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[摘要]目的：探讨当归水煎液对人脐静脉内皮细胞增殖、凋亡和胶原合成的影响。方法：体外培养人脐静脉内皮细胞，用噻唑蓝比色法检测细胞增殖活性，用流式细胞术分析细胞周期及凋亡，用放射免疫法测定胶原合成。结果：当归水煎液能促进人脐静脉内皮细胞的增殖，且随浓度增大促增殖作用愈大。当归水煎液使S期和G2/M期细胞增多，G0/G1期细胞减少（P 1.2.4 细胞增殖检测：用噻唑蓝(Methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)染色法检测细胞增殖。内皮细胞悬液（1×105个/ml）接种于96孔培养板，80%DMEM+20%FBS的培养液37℃ 5%CO2饱和湿度培养24h后，按分组给药，继续培养48h后，每孔加入MTT溶液(5mg/ml)20μl，37℃继续孵育4h，终止培养，弃去培养液，加入DMSO 150μl/孔，振荡10min，使结晶物充分溶解。酶标仪上490nm波长下测各孔光吸收值(OD)，每组8复孔。试验重复2次。按下列公式计算促增殖率：促增殖率＝（当归组OD值－对照组OD值）�（对照组OD值－培养液组OD值）×100%。
1.2.5 细胞周期及凋亡检测：用流式细胞术（Flow cytometry, FCM）检测细胞周期及凋亡。取对数生长期的内皮细胞，不含胎牛血清的DMEM培养24h后，分别加入不同浓度当归水煎液的DMEM培养48h。对照组加等体积的DMEM。常规消化离心细胞，PBS洗3次，以预冷的70%乙醇4℃固定过夜，RNA酶37℃消化30min，碘化丙啶(PI)染色后上流式细胞仪检测各组细胞中DNA，每个样品至少测定10 000个细胞以上。试验重复2次。
1.2.6 胶原合成测定：用放射免疫法测定培养上清液中的Ⅲ型前胶原。取融合生长良好的内皮细胞，不含胎牛血清的DMEM培养24h后，分别加入不同浓度当归水煎液的DMEM培养48h。对照组加等体积的DMEM。分别于12h、24h、48h后吸取培养上清液，-20℃保存，2周内检测。
采用Ⅲ型前胶原氨端肽(PⅢNP）放射免疫分析盒检测Ⅲ型胶原纤维的合成。检测时，于1.5ml离心管中加入上清液100μl和兔PⅢNP抗体200μl，4℃放置20h，加125I-PⅢNP100μl，充分摇匀4℃放置4h，加驴抗兔免疫分离剂500μl，充分摇匀，室温放置20min，4000r/min离心30min，吸弃上清液，在γ计数器测定各个沉淀管的放射活性。重复测定2次，取平均值。
1.2.7 统计学处理：计量资料以均数±标准差表示。用单因素方差分析比较组间差异显著性。应用SPSS10.0 软件包处理。P
