【www.zhangdahai.com--活动方案】
【摘要】 目的 探讨脊髓星形胶质细胞和小胶质细胞以及前炎性细胞因子白细胞介素�1β(IL�1β)、白细胞介素�6(IL�6)和肿瘤坏死因子α(TNFα)在CP/CPPS发生发展中的作用及机制。方法 40只健康雄性Sprague�Dawley(SD)大鼠，随机分为正常不加任何处理的对照组(n=20)、CP/CPPS模型组(n=20)，完全福氏佐剂和3%角叉菜胶前列腺内注射造成CP/CPPS模型。通过检测机械性痛阈(PWT)来评价动物痛行为学改变；采用免疫组织化学、逆转录多聚酶链反应 (RT�PCR)等方法，检测脊髓星形胶质细胞GFAP和小胶质细胞OX�42的表达以及脊髓前炎性细胞因子IL�1β、IL�6及TNFα mRNA表达的变化，评价脊髓小胶质细胞和星形胶质细胞活化情况及脊髓前炎性细胞因子表达与疼痛行为改变的关系。结果 与对照组比较，CP/CPPS模型组大鼠建模后第11天出现PWT明显降低(P1］ 的建模方法并加以改进。取大鼠下腹部正中直切口暴露前列腺，于前列腺右侧叶注入3%角叉菜胶30 μl和完全福氏佐剂30 μl，可吸收线缝合伤口，正常饲养4周备用。�
1.3 机械性痛阈(Paw withdrawl threshold,PWT)测定
从建模后第7天开始隔天采用美国生产的2393型电子测痛计(Electronic Von Frey)测定机械性痛阈，测定3次，两次测定间隔5 min，取平均值。�
1.4 免疫组化染色及分析
采用二步免疫组化法检测模型组与对照组的腰段脊髓背角GFAP和OX�42表达。�
1.5RT�PCR检测腰段脊髓IL�1β，IL�6 和TNF�α mRNA的表达
模型组大鼠于建模后第7、14、21天、对照组大鼠于第21天分别随机抽取3只，快速断头处死，冰上取腰段脊髓(L��4~5�)，匀浆，取匀浆组织约50 mg RIzol法提取总RNA，按试剂说明进行逆转录和PCR，采用Primer 3软件设计PCR引物，以大鼠的β�actin mRNA为内参照。�
1.6 统计学方法
采用SPSS 12.0版本统计软件处理。所有数据以均数±标准差(x±s)表示，采用方差分析和t检验进行统计学分析。�
2 结果�
2.1 一般情况和体重变化
所有的实验大鼠包括模型组和对照组，在整个实验观察期一般情况均良好，饮食及体重均无明显变化。�
2.2 机械性痛阈(PWT)检测结果
模型组大鼠建模前PWT基础值(Basic line,BL)、建模后第7、9天PWT值与对照组大鼠比较差异无统计学意义(P>0.05)。模型组大鼠建模后第11，13，15，17，19，21天， PWT值进行性降低，而对照组(n=6)仍处基线水平，2组在这些时间点比较差异有统计学意义(P1］的建模方法并加以改进成功建立了CP/CPPS模型，实验结果显示与对照组比较，CP/CPPS模型组大鼠建模后第11天出现PWT明显降低(P
