【www.zhangdahai.com--承诺书】
【摘要】目的进一步研究FTY720的降低外周血淋巴细胞的效果和剂量及用药时间的关系。方法给予FTY720 10 mg/(kg・d)，于给药前、第1次给药后2、4、8、24、48 h采血计数外周血淋巴细胞数目；给予不同剂量的FTY720（0.3、1、3、10 mg/(kg・d)）和生理盐水，给药后24 h，采血计数外周血淋巴细胞数目。结果给药前、第1次给药后2、4、8、24、48 h外周血平均淋巴细胞数目分别为(9.575±�1.1121�)×10�9、(6.525±1.0175)×10�9、(3.512±1.0171)×10�9、(3.576±1.0046)×10�9、(3.513±�1.0582�)×10�9、(3.500±0.9606)×10�9/L；生理盐水和不同剂量的FTY720（0.3、1、3、10 mg/kg）组的外周血平均淋巴细胞数目分别为(9.475±1.1121)×10�9、(7.825±1.3092)×10�9、(6.250±1.0821)×10�9、�(5.100±0.9501)�×10�9、(3.325±0.9977)×10�9/L。结论FTY720诱导外周血淋巴细胞数目减少有时间和剂量依赖性。给予FTY720（10mg/(kg・d)）能够明显降低外周血淋巴细胞数目，并于用药后2 h下降明显，用药后4 h下降到谷值，4 h以后维持于较低水平。外周血淋巴细胞数目和FTY720的剂量成直线关系，随FTY720剂量的增加而下降。
【关键词】时间；剂量；平均淋巴细胞数量
为进一步研究FTY720的免疫抑制作用特点，我们对其降低外周血淋巴细胞的效果和时间剂量的关系进行了研究，结果报告如下。
1实验材料
药物:FTY720 华东制药厂所赠。
动物:近交系BALB/c(H-2d)小鼠，8～10周龄，体质量20 g。由中国军事医学科学院实验动物中心提供。
试剂:细胞稀释液：1 ml冰醋酸加1～3滴1%美蓝，加蒸馏水至100 ml。瑞氏染液、PBS 清华大学生命科学实验室提供。
仪器: 奥林帕斯生物显微镜(上海精密仪器仪表有限公司)。
2实验方法
2.1实验设计近交系BALB/c(H-2d)小鼠16只，股部肌
作者单位：256603滨州医学院(李庆元刘少青迟玉友)；清华大学第一附院(管德林)
肉注射FTY720 10 mg/(kg・d)，于用药前、用药后2 h、用药后4 h、用药后8 h、用药后24 h、用药后48 h连续用鼠尾静脉采血，计数血中淋巴细胞数量。
近交系BALB/c(H-2d)小鼠80只,分为5组，每组16只。FTY720股部肌肉注射，1次/d。①实验对照组0.9％生理盐水；②FTY720 0.3 mg/kg；③FTY720 1 mg/kg；④FTY720 3 mg/kg；⑤FTY720 10 mg/kg。给药后24 h鼠尾静脉采血，计数血中淋巴细胞数量。
2.2统计学方法运用SPSS统计软件统计分析。外周血平均淋巴细胞数目用均数±标准差(±s)表示。进行协方差分析和两两组之间的t检验。
3实验结果
外周血平均淋巴细胞数目的降低在给药2 h后比较明显，大约到4 h时到达谷值，此后进入一个相对稳定的平台期，而在剂量依赖性的关系中，基本随剂量的增加呈持续降低，近似负相关。见表1，表2。
4讨论
FTY720的免疫抑制作用的主要机理就是能够降低外周血中的淋巴细胞数量，并且能够有选择的降低外周血中的淋巴细胞数量，其中对T淋巴细胞的作用强于B淋巴细胞，也强于NK淋巴细胞，对CD4+细胞＞对CD8+细胞的影响［1］，并能影响HPCS等多种细胞［2］。不仅如此，FTY720还能引起巨噬细胞、树突状细胞的转移。
FTY720降低外周血淋巴细胞的作用有时间和剂量的依赖性，给予FTY720后能够迅速降低小鼠外周血淋巴细胞数量，4 h后降至最低，停止给药后能够恢复正常。其降低淋巴细胞效应和剂量成正比，随剂量的增加淋巴细胞下降。Park SI等研究显示，在肾移植病人中，不同剂量的FTY720（0.25～2.5 mg/d）呈现剂量依赖性的外周血淋巴细胞下降。
我们的研究结果说明，给予FTY720后，BALB/c（H-2d）小鼠的外周血平均淋巴细胞数目的降低有明显的时间依赖性，在给药后2 h，外周血平均淋巴细胞数目明显下降，给药后4 h，外周血平均淋巴细胞数目降低到谷值，然后到达一个相对稳定的平台期，外周血平均淋巴细胞数目稳定在一个较低的水平。FTY720能够明显降低BALB/c（H-2d）小鼠的外周血淋巴细胞数量，这种降低外周血平均淋巴细胞数目的作用具有明显的剂量依赖性，随着FTY720给药剂量的增加，外周血淋巴细胞平均数量呈递减趋势。
FTY720降低外周血淋巴细胞的作用确切，效果明显，并且有明显的时间和剂量依赖性,随给药时间和剂量的不同产生不同程度的效应。能够使外周血淋巴细胞数量下降，这是FTY720的免疫抑制作用的主要机理，FTY720作用的时间和剂量依赖性是来源于其稳定的药物代谢和药效动力学优点，这对药物的使用来说，是一个明显的优势，这对我们将来临床用药剂量和给药时间上的选择有重大的参考价值，对于我们将来临床用药具有很好的指导意义。
本文中所涉及到的图表、注解、公式等内容请以PDF格式阅读原文。
