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[摘要] 目的调查健康体检人群血清HbsAg携带情况。方法采用ELISA及化学发光微粒子免疫分析方法对HBV慢性感染者557份高浓度HBsAg(高浓度HBsAg组)和25份低浓度HB.sAg(低浓度HBsAg组)血清标本进行HBV血清标志物检测。结果9841份血清标本中,ELISA共检出557份A630 nm/A450 nm>2.00,25份0.06~ [关键词] 乙型肝炎;肝炎表面抗原
[中图分类号]R195.4 [文献标识码]A [文章编号] 1672-4208(2010)21-0043-03
HBsAg是病毒外膜的主要组成蛋白,一直是HBV感染最主要的血清学检测指标。HBsAg阳性通常意味着HBV现症感染的存在,如持续阳性时间>6个月,则提示进展为慢性HBV感染。临床上常采用ELISA法检测HBV血清标志物,包括HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe和抗-HBc,此方法检测设备要求低、操作简便,适合于各类临床实验室,但不足之处是检测敏感性较低,且检测存在较大的灰区,尤其是在检测健康人群时,存在大量不确定结果。笔者对健康体检人群血清HbsAg携带情况进行了调查,报道如下。
1 材料与方法
1.1 标本来源收集标本来自2009年6月～2010年7月到疗养院体检的航天部上海第八研究院职工及其他企业单位管理人员和雇员,共9841名,男6593名,女3248名。
1.2 仪器及试剂HBV血清标志物定性检测使用上海华泰生物工程实业有限公司的ELISA试剂盒(批号201001011),检测仪器使用BioTek―ELX800酶标仪、BioTekELX50洗板机、北京双和盛源SH-2(A)微孔板脱水仪;HBV血清标志物定量检测使用美国雅培公司的i2000SR化学发光微粒子免疫分析仪及专用检测试剂。
1.3 检测方法晨起空腹肘静脉采血4 TIll,离心分离血清,ELISA检测HBV血清标志物。ELISA检测HBsAg的吸光度(A)值,临界值A630 nm/A450 nm=0.105。江苏省无锡市临床检验中心规定灰区不小于O.8x临界值～3.0x临界值。根据本实验室情况,确定灰区A630 nm/A450 nm=0.060-0.350。所有血清标本均采用双孔复查,取3次检测平均值为最终的检测结果。如果血清HB.sAg的A630 nm/A450 nln在O.06―2.00之间,使用定量试剂(临界值50 U/L)复查HBsAg;若体检者既往有乙型肝炎病史,而检测A630 nm/A450 nm2.00;(2)血清ELISA测定0.06≤A630 nm/A450 nm50 U/L或中和确认实验阳性;(3)ELISA测定A630 nm/A450 nm50 U/L。
2 结果
2.1 HBsAg测定结果9841份血清标本中,ELISA共检出557份A630 nm/A450 nm>2.00,25份0.06≤A630 nm/A450 nm≤2.00,阴性对照A630 nm/A450 nm2.00)血清标志物模式分布以模式2、3、6最常见,占97.7%(544/557);低浓度HBsAg组(0.06 2.3 不常见模式复检结果HBsAg与抗一HBs同时阳性的3名体检者,经寻访均有5年以上的乙型肝炎病史,其中2例有临床治疗史。在HBV感染自然恢复的早期,HBsAg浓度逐渐降低,抗-HBs滴度逐渐增高,可能出现抗原、抗体同时存在的现象,尤其在使用较高敏感度的试剂进行检测时,nbsAg/抗-HBs同时阳性的情况较为多见,对这种少见的血清学模式常需要随访确证。如患者在一段时间后逐渐转变为HBgAg阴性/抗-HBs阳性,则可确定患者处于恢复期,如抗原、抗体长期同时存在,则可能为不同型病毒的再感染,需要进行HBV―DNA检测结合基因序列分析进行确认。
3 讨论
在此次调查的9841名体检者中,共检出582名HBsAg阳性携带者,HBsAg阳性携带率为5.92%,由于他们大部分生活水平高、从事工作比较轻松愉快,检出率低于全国的平均水平7.18%。在此次的调查中,检测到3名体检者hbaAg抗-HBs同时阳性,说明在慢性乙型肝炎患者体内,HBV长期处在机体细胞免疫压力下,部分或全部毒株发生了变异,机体原有抗体不能有效中和变异抗原所致;另外一种可能就是不同亚型的HBsAg同时或再次感染,也是HbsAg/抗-HBs共存的原因之一。
在健康体检人群中,确实存在一些不常见的标志物模式,实验室应采取进一步的验证措施,以尽量减少误诊。
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