越多（n为受体阳性表达的标本数）。
2.3三种受体分别在增生期和分泌期的表达情况
见表2。结果显示，A组增生期和分泌期子宫组织中三种受体的阳性表达，差异均有统计学意义（P＜0.05）。B组雌激素受体、孕激素受体的表达在增生期和分泌期差异均有统计学意义（P＜0.05）。C组中三种受体在增生期和分泌期均无差异（P＞0.05）。
3讨论
子宫肌瘤是女性生殖器官中最常见的一种良性肿瘤。它是依赖性激素而存在的良性肿瘤，故其发生发展均与患者卵巢的分泌功能及雌、孕激素的分泌情况有关。雌、孕激素被分泌后再通过细胞内雌、孕激素受体发挥作用。本研究通过检测肌瘤及其周边子宫组织中的雌、孕激素受体、表皮生长因子受体情况，为今后的治疗提供了依据。
本文结果显示，肌瘤组织中、临近肌瘤的肌层组织中、肌瘤外5cm的正常肌层组织中均可见三种受体的表达，但在不同部位表达的程度有所不同；我们用光学显微镜观察三种受体时发现，三种受体均在肌瘤组织中表达最强，临近肌瘤的肌层组织次之，远处正常肌层组织最弱，三种受体的表达均符合以上规律，这就提示子宫肌瘤的生长可能与雌激素受体、孕激素受体、表皮生长因子受体的表达增强有关。Vue等[4]取27例行子宫全切术患者的肌瘤组织标本，应用促性腺激素释放激素激动剂（GnRH-a）治疗半年，结果子宫肌瘤的体积比用药前有明显缩小，同时肌瘤组织中的雌、孕激素受体的阳性表达率也分别下降了50%和40%，提示子宫肌瘤的增大与雌、孕激素的作用密切相关。
另外，Kawaguchi D等[5]指出子宫肌瘤的体积并不是一成不变的，其在卵泡期会缩小、黄体期时又增大，妊娠期时增大速度最快。这是因为雌、孕激素分泌后要通过一些生长因子介导其促细胞有丝分裂的作用，这些生长因子中以表皮细胞生长因子的作用最强。它是由53个氨基酸组成的多肽物质，其生物学活性十分广泛，是人体多种细胞分裂和增殖的必需物质，更能调节体内多种生理功能[6]，其生物学效应是通过与靶细胞的细胞膜及细胞质中的表皮生长细胞因子受体结合来实现的，故其效应能否正常发挥与生长因子受体的数量息息相关。雌、孕激素在人体中常起到互相协同的作用，二者协同能调节生长因子受体的数量，因此，高雌、孕激素就会导致子宫肌瘤的发生和增大。
本文的结果也支持以上论点。表1显示，三种受体进行组内比较时，差异均有统计学意义（P＜0.05）。此结果提示，雌激素、孕激素受体及表皮生长因子受体在子宫不同部位的组织中表达有差异，离肌瘤越近，三种受体的表达越高，提示三种受体相互协同的作用是促进子宫肌瘤发生发展的原因。表2的结果显示，A组增生期和分泌期子宫组织中三种受体的阳性表达差异均有统计学意义（P＜0.05）。B组雌激素、孕激素受体的表达在增生期和分泌期差异均有统计学意义（P＜0.05）。C组中三种受体在增生期和分泌期均无差异（P＞0.05），说明肿瘤增生期三种受体的表达是相当活跃的，分泌期时活跃程度有所下降。
综上所述，子宫肌瘤的发生发展与雌激素、孕激素的分泌及其受体有重要关联，故可应用抗雌、孕激素的药物治疗子宫肌瘤[7]，至于其安全性及有效性仍需进一步探讨。
[参考文献]
[1] 范融，朱兰.子宫肌瘤的药物治疗[J].现代妇产科进展，2008，17（11）：854-856.
[2] 丁勇利，罗喜平.子宫肌瘤患者血清雌孕激素的测定及雌激素受体和孕激素受体在子宫肌瘤的表达及意义[J].临床和实验医学杂志，2008，7（10）：52-53.
[3] 崔莉莉，李佩玲.ER、PR、PCNA在子宫肌瘤组织中的表达及意义[J].中国妇幼保健，2008，23（5）：693-694.
[4] Vue K，Greenspanon DL，Wu TC，et al．Cellular proliferation，estroge receptor， pro―gesterone receptor，and bcl-2 expression in GnRH agonist-treated uterine leiomyomas[J]．Hum Pathol，2008，29（4）：359-363．
[5] Kawaguchi D，Fujii S，Konishi I，et al．Mitotie activity in uterine leiomyoma during themenstrual cycle[J]．Am J Obstet Gynecol，2007，160（3）：637-641．
[6] 宋华 ，白微.子宫肌瘤患者VEGF及雌激素受体的表达情况及意义[J]．中国妇幼保健，2008，23（35）：4997-4998.
[7] 包玲燕，徐海冰.子宫肌瘤治疗的研究[J]．医学综述，2008，14（8）：1199-1202.
（收稿日期：2011-03-09）
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