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【摘要】 目的 掌握自由基损伤的足迹与疾病的关系，从而帮助临床诊断疾病。方法 用末梢血制成干血片和活血片，检查自由基损伤的足迹。结果 通过500例患者的检查，诊断率达到90%以上，适应健康筛查、疾病诊断和疾病的早期提示。结论 本法符合率高，适用于临床疾病诊断和疾病早期提示；健康普查。
【关键词】 多功能显微分析仪；自由基损伤的足迹；疾病诊断
作者单位：136000 吉林省脑科医院检验科
自由基损伤的足迹检查包括活血检查和干血检查两部分。活血检查是以血液细胞形态学为基础。研究自由基对血细胞造成的氧毒性损害。干血检查专门研究自由基损害在干燥血滴上形成的足迹图形检查。活血检查是在细胞、亚细胞水平（微观）了解自由基造成的损伤情况。干血检查是在系统器官水平（宏观）研究自由基损伤的足迹，与疾病的关系。一滴血的检查不仅能满足医学临床的常规检查，在健康筛查、疾病诊断和疾病的早期提示都有很大意义，是一种简单、快捷、经济有效、可靠、实用的疾病和人体机能早期预警的有效的手段。放大3万倍，明、暗视野、相差三种观察方式。形象直观，直接观察活体细胞，标本无需染色、培养，不会造成信息丢失。
1 材料和仪器
1.1 玻片和盖玻片 载玻片、盖玻片本身的质量及在使用前的处理情况直接影响检查结果，必须注意：厚度以1 mm为宜。应该挑平坦光滑，无划痕、无裂隙、无缺损的使用。
1.2 采血针 采用一次性弹簧采血针。
1.3 仪器 多功能显微分析仪
2 制片
原则上，血液标本都不作任何加工，尤其不能制成切片或化学染色。因为这将：杀死被检查的细胞；组织收缩，结构关系改变；组织变性。导致看到的已不再是本来病变细胞的真实面目。
2.1 自由基损伤的足迹检查片（干血片）制片 指尖被采血针刺破后涌出的血滴应在指尖站立20～30 s，以便有形成分下沉和必要的生理变化可以继续。检验人员右手拇指、食指持玻片边缘外侧，左手握住受检者的手指，依玻片自身重量垂直下落，与皮肤接触后立即垂直抬起，并在水平相距0.1～1.0 cm处用同样方法重新采集下一滴血滴标本，如此重复5～7次，以血滴用完为止。血片制作完成后，将血片血滴面朝上置于托盘内，待自然干燥后检查。
2.2 血液有形成分检查片（活血片）制片 用消毒后的干棉签擦去指尖残血，在绝对不与皮肤接触的前提下，用玻片自上而下轻沾血滴一次，已取得直径3～4 mm的血滴为宜，立即加盖玻片，用金属棒轻敲血液积聚点，使之均匀散开，并驱散气泡，以透过玻片能看清报纸小字为佳。制好的活血片必须立即在镜下观察，如在5 min内尚未检查血小板凝集和纤维蛋白网情况，则应重新采取活血标本。
3 活血片检查
3.1 血小板形态学观察 当活血片制好后，在5 min内进行分析。观察血小板数量、大小形态，有无聚集、有无病理变化等。
3.1.1 血小板聚集 见于血液凝固增强性疾病。更大的聚集则见于原发性或继发性血小板增多，脾切除后，骨髓增生性疾病等。
3.1.2 血小板过度分散：表示黏附、凝集功能障碍。常见于再障、原发性或继发性血小板功能障碍。
3.1.3 针状血小板 常见于肝脏疾病。
3.2 红细胞数量及形态 观察红细胞形态特点有无缗钱状排列，有无凝集，有无泪滴样红细胞或柠檬样红细胞等。
3.2.1 红细胞呈缗钱状排列，血液粘滞性增高，常造成缺氧状态，肢体发绀，头昏、乏力、嗜睡，并为血栓造成隐患。
3.2.2 红细胞凝集：其临床意义远比缗钱状严重，占红细胞总数6%有临床意义。
3.2.3 泪滴样红细胞 当其细胞>2%时，有临床意义。在骨髓纤维化、海洋性贫血、缺铁性贫血、恶性肿瘤或白血病中都可以见到，内分泌性疾病等。
3.3 白细胞数量和形态的观察 主要观察白细胞数量多少、活动度、活化程度、有无中毒颗粒、空泡等。
3.3.1 白细胞数量 增加见于细菌性感染，特别是引起化脓性感染，慢性粒细胞性白血病等。减少见于再障、恶性贫血、化学毒物和物理因素、过敏和免疫性白细胞减少。
3.3.2 嗜酸性粒细胞增多：常见于变态反应性疾病、皮肤病、寄生虫和原虫感染、细菌感染、血液病等。减少见于伤寒和副伤寒。
3.3.3 淋巴细胞增多：见于一些传染病、急性感染病的恢复期、甲状腺功能亢进、淋巴细胞白血病及淋巴瘤、病毒感染等。减少见于传染病的急性期、放射病、细胞免疫缺陷病。
3.3.4 单核细胞增多常见于结核、疟疾、黑热病和一些血液病、急性传染病的恢复期。
3.4 活血片中其他有形成分的观察：在血片中除了观察各种细胞外，还可以观察脂质斑块、硬化斑块、动脉内皮、胆固醇结晶、尿酸结晶及血脂的情况。
3.4.1 尿酸结晶在暗视野为明亮结晶，明视野为黑色，大小不一，分布均匀，见于痛风，轻微为关节炎。
3.4.2 硬化斑块 镜下见到硬化斑块，是动脉硬化表现。
3.4.3 动脉内皮 均质、大片、薄而半透明的片状物，边缘有皱褶或重叠。易造成栓塞。
4 干血片检查（自由基损伤的足迹检查）
4.1 干血片上各血滴的意义第一、第二滴表示急性、亚急性病变或突发的急性病变（最近的病变表现）。第三、第四滴表示病情牵延或亚急性阶段，或已开始缓解、趋向慢性；若干慢性器官病变、特别一些亚健康现象多表现在此（过去1-2年病变表现）。第五、第六滴表示长期、慢性过程，大部属亚健康或一些病态（过去3年以上的病变表现）。
4.2 常见自由基损伤的足迹ROTS块与疾病关系。
ROTS块大，不规则，不相连，为炎症反应。ROTS块特亮而小，呈现石榴子样，为肾结石或胆结石。ROTS呈现“非”字形，为肾囊肿或其他囊肿。呈现小葫芦样，为子宫肌瘤。呈现“C"字形，为关节病变。呈现圆形，边缘呈. 锯齿状，为痔疮。呈现条形块，为息肉或胆囊息肉。短的黑色线条，为肢体损伤。长的黑白的线条，为腰肌劳 损。血滴外圈锐性凸起，内有黑核，为肩周炎。颈椎病无黑核。呈现钝性凸起，面积大，（内有或无黑核），为脑梗死或脑出血。
5 结论
通过对500例患者的检查，证明MAI采取标本最少，给患者造成的痛苦小，检查项目多，对肩周炎、高血压、高血脂、结石、囊肿、息肉、痔疮、肠炎、肢体损伤等有诊断意义。其中500例中，有1例家族性肾囊肿。有1例肾癌。14例痔疮，5例子宫肌瘤，3例肢体损伤等。证实此检查符合率达到90%以上。
6 活血片制备质量的保证
活血标本的采集、制作及观察是至关重要的，是细胞形态学检查的基础和成败的关键。
