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[摘要] 目的 探讨自身抗体在自身免疫性肝炎患者的诊断意义。方法 116例分为三组:自身免疫性肝炎(AIH)组31例,包括自身免疫性肝炎18例、原发性胆汁性肝硬化(PBC)10例、原发性硬化性胆管炎(PSC)3例;病毒性肝炎组60例;不明原因肝损伤组25例。分别用间接免疫荧光法、免疫印迹法检测抗核抗体(ANA);LKM-1:抗肝肾微粒体细胞色素P450IID6抗体;SLA/LP:抗可溶性肝抗原/抗肝胰抗原抗体;SMA:抗平滑肌抗体;AMA-M2:抗线粒体抗体。结果 抗SLA/LP抗体在AIH患者血清中的阳性率为44.4%,明显高于LKM(16.7%)、AMA-M2(22.2%)抗体,并且在病毒性肝炎患者血清中呈阴性反应。抗AMA-M2抗体在PBC患者血清中的阳性率为90.0%,抗gp-210抗体在PBC患者血清中阳性率为40.0%。结论 抗SLA/LP抗体对AIH具有特异性,AMA-M2抗体对PBC的诊断具有特异性,所以自身抗体的检测将有助于自身免疫性肝炎患者的诊断及治疗。
[关键词] 自身免疫性肝病;间接免疫荧光法;免疫印迹法
[中图分类号] R446.62[文献标识码] A[文章编号] 1673-9701(2010)02-87-02
自身免疫性肝炎(AIH)是一组病因不明、伴有明显的自身免疫现象、以炎症性坏死为主要病理改变的慢性肝脏疾病,主要包括自身免疫性肝炎(AIH)、原发性胆汁性肝硬化(PBC)、原发性硬化性胆管炎(PSC)[1]。目前缺乏明确的诊断标准,而自身抗体的检测对此类疾病的诊断有重要意义。我们对116例免疫球蛋白、肝功能生化指标持续异常的各类肝病患者用间接免疫荧光法检测抗核抗体(ANA),免疫印迹法检测肝抗原自身抗体,探讨此类自身抗体在自身免疫性肝病中的临床意义。
1材料与方法
1.1研究对象
将2007年10月～2009年9月间来我院门诊及住院治疗的116例患者分为三组:①自身免疫性肝病组:参照国际自身免疫肝炎修订的评分标准,患者经肝穿病理检查证实分为AIH 18例,PBC 10例,PSC 3例。②病毒性肝炎组:包括20例甲型肝炎(HAV)、20例乙型肝炎(HBV)、20例丙型肝炎(HCV)。③原因不明肝损伤组25例(该组患者长期肝功能异常、各类病毒性肝炎指标阴性,但未做肝穿病理检查)。随机收集20例健康体检人员为正常对照。
1.2间接免疫荧光法(IIF)检测ANA
基质选用HEP-2细胞,试剂由德国欧蒙医学实验诊断实验股份公司提供。抽取患者空腹外周血,取10μL血清(1�100稀释)滴加在抗原基质片上,置25℃孵育30min,PBS(PH 7.2)洗片,滴加异硫氰酸荧光素(FITC)标记抗体30min洗片,荧光显微镜观察结果,血清稀释度>1�100时组织或细胞内出现特异性的荧光判为阳性。
1.3免疫印迹法检测肝抗原自身抗体
肝抗原自身抗体包括LKM-1:抗肝肾微粒体细胞色素P450IID6抗体;SLA/LP:抗可溶性肝抗原/抗肝胰抗原抗体;SMA:抗平滑肌抗体;AMA-M2:抗线粒体抗体;gp-210抗体:将血清10μL加入1mL稀释液中与膜反应室温平摇30min,洗膜后加酶标记抗人IgG,室温平摇30min,洗膜后加显色平摇10min,用蒸馏水终止反应,用标准对照条带图观察特定区域条带,见清晰的强着色带判为阳性。
1.4ELISA法检测各类病毒性肝炎
抗HAV-IgM、HBsAg、抗HCV试剂盒由上海科华实业有限公司提供[2]。
2结果
2.1ANA的检出情况
在间接免疫荧光法检测中,自身免疫性肝病组、各类病毒性肝炎组、不明原因肝功损伤组及正常对照组的阳性率分别为58.1%、10%、24%及0。经χ2检验,自身免疫性肝炎组与各组之间显著性差异(P
