【粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子联合骨髓间充质干细胞对高氧暴露新生大鼠肺损伤的干预作用】粒细胞巨噬细胞集落刺激因子

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  [摘要]目的探讨重组鼠粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte macrophage-colony stimulat-ing faetor・CM-CSF)联合大鼠骨髓来源的间充质干细胞(mesenchyreal stem cells,MSCs)对高氧暴露新生大鼠肺损伤的影响。方法采用贴壁选择法分离、培养、扩增大鼠骨髓来源MSCs,并以4",6二脒基-2-苯吲哚(4",6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)进行标记,注射前以PRS按要求剂量予以稀释;3日龄清洁级SD新生大鼠32只,置于95%氧环境下7d后,随机(随机数字法)分为4组,每组8只;高氧+GM-CSF组+MSCs组(A),高氧+CM-CSF组(B),高氧+MSCs组(C),高氧对照组(D);A,B组大鼠于模型结束后皮下注射GM-CSF 9μg/kg,A组同时还予腹腔注射5×104MSCs;C组予模型后腹腔注射5×104MSCs,D组仅注射相同容积的PBS,于注射后72h(13日龄)处死全部动物,肺组织病理学检测辐射状肺泡计数(radical alveolar counts,RAC);ELASA法检测肺组织匀浆TNF-a,IL-1β含量;免疫组化检测肺组织端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transrip tase,TERT)积分;荧光显微镜观察DAPI阳性细胞分布情况。结果(1)网组在RAC(P<0.01)、肺组织匀浆TNFα(P<0.01),lL-1β(P<0.01)水平等方而差异均有统计学意义;与D组相比,A,B,C三组RAC值增加(P<0.05),TNF-α,IL-1β水平下降(P<0.05);A组与B、A组与C组差异也均有统计学意义(P<0.05)。(2)四组在TERT积分差异也有统计学意义(P<0.01);A,B组明显增高(P<0.05);而C,D两组间差异均无统计学意义(P>0.05)。(3)免疫荧光显微镜下A,C组可见DAPI阳性细胞,分别为(6.23±1.88),(5.10±0.91)(P<0.05)。结论GM-CSF、MSCs对高氧暴露可引致新生大鼠肺损伤均具有保护作用,涉及多种作用机制,联合治疗具有协同作用。
  [关键词]粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子;高氧;新生;骨髓间充质干细胞

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