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【摘要】 目的 探讨过敏性紫癜患儿血小板膜糖蛋白Ⅱb、Ⅲa及sICAM-1表达量的变化及其临床意义。方法 以单克隆抗体为探针，采用流式细胞仪检测52例过敏性紫癜患者血小板膜表面糖蛋白(Ⅱb,CD41)、血小板颗粒膜糖蛋白(Ⅲa,CD62P)的表达水平；同时采用ELISA法检测可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)在不同病期和分型时的表达水平。结果 过敏性紫癜患儿急性期Ⅲa及sICAM-1表达水平明显高于缓解期和对照组，差异有统计学意义，Ⅱb表达水平无明显变化。紫癜肾炎型Ⅱb、Ⅲa及sICAM-1表达水平与混合型比较，差异无统计学意义。紫癜肾炎型及混合型与单纯皮肤型比较，Ⅲa及sICAM-1高于后者，差异有统计学意义。结论 过敏性紫癜患儿存在血小板活化,其与过敏性紫癜病程变化关系密切。�
【关键词】过敏性紫癜；血小板膜糖蛋白类；sICAM-1
Expression and significance of phtelet membrane glycoproteins and intercellular adhesion molecules-1 in patients with anaphylactoid purpura
ZHANG Hong-xia，LIU Fang’e，LIU Xue-mei，et al.Qilu Children Hospital affiliated of Shandong university.Jinan 250022,China
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【Abstract】 Objective To investigate the expression and significance of platelet membrane glycoproteins and intercellular adhesion molecules-1 in patients with anaphylactoid purpura．Methods Fifty-two patients with anaphylactoid purpura were divided into three groups according to their clinical manifestations．16 in dermal purpura group，20 in mixed group and 16 in nephritis group．The expression ofⅡb and Ⅲa in these 52 patients was detected by flow cytometry．The level of intercellular adhesion molecules-1 was analysed by ELISA with monoclonal antibody as the probe． Results The percentage of Ⅲa and ICAM-1 in patients in acute phase were significantly higher than those in regressive phase and those in normal control．Neither of the expression of Ⅱb and Ⅲa nor the level of ICAM-1 in nephritis group was significantly different from that in the mixed group． Compared with dermal purpura group,the percentage of CD62P and ICAM-1 was significantly higher in the nephritis group and mixed group．There was no significant difference in Ⅱb expression among all groups． Conclusion The activation of platelet could be closely related to the progress of anaphylactoid purpura．�
【Key words】Anaphylactoidpurpura；Platelet membrane glycoproteins；Intercellular adhesion molecules-1
过敏性紫癜是一种较常见的血管变态反应性、出血性疾病，基本病变是广泛的毛细血管和小动脉无菌性炎症，累及皮肤、胃肠、关节和肾脏等，引起相应的临床表现。临床特点为皮肤紫癜，或(和)伴腹痛、关节痛、肾脏病变。免疫功能紊乱及血小板活化与本病关系密切。本研究采用流式细胞仪及
ELISA法检测50例过敏性紫癜患儿血小板表面膜糖蛋白(CD41,Ⅱb)、血小板的颗粒膜糖蛋白(CD62P,Ⅲa)和可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)在不同病期和分型时的表达水平。
1 对象与方法
1．1 对象 52例过敏性紫癜患儿为2004年12月至2007年12月本院门诊和住院患者。均为第1次就诊，其中男25例，女20例；病程5 d至8周．平均(13．3±7．5)d。过敏性紫癜的诊断标准参照1990年美国风湿病协会制定的标准[1]。所有患者均无血小板减少性紫癜，血小板计数在正常范围。依据病期分为急性期28例(急性期指起病后1个月以内)，其中男15例，女13例；年龄4~12岁，平均(7．9±2．6)岁；病程1周~2月;缓解期24例(缓解期患儿指经过综合治疗1个月后临术表现全部消失者)，其中男14例，女8例；年龄3岁~11岁，平均(7．3±2．2)岁。根据临床表现把患者分为单纯皮肤型16例、混合型(皮肤+关节+消化道症状)20例和紫癜肾炎型16例。其中关节症状表现为关节肿痛或关节周围软组织肿胀：消化道症状表现为腹痛、黑便或便血；紫癜肾炎表现为肉眼血尿或镜下血尿伴或不伴有蛋白尿。缓解期的标准为皮疹消退，临床症状体征消失。另设30例健康儿童为正常对照组，其中男16例，女14例；年龄3~11岁，平均(6．9±2．1)岁。既往无肾脏疾病史，无变态反应性疾病，所有受检对象采血前2周均未服用激素、阿斯匹林等影响血小板的药物，对照组年龄、性别与患者组匹配。
1．2 血小板膜糖蛋白Ⅱb、Ⅲa及sICAM-1检测方法 采用流式细胞仪检测，流式细胞仪购自德国PAR-OPARPEC公司，CD41a、CD61、CD62P购自美国BD公司。取0．2 ml枸橼酸钠抗凝加外周静脉血1．8 ml,1 h 内送检,混匀取5μl分别加荧光标记单克隆抗体FITC-CD41、CD62P 20μl,两管与对照管均加PE-CD61抗体20μl 振荡器混匀,在25 ℃室温避光孵育20 min后,加预冷的 1%多聚甲醛1 ml震荡混匀,置于4℃冰箱避光孵育20 min,然后在流式细胞仪上检测。每项检测计数10�4个以上的血小板，测得血小板的阳性百分数，读出其百分数含量。sICAM-1采用酶联免疫吸附法(ELISA)定量检测。ICAM-1含量的检测严格按试剂盒说明书操作，根据测得的A值计算各样本含量。
1．3 所有检测结果用均值±标准差(x±s)表示，SPSS11．0软件包分析数据，组间数据检验采用t检验进行统计学处理。
2 结果
2．1 不同病期过敏性紫癜Ⅱb、Ⅲa及sICAM-1的表达水平比较 过敏性紫癜急性期Ⅲa及sICAM-1表达水平明显高于缓解期和对照组，差异有统计学意义(均P0．05，�表1�)。
2．2 不同临床表现过敏性紫癜患儿Ⅱb、Ⅲa及sICAM-1的表达水平比较
混合型与紫癜肾炎型比较Ⅱb、Ⅲa及sICAM-1表达水平均无明显变化，差异无统计学意义(P>0．05)。混合型及紫癜肾炎型与单纯皮肤型比较，Ⅲa阳性百分数均明显高于后者，差异有统计学意义(P[2]的研究结果基本一致。Ⅲa表达增高说明过敏性紫癜发病过程中存在着高度血小板活化，且伴有内脏损害的患者血小板活化率更高，表达水平变化与患者临床症状及过程相符。�
sICAM-1是表达于内皮细胞和其抗原递呈细胞表面上的细胞间黏附分子-1(ICAM-1)脱落后于血液中的可溶形式，属于细胞黏附分子的免疫球蛋白超家族成员，是一种表面跨膜蛋白抗原[3]。 ICAM-1是一种重要的细胞表面黏附分子，可与多种细胞表面成分结合，如淋巴细胞功能相关抗原-1(LFA-1)，介导淋巴细胞间、白细胞与内皮细胞间的黏附，参与各种生理和病理过程。ICAM-1是一种细胞因子诱导表达的糖蛋白，正常情况下很少表达，TNF、IL-1、干扰素(IFN-γ)等刺激可使内皮细胞和抗原递呈细胞高表达ICAM-1。sICAM-1的量与细胞表面ICAM-1的分子数量呈正比，测定sICAM-1的浓度可间接反映内皮细胞和抗原递呈细胞表面ICAM-1的表达量。研究结果表明：过敏性紫癜急性期sICAM-1表达水平明显高于缓解期和对照组，混合型及紫癜肾炎型与单纯皮肤型比较；sICAM-1的表达水平明显高于后者,差异有统计学意义。因此检测血清sICAM-1水平也有助于评价患儿的严重程度，说明患者血管内皮细胞和抗原递呈细胞表面表达ICAM-1增多，白细胞通过ICAM-1与血管内皮细胞结合，黏附浸润的白细胞活化后释放多种酶，溶解破坏内皮细胞，而且释放细胞因子，由此构成恶性循环，促使血管内皮损伤、功能恶化的进行性发展。�
参考文献
［1］ 胡亚美，江栽芳．实用儿科学．人民卫生出版社，2002：689．
［2］ 周文斌.欧阳艳琼.流式细胞术检测过敏性紫癜患儿血小板活化状态的研究．临床儿科杂志,2002,(10)：631-632.
［3］ 唐可京，谢灿茂，李幼姬．细胞间黏附分子-1和血管细胞间黏附分子-1的结构与功能．细胞与分子免疫学杂志，2002，18(2)：193-195.
