【www.zhangdahai.com--理工论文】
摘要：[目的]探讨乙醇脱氢酶2(ADH2)、乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因多态性及饮酒和胃癌的联系。[方法]采用病例对照研究的方法，利用变性高效液相色谱法(DHPLC)检测常熟市201例男性原发性胃癌患者和对照组ADH2、ALDH2基因型，结合饮酒因素分析其在胃癌发生中的作用。[结果]与携带ADH2(A／A)或ALDH2(G／G)基因型者相比，其它基因型并不增加患胃癌的危险性(P>0.05)，结合ADH2、ALDH2基因多态性及饮酒因素发现，即使饮酒量超过1.5 kg・年饮酒者任何基因型组合和不饮酒者携带ADH2(A／A)或ALDH2(G／G)基因型者相比，患胃癌的危险性并未增加(P>0.05)。[结论]ADH2、ALDH2基因多态性与胃癌易感性无关。
关键词：ADH2；ALDH2；基因多态性；饮酒；胃癌
中国分类号：R183.3*2文献标志码：B
胃癌是最常见的恶性肿瘤之一，而有关饮酒与胃癌的关系研究颇多，研究结论各异。部分研究认为饮酒不是独立的危险因素或危险因素很弱，而乙醇脱氢酶2(ADH2)、乙醛脱氢酶(ALDI-L2)基因多态性与胃癌易感性也存分歧。ADH2和ALDH2是酒精代谢的两种酶，前者将乙醇氧化成乙醛，而后者将乙醛氧化成醋酸。ADH2和ALDH2的编码基因有高度的多态性，ADH2可分为G／G(变异型纯合子)、G／A(杂合子基因型)和A／A(野生型纯合子)3种基因型，ALDH2也可分为G／G(野生型纯合子)、G／A(杂合子基因型)和A／A(变异型纯合子)3种基因型。为探索ADH2、ALDH2基因多态性及饮酒与胃癌的联系，为此类研究提供有关数据，结合有关专题开展本研究。
1 资料与方法
1.1 资料来源
病例来自常熟市2005年8月-2006年8月期间经市二级医院确诊，具有本地区常住户口男性原发胃癌新发病例，病例均经手术或病理确认。常熟市疾病预防控制中心登记201例，其中161例新发病例是通过原发灶病理诊断。对照组采用随机抽样的原则，抽取同性别、上下年龄不超过2岁、与病例居住在同村、或同一乡镇有常熟市常住户口的非肿瘤居民，病例组平均年龄为64.65岁，对照组199例，平均年龄为64.61岁。
1.2 方法
采用统一的调查表由经专门培训的调查员通过访谈的方式调查每位研究对象，并由质控人员对每张调查表进行审查和验收，对可疑项目重新调查。调查项目包括调查对象的一般情况、饮酒情况等内容。对全部研究对象抽静脉血，置乙二胺四乙酸钠抗凝管，分离白细胞层。用Q IAamp DNA提取试剂盒提取白细胞DNA，DNA置－30℃低温冰箱保存备用。饮酒定义为：相当于每周饮高度白酒至少1次，连续半年以上。酒精消耗总量，按照含酒精饮料中纯酒精量计算，以“千克・年”为单位(平均每天饮纯酒精的千克数×饮酒年数)。含酒精饮料的酒精浓度参照《中国食物成分表2004》计算。
1.3 基因型分析
采用多聚酶链反应(PCR)和变性高效液相色谱法(DHPLC)检测ADH2 Arg47His和ALDH2 Glu487Lys基因型。ADH2Arg47His扩增所用引物为F：5‘-GGG CTrTAG ACTGAA’FAA CCTTGG-3‘和R：5‘-AGG GAAAGA GGA AAC TCC TGA A-3‘。ALDH2 Glu487Lys扩增所用引物为F：5’TGCTATGATGTGTITGGAGCC和R：5’－GGC TCC GAG CCA CCA-3‘。杂合子基因型可从DHPLC图形直接确定，野生型纯合子和变异型纯合子的DHPLC图形相同，需与已知纯合型混合，经过变性和复性过程，再次上样DHPLC仪分析确定。检测基因扩增产物购自宝生生物工程有限公司，PCR产物上样鉴定仪器为WAVE-3500(Transgenomic，USA)。
1.4统 计学分析
数据录入用Epidata 3.0软件，用SAS 8.0软件进行统计分析，以比值比(OR)及95％可信限(95％)表示相对危险度。
2 结果
2.1 两组均衡性检验
对病例组和对照组文化程度以及职业等一般情况进行均衡性检验，结果见表1，两组相关因素无统计学差异(P>0.05)。
2.2 ADH2和ALDI-12基因不同分型与胃癌的关系
分别以ADH2基因野生型(A／A)和ALDH2野生型(G／G)，ADH2基因非野生型和ALDH2基因非野生型的组合与之比较分析，结果见表2。无论是ADH2基因型还是ALDH2基因型，杂合子基因型和变异型纯合子并未增加胃癌的危险性，差异均无统计学意义(P>0.05)。
2.3 ADH2和ALDI-12基因不同分型组合与胃癌的关系
以病例和对照ADH2基因野生型(A／A)和ALDH2基因野生型(G／G)为参照，ADH2基因非野生型和AL-DH2基因非野生型的组合与之比较分析，结果见表3。ADH2基因杂合子基因型、变异型纯合子和ALDH2基因杂合子基因型、变异型纯合子的不同组合，并不增加胃癌的危险性，差异均无统计学意义(P>0.05)。
2.4 饮酒与胃癌的相关性
对是否饮酒以和胃癌的相关性进行分析研究，结果见表4，进行趋势性检验，结果差异均无统计学意义(P>0.05)，未发现胃癌与饮酒有相关性。
2.5 ADH2、ALDH2基因不同基因组合及饮酒与胃癌的关系
根据代谢活性高低以饮酒者的ADH2基因和ALDH2基因型的任意组合和不饮酒者代谢酶活性高的ADH2野生型(A／A)和ALDH2野生型(G／G)组合进行比较，比较时以酒精消耗量1.5千克・年进行分层，其结果见表5。任何其它组合即使酒精消耗量高于1.5千克・年，都未能增加胃癌的危险性，差异均无统计学意义(P>0.05)。
3 讨论
胃癌的危险因素比较复杂，而有关饮酒和胃癌之间的争议一直很大。张栓虎有关饮酒与胃癌发病关系的Meta分析中，27个研究中有4个OR值无显著性意义。鲍萍萍等研究发现，上海地区男性居民饮酒和胃癌的病例对照研究中，没有发现饮酒和胃癌有相关性，而女性重度饮酒者与胃癌有关。认为是不同性别对酒精的反应不同。
饮酒其主要生化反应是酒中的乙醇摄入体内，乙醇代谢成中间产物乙醛，乙醛再氧化成醋酸，而乙醛认为是致癌物。饮酒后血中乙醛的浓度和血液中残留时间的长短受两种酶活性的影响，即乙醇脱氢酶(ADH2)和乙醛脱氢酶(ALDH2)活性的影响，其中ADH2以A／A型活性最高，ALDH2以G／G型活性最高，如果个体两种酶是ADH2以A／A和ALDH2以G／G组合。则乙醛在体内存留的时间短，而如果个体两种酶是以ADH2 G／G、G／A型和ALDH2 A／A G／A型的任意组合，则乙醛在体内存留的时间长，浓度高，理论上对肿瘤发生的危险性就高。本次研究发现，不考虑饮酒，不同乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶组合并未发现和胃癌的发生有差异，考虑环境因素饮酒，即使饮酒总消耗量超过1.5千克・年的对象中，不同乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的任意组合并未增加胃癌发生的危险性。说明在本研究中，ADH2、ALDH2基因多态性与胃癌易感性无关。Yokyame等在日本饮酒人群中进行分子流行病学分析，结果发现乙醛脱氢酶突变与胃癌的发生之间也没有直接的联系，这和本研究结果类似。
综合本研究，ADH2、ALDH2基因多态性与胃癌易感性无关，饮酒并非是该地区胃癌的主要因素。但有报道认为，突变型基因ALDH2的存在能导致ALDH2活力的严重缺失，并与过度饮酒导致的酒精依赖、酒精性中毒、酒精性肝病、消化道癌症等疾病之间存在深刻的联系，同时，考虑过量饮酒还会导致其它心脑血管疾病，因此限制过量饮酒依然是控制肿瘤等慢性病的重要措施。
