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[摘要] 目的:建立小儿氨酚黄那敏片中对乙酰氨基酚的溶出度测定方法,并进行方法学考察。方法:采用2.4%盐酸溶液900 ml为溶出介质,转速为50 r/min,取样时间为20 min,紫外分光光度法检测,检测波长为257 nm。结果:对乙酰氨基酚在2.04～10.2 μg/ml线性范围内(r=0.999 9)呈良好线性关系,平均回收率为99.5%,RSD为0.11%。结论:本法能够用于测定小儿氨酚黄那敏片中对乙酰氨基酚的溶出度,操作简便,准确可靠。
[关键词] 小儿氨酚黄那敏片;对乙酰氨基酚;溶出度;紫外分光光度法
[中图分类号]R927.2
[文献标识码]B
[文章编号]1674-4721(2009)08(a)-147-02
小儿氨酚黄那敏片为儿科常用的一种复方制剂感冒药,用于感冒引起的发热、头痛、关节痛、鼻塞等,每片含对乙酰氨基酚125 mg,人工牛黄5 mg,马来酸苯那敏 0.5 mg,载于《国家药品标准化学药品地标升国标第三册》。组方中对乙酰氨基酚占比重较大 ,占 95%以上,所以对乙酰氨基酚的溶出度速率的测定至关重要,且其溶出度的测定,国内目前尚无规定。原药品标准采用分光光度法测定其含量[1],为保持同一标准的一致性,故溶出度检测方法亦采用紫外分光光度法。本文采用高效液相色谱法,结果简便、快速、准确、重现性好。
1 仪器与材料
ZRS-4型智能溶出试验仪(天津大学无限电厂);WFH-203B三用紫外分析仪(上海精科实业有限公司);对乙酰氨基酚对照品(中国药品生物制品检定所;批号:100018-200408);小儿氨酚黄那敏片(广州香雪制药股份有限公司);盐酸(分析纯);氢氧化钠(分析纯)。
2方法与结果
2.1 溶出条件的选择
对乙酰氨基酚照溶出度测定法(中国药典2005年版二部附录XC第二法)进行检测[2]。
2.1.1 溶出介质的选择[3]
对乙酰氨基酚略溶于水,因此水不适宜作为溶出介质,溶出介质的pH值在 1.2～7.5之间对对乙酰氨基酚的溶出度几乎没影响[4],且中国药典2005年版中对乙酰氨基酚片溶出度测定法,选择2.4%的盐酸溶液(24→1 000)900 ml作为溶出介质。
2.1.2 溶出转速的选择
按溶出度测定法进行测定,转速分别为每分钟50、75和100转,在5、10、15、20、25和30 min时取溶出液5 ml(同时补充同体积同温度的溶出介质),摇匀, 用0.45 μm微孔滤膜滤过,精密量取续滤液1 ml置25 ml量瓶中,加0.08%氢氧化钠溶液稀释至刻度,摇匀, 用0.45 μm微孔滤膜过滤,照紫外-可见分光光度法(中国药典2005年版二部附录ⅣA),在257 nm的波长处测定吸光度,按C8H9NO2的吸收系数(E1%)为715计算每片的溶出量。结果显示,50、75、100 r/min溶出结果没有显著性差异,故选择溶出转速为50 r/min。
2.2取样点与限度的确定
2.2.1 溶出均一性[5]
取本品6片,照溶出度测定法,以2.4%盐酸溶液900 ml作为溶出介质,转速为50 r/min,照“2.1.2”(从“在5、10、15、20、25和30 min时取样5 ml”到“在257 nm的波长处测定吸光度”)操作,以取样时间对溶出量绘图。结果显示本品在20 min处均有一趋于溶出平衡的拐点,故本品的取样时间确定为20 min,限度不得低于标示量的90%。
2.2.2溶出度重复性
取3批本品同“2.2.1法”操作,结果显示3批样品具有良好的溶出均一性和重现性。
2.3 溶出方法的确定
以2.4%盐酸溶液(24→1 000)900 ml为溶剂,转速为每分钟50转,在20 min时取5 ml溶出液,摇匀,滤过,精密量取滤液1 ml置25 ml量瓶中,加0.08%氢氧化钠溶液稀释至刻度,摇匀,滤过,照紫外-可见分光光度法(中国药典2005年版二部附录ⅣA)在257 nm处测定吸光度。按C8H9NO2的吸收系数(E1%)为715计算每个样品的溶出量。限度为标示量的90%。应符合规定。
3 溶出度测定法的验证
3.1 空白辅料干扰
取6片空白辅料片,按“2.3法”测定;另按处方比例精密称取空白辅料适量置100 ml量瓶中,加2.4%盐酸溶液超声溶解20 min,并稀释至刻度,摇匀,滤过,分别精密量取续滤液 1ml于25 ml量瓶中,加0.08%氢氧化钠溶液稀释至刻度,摇匀,按上面方法测定辅料溶液的吸光度。试验结果看出空白吸收主要是由溶出过程引入,而溶出过程干扰很可能是由于仪器桨杆涂料引起的,扣除溶出过程的吸光度后,空白辅料对试验几乎无影响。
3.2 线性试验
精密称取对乙酰氨基酚对照品10.2 mg置100 ml量瓶中,加0.08%氢氧化钠溶液超声溶解并稀释至刻度,摇匀,作为线性试验储备液。再精密量取该储备液1、2、3、4、5 ml分别置于50 ml量瓶中,加0.08%氢氧化钠溶液稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。按样品测定项下操作,测定吸光度。以对乙酰氨基酚浓度对吸光度A回归,得到标准曲线方程为Y=0.0716X+0.0084,相关系数为r=0.9999,表明对乙酰氨基酚在2.04～10.2 μg/ml浓度范围内线性关系良好。
3.3 精密度试验
精密量取上述对照品储备液5 ml,置50 ml量瓶中,加0.08%氢氧化钠溶液稀释至刻度,摇匀,滤过,按样品测定项下操作,测定吸光度。其RSD=0.11%(n=5)。
3.4 回收率试验
分别精密称取对乙酰氨基酚对照品各适量,并按处方量加入辅料,各置100 ml量瓶中,加2.4%盐酸溶液超声溶解10 min,稀释至刻度,摇匀,滤过,分别量取续滤液1 ml置25 ml量瓶中,加0.08%氢氧化钠溶液稀释至刻度,摇匀,滤过,按样品测定项下操作,测定吸光度,计算回收率。平均回收率为97.14%,RSD为0.54%(n=5)。
3.5 溶液稳定性试验
取回收率试验项下的溶液,分别于0、2、4、6和8 h在257 nm的波长处测定吸光度。结果RSD=0.38%(n=5),表明对乙酰氨酚溶出液在8 h内稳定性良好。
4 样品溶出度的测定
取三批样品,每批各6片,照2.3项下操作,测定吸光度,计算出每片的溶出量及每批样品的平均溶出度,结果表明样品测定的结果基本一致,三批样品在20 min时溶出度均已超过标示量的95%,考虑到生产实际可能存在偏差,乙酰氨基酚的溶出限度在45 min时的溶出度不得低于标示量的90%。
5讨论
考虑到小儿氨酚黄那敏片中对乙酰氨基酚含量测定采用的是紫外分光度法,为保持同一标准的一致性,故溶出度检测方法亦采用紫外分光光度法。对乙酰氨基酚结构中含有芳酰氨基,在酸性溶液中易水解为芳伯氨基化和物及醋酸[7],紫外光谱在243 nm处有最大吸收峰,但出现裂峰。药典中对乙酰氨基酚片中溶出度检查用0.04%氢氧化钠溶液稀释50倍[1],改变溶液的pH值,中和溶出液中产生的醋酸及氢离子,并与对乙酰氨基酚形成盐,在257 nm处有最大吸收峰[8],根据此原理,同时参考《中国药典》2005年版二部对乙酰氨基酚片的溶出度测定法,制定了本品对乙酰氨基酚的溶出度测定法,经系列方法学研究,该方法符合要求。
[参考文献]
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