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【摘要】 目的 澄清剂用于玄冬颗粒的澄清工艺。方法 比较了澄清剂与乙醇对口服液的主要成分含量的差异。结果 澄清剂用于中药提取液的澄清在主要成分含量较乙醇有所提高。结论 在中药提取液的澄清工艺中可用澄清剂替代乙醇。
【关键词】澄清剂;工艺;含量测定
Study on Clearing Process inJixueteng Penyan Keli
XIE Jing,YANG Hong-tu,CHANG Cui,et al.Department of Pharmacy,the Second Clinical Medicin College of Jinan University, and the People’s Hospital of Shenzhen City.Shenzhen 518020,China
【Abstract】 Objective To use clarification agent in clearing process of Xuan Dong Keli.MethodsTo compare clarification agent with alcohol by measuring quantitative analyses of paeoniflorin.ResultsIt was shown that main components quantity of koufuyeusing calrification agent were higher than that alcohol did.Conclusion Clarification agent can be used to clear herbal extract instead of alcohol.
【Key words】Clarificatin agent; Preparation technology; Content determination
作者单位:518020暨南大学第二临床医学院/深圳市人民医院药学部
玄冬颗粒由金银花、玄参、麦冬、天冬、甘草等中药组成,是在临床应用多年的医院制剂。玄冬颗粒具有清热养阴,解毒散结的功效。临床主要用于慢性咽喉炎及咽喉干痛等症。通常工艺采用水提醇沉工艺制备。本实验分别用ZTC1+1天然澄清剂、乙醇对其水提液作澄清处理,以处方中主药金银花所含成分绿原酸为指标,进行含量比较,并以正交设计法优选ZTC1+1天然澄清剂的最佳澄清工艺。
1 药品、试剂和仪器
中药材购自深圳市药材公司;绿原酸对照品购于中国药品生物制品检定所;ZTC1+1天然澄清剂购于天津正天成澄清技术有限公司;所用试剂均为AR。
仪器:LC-10A高效液相色谱仪(日本岛津),SPD-10AV紫外-可见光分光光度检测器(日本岛津),色谱柱:Sperisorb C18 5 μm 4.6 mm×250 mm(大连化物所),KromasilC18 柱(F4.6×200 mm,5 mm)。
2 绿原酸的含量测定方法[1]
2.1 色谱条件 色谱柱为WondasiC18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相:甲醇-水-冰醋酸(20:80:1);流速为1.0 ml/min;柱温:25℃;紫外检测波长:327 nm;进样量:20 μl。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液 精密称取绿原酸对照品9.25 mg置于100 ml棕色容量瓶中,加50%甲醇溶解至刻度,制成1 ml含92.5 μg的绿原酸贮备液,摇匀,精密量取上述溶液2~5 ml量瓶中用50%甲醇稀释至刻度,摇匀,即为对照品溶液(2℃~8℃保存)。
2.2.2 供试品溶液 精密量取玄参药液供试品2~25 ml容量瓶中,加50%甲醇定容至刻度,摇匀,用0.45 μm微孔滤膜滤过,取续滤液,即得。
2.2.3 阴性对照溶液 按照玄参药液的制备工艺制备不含金银花的样品,按2.2.2项下的方法制成阴性对照溶液。
2.3 线性关系的考察 精密量取绿原酸对照品储备液1.0、2.0、4.0、8.0、16 ml分别至25 ml容量瓶中,加50%甲醇稀释至刻度,再分别精密吸取该对照品溶液各20 μl,按2.1色谱条件进样,测定绿原酸峰面积。以绿原酸进样量(X)为横坐标,以峰面积(Y)为纵坐标绘制标准曲线,其回归方程为Y=3045283X-15789,r=0.9993,线性范围:0.074~1.184 μg。
2.4 精密度考察 取供试品溶液,重复进样6次,测定峰面积积分值的RSD为0.4%(n=6),表明精密度良好。
2.5 回收率实验 采用加样回收法取样品6份,精密加入绿原酸对照品溶液适量,测定峰面积积分值的RSD为0.8%(n=6),表明重现性良好。
2.6 稳定性试验 对同一供试品溶液分别在0、2.5、5、8、11、15、16 h进样测定,其峰面积积分值的RSD为0.4%。从结果可以看出,供试品溶液在室温下放置16 h内稳定。
2.7 空白试验 以缺金银花药材的空白样品按同样条件提取及测定,结果在与绿原酸相同位置无色谱峰出现。表明阴性对照试验对本品的测定无干扰。
2.8 样品含量测定 分别吸取样品,按以“2.2.2”方法制备,分别吸取供试品溶液及对照品溶液各20 μl注入液相色谱仪中,测定峰面积,按外标法计算含量。
3 不同澄清液澄清工艺的比较
取处方水提液10 ml(相当含金银花2 g)各3份,按下述方法分别处理:1号工艺:40%乙醇沉淀,过滤,滤液水浴挥干;2号工艺:加热至60℃,按ZTC1+1天然澄清剂溶液5B:3A的比例先加入组分B搅拌使其均匀分散再加入组分A沉淀,过滤,滤液水浴挥干;3号工艺:未经任何澄清处理,直接水浴挥干。分别测定绿原酸含量,结果为1号为471.23 μg/ml、2号为528.36 μg/ml、3号为563.25 μg/ml。
4 均匀设计优选ZTC1+1天然澄清剂最佳澄清工艺
4.1 均匀设计因素和结果 根据ZTC1+1天然澄清剂本身的特点以及实际应用的情况,确定影响澄清效果的相关因素:ZTC1+1天然澄清剂加入量(A)、药液浓度(B)、药液的pH值(C)、绿原酸含量(Y),使用均匀设计表U7(76),因素和结果见表1。
表1
均匀试验因素和结果
编号
因素
A澄清剂量B药液浓度C药液的pH值
Y含量
11.01.754.67516.31
21.51.255.67547.13
32.00.754.33496.17
42.52.005.33532.68
53.01.504.00493.84
63.51.005.00487.5
74.00.506.00435.6
4.2 结果分析 在计算机上用均匀设计程序软件处理试验数据,引入或剔除自变量的F临界值设定为0.1,可得如下逐步回归方程:Y=316.34+59.50A+115.26B+23.82C-15.8A2-32.57B2(r=0.915,F=54.72,n=7)查表,得F1-0.01(2,6)=10.9,F>F1-0.01(2,6),故回归方程具有显著意义,置信度达99%以上。
通过对ZTC1+1天然澄清剂加入量(A)、药液浓度(B)、药液的pH值(C)3个因素方差分析,表明天然澄清剂加入量(A)、药液浓度(B)有显著性差异(P0.1)。计算机处理所得各因素最优化值为A=1.83,B=1.5。综合上述分析并结合实际经验,确定澄清工艺的最佳条件为:加入1.83 g ZTC1+1天然澄清剂量、药液浓度为1.5 g/ml、药液的pH值为5.0。
按优化条件安排试验,所得质量评价结果在理论预报范围内,说明回归方程是可信的,预测的结果是准确的。
5 讨论
5.1 ZTC1+1天然澄清剂是一种新型食品添加剂,它具有安全无毒、不残留、不引入异味等优点[2]。由A、B两种组分组成,两组分依次加入,先与药液中的可溶性大分子形成复合物,进而形成絮状物沉淀下来,以达到去除杂质的目的。
5.2 用ZTC1+1天然澄清剂除杂质较乙醇法能够提高有效成分的含量,从而提高了产品的内在质量,使绿原酸含量提高了15%左右。
5.3 天然澄清剂的使用,可缩短生产周期,降低生产成本,提高产品质量,值得推广。
参 考 文 献
[1] 彭波.高效液相色谱法测定抗破伤风合剂中绿原酸的含量.中国医院药学杂志,2008,28(22):1970-1971.
[2] 赵军,沈季元,李献林,等.芍丹乙肝口服液澄清工艺的研究.中国现代应用药学,2004,21(5):411-413.
