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摘要：目的：建立补肾养血胶囊的质量控制方法。方法：采用薄层色谱法对处方中红参、赤芍、当归、女贞子、淫羊藿进行了鉴别。结果：斑点清晰，阴性对照无干扰。结论：所建立的薄层色谱鉴别方法可用于补肾养血胶囊的质量控制。
关键词：补肾养血胶囊；红参；赤芍；当归；女贞子；淫羊藿；薄层色谱鉴别
中图分类号：R286.0 文献标识码：A 文章编号：1673-2197(2009)05-0024-03
补肾养血胶囊为我院自制制剂，具有滋补肝肾、益气养血、乌发生发、宁心安神的功效，用于治疗肝肾不足、气血两虚所致疲倦乏力、腰腿酸软、心烦口干、头昏耳鸣、心慌心悸、失眠多梦、头发脱落、须发早白等症。为完善该制剂的质量标准，笔者对方中主要药味红参、赤芍、当归、女贞子、淫羊藿进行了薄层色谱鉴别。
1 仪器与试药
PBQ-I型薄层自动铺板器(重庆南岸力仪器厂)；AE-200型电子天平(天津METTLER公司)；微量进样器(上海医用激光设备厂)；UV-I型三用紫外分析仪(上海顾村电光仪器厂)；HH-S11-2型电热恒温水浴锅(上海跃进医疗器械厂)；KQ250DB型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)。
薄层层析硅胶G(青岛海洋化工集团公司)；羧甲基纤维素钠(国药集团化学试剂有限公司)；D101大孔树脂(天津骨胶厂)；聚酰胺(柱层析用，100～200目，浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂)。人参皂苷Re对照品(0754-200013)、芍药苷(110736-2003)、齐墩果酸(110709-200304)、淫羊藿苷(110737-200312)、当归对照药材(120927-200512)，由中国药品生物制品检定所提供。补肾养血胶囊自制。所用试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 红参、赤芍的薄层色谱鉴别
2.1.1 溶液的制备
供试品溶液：取本品粉末10g，加80％乙醇40mL，回流提取2h。醇提液滤过，置水浴上去乙醇，用水10mL溶解。水溶液加入D101大孔树脂中(φ1cm×20cm)，先用水200mL洗脱，弃去，再用70％乙醇50mL洗脱。收集乙醇洗脱液，置水浴上挥去乙醇，残渣用95％乙醇溶解，并定量转移至5mL量瓶中，摇匀，作为供式品溶液。
对照品溶液：取人参皂苷Re对照品加甲醇制成每1mL含1.20mg的溶液，以及芍药苷对照品加甲醇制成每1mL含1.98 mg的溶液，作为对照品溶液。
阴性对照品溶液：按处方取不含红参及赤芍的其它药味，按成品工艺及上述供试品制备方法，制成阴性对照溶液。
2.1.2 薄层层析
照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB试验)吸取对照品溶液各5μL，供试品溶液、阴性对照溶液各20μL，分别点于同一以0.3％CM(-Na为粘合剂的硅胶H薄层板上，以正丁醇，乙酸乙酯－水(4：1：5)上层为展开剂，展开，取出，晾干。喷10％硫酸乙谆溶液，置烘箱中加热至斑点清晰。
检视：供试品色谱中，在与对照品色谱的相应位置上显相同的蓝紫色斑点(人参皂苷Re)和紫色斑点(芍药苷)。阴性对照无此斑点。
2.2 当归的薄层层析
2.2.1 溶液的制备
供试品溶液：取本品粉末10g，加入乙醇40mL，浸泡4h，超声提取15min，滤过。置水浴上挥尽乙醚，残渣用95％乙醇2mL溶解，摇匀，作为供试品溶液。
对照品溶液：取当归对照药材1g，加甲醇10mL，超声提取30min，滤过，置水浴上浓缩至5mL，作为对照药材溶液。
阴性对照品溶液：按处方取不含当归的其它药味，按成品工艺及上述供试品制备方法，制成阴性对照溶液。
2.2.2 薄层层析
照薄层色谱法(《中国药典》2(05年版一部附录VIB试验)吸取对照药材溶液各5μL，供式品溶液、阴性对照溶液各20μL，分别点于同一以0.3％CMC-Na为粘合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯9：1)为展开剂，展开，取出，晾干。
置365nm紫外灯下检视，在共试品色谱中，在与对照药材色谱相应位置上显相同的两个亮蓝绿色斑点。阴性对照无此斑点。
2.3 女贞子
2.3.1 溶液的制备
供试品溶液：取本品粉末10g，加70％乙醇50mL回流提取2h，滤过，将醇提液挥去溶剂，加盐酸2mL水浴回流1.5h，滤过。滤液移入分液漏斗中，用石油醚(60℃～90℃)萃取3次，每次15mL。蒸干石油醚萃取液，用95％乙醇溶解，并定量转移至5mL量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。
对照品溶液：齐墩果酸对照品，加甲醇制成每1mL含0.85mg的溶液，作为对照品溶液。
阴性对照品溶液：按处方取不含女贞子的其它粉末，按成品工艺及上述供试品制备方法，制成阴性对照溶液。
2.3.2 薄层层析
照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部附录VIB试验)吸取对照品溶液10μL，供试品溶液、阴性对照溶液各20μL，分别点于同一以0.3％CMC-Na为粘合剂的硅胶H薄层板上，以氯仿一甲醇(40：1)为展开剂，展开，取出，晾干。喷10％硫酸乙醇溶液，置烘箱中加热至斑点清晰。
检视：供试品色谱中，在与对照品色谱相对应位置上显相同的紫红色斑点。阴性对照无此斑点。
2.4淫羊藿
2.4.1 溶液的制备
供试品溶液：取本品粉末10g，加70％乙醇50mL回流提取2h，将醇提液滤过，蒸干，加水20mL溶解，用水饱和正丁醇萃取3次，每次20mL，合并正丁醇萃取液，蒸干。用20％乙醇20mL溶解，加入聚酰胺中(φ1cm×20cm，干粉装柱，100～200目)。先用水洗脱100mL，弃去，再用90％乙醇洗脱50mL，蒸干乙醇洗脱液，残渣用95％乙醇溶解，并定量转移至5mL量瓶中，摇匀，作为供试品溶液。
对照品溶液：取淫羊藿苷对照品加甲醇制成每1mL含0.80mg的溶液，作为对照品溶液。
阴性对照品溶液：按处方取不含淫羊藿的其他药味，按成品工艺及上述供试品制备方法，制成阴性对照溶液。
2.4.2 薄层层析
照薄层色谱法(《中国药典~2005年版一部附录VIB试验)吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各20μL，分别点于同一以0.3％CMC-Na为粘合剂的硅胶H薄层板上，以乙酸乙脂-丁酮-甲酸-水(10：1：1：1)为展开剂，展开，取出，晾干。喷2％三氯化铁乙醇溶液，置烘箱中加热至斑点清晰。
检视：供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上显相同的草绿色斑点，阴性对照无此斑点。
3 讨论
(1)在红参、赤芍的薄层鉴别试验中，红参选人参皂苷Re为对照品，赤芍选芍药苷为对照品。人参皂苷Re与芍药苷极性相近，不易分开，选择在同一薄层板上同时进行分离鉴定，这样，供试品的处理净化就很重要，可以排除杂质干扰，使薄层色谱斑点清晰。经系统试验，供试品前处理方法有：①乙醇提取－正丁醇分离法；②乙醇提取－大孔树脂分离法。两种方法制样的分离效果都较好，但以方法②效果更好。展开剂选择，从①正丁醇－乙酸乙酯－水(4：1：5)上层、②氯仿－甲醇－水(13:7:2)下层中选择展开剂①，效果好。本文所选2方法，能在同一薄层板上同时鉴别红参、赤芍，斑点清晰，阴性无干扰。
(2)淫羊藿供试品的前处理纯化方法，按照比较思路，从乙醇提取―大孔树脂分离法与乙醇提取－正丁醇萃取－聚酰胺柱层析法中选用后者，分离效果好，薄层板选用硅胶H板比硅胶G板效果好，斑点清晰，阴性无干扰。
(3)女贞子的薄层鉴别展开系统，经试验比较，从氯仿－甲醇(40：1)与环己烷－丙酮－乙酸乙酯(5：2：1)中选用后者，分离效果好，R，值适中。
本文所选薄层鉴别方法鉴别以上几味药材，操作简便，重现生好，结果准确、可靠，能为质量标准提供依据。
责任编辑 曾楚华
