葛根醇提物对H22小鼠的抑癌作用的效果观察

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【摘要】 目的 通过探讨葛根醇提物抗肿瘤作用和作用机制。方法 检测了葛根醇提物抑瘤作用及小鼠H22肝癌血清中白介素-8（IL-8）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的含量（ELISA法）。结果 不同剂量葛根醇提物能不同程度抑制荷瘤小鼠H22肝癌的生长，能增加TNF-α和降低IL-8的含量。结论 葛根醇提物对荷瘸小鼠H22肝癌具有抑制作用。

【关键词】 葛根醇提物；荷瘤小鼠；白细胞介素-8（IL-8）；肿瘤坏死因子-α（TNF-α）

doi：103969/jissn1004-7484（s）201306025 文章编号：1004-7484（2013）-06-2827-02

葛根（radix pueraiae）性味归经：甘、辛，凉。入脾、胃经。功效与主治：①发表解肌主治外感表邪，尤宜于伴有项背强直者。②升阳生津治泻痢，津伤口渴，消渴证。③透发斑疹用于麻疹初起不透等。化学成分：葛根含多种黄酮类成分，主要活性成分为大豆素（daidzein）、大豆甙（daidzin）、葛根素（puerarin）、葛根素-7-木糖甙（puerarin-7-xyloside）等。以及多量淀粉等。药理作用：①所含黄酮成分能增加脑及冠脉血流量。②有解热、解痉及降血糖作用。③有雌激素样作用。[1]

一旦确诊为恶性肿瘤，临床上局部切除后还需要对患者进行长期的放疗和化疗，放化疗是把双刃剑，对人体的伤害极大，患者依从性差。因此，寻找天然无毒的抗肿瘤药物成为近年研究的热点。本实验旨在研究以H22肝癌荷瘤小鼠为对象[2]，对葛根醇提物对荷瘤小鼠的抗癌作用进行简单的效果观察。

1 材料和方法

11 动物 昆明种小鼠，普通饲养，6周龄，体重18-22克，共50只，雌雄各半，：室温（20±2），颗粒饲料喂养，自由饮水。

12 材料 取葛根1000g用10倍量50%、60%、70%乙醇回流提取lh，各三次，合并滤液，回收溶剂，减压干燥至恒重得干膏33046g。环磷酰胺购买于：江苏恒瑞制药股份有限公司。苏木素和伊红来自 Sigma化学试剂公司。肿瘤坏死因子-α-和白介素-8 以及ELISA试剂盒购于上海江莱生物科技有限公司。

13 仪器 真空干燥箱、旋转蒸发仪、温湿度计、超纯水仪、超速冷冻离心机、超低温冰箱、制冰机、生物安全柜、高压灭菌箱、电子天平、酶标仪（热电上海仪器有限公司）。

14 方法

141 昆明种小鼠被随机分成四组，每组10只（蒸馏水组、环磷酰胺组、葛根醇提物低剂量组、葛根醇提物高剂量组）。无菌条件实验室，于小鼠左前肢腋下注射稀释后的H22肝癌细胞株02ml/只。24小时后，小鼠灌胃给葛根醇提物，药物剂量分别为450和900mg/kg，连续15d。蒸馏水组灌服蒸馏水。环磷酰胺组（每公斤体重25mg腹腔注射）。第16天，所有动物被处死，称重小鼠和肿瘤。肿瘤抑制率按下式计算：

抑瘤率=对照组平均瘤重一剂量组平均瘤重）/对照组平均瘤重×100%。

142 葛根醇提物对血清中TNF-α和IL-8 的影响 处死实体瘤小鼠以前，小鼠被摘右眼球取血。血样4℃情况下静置lh，然后与室温3OOOr/min离心5min，分离血清。TNF-α和1L-8按ELISA试剂盒说明程序进行。

15 统计学处理 数据用 χ±s。

2 结 果

21 葛根醇提物对肿瘤有明显抑制的作用 给予葛根醇提物和环磷酰胺能减少肿瘤的重量，剂量越大效果越好，见表1。

3 讨 论

通过以上实验效果观察显示，葛根醇提物组能显著抑制肿瘤的发展，随着葛根剂量的增大抗肿瘤作用也随之增强。葛根醇提物可以提高小鼠的TNF-α含量，而降低lL-8的含量。这可能是由于葛根总黄酮成分可以增强体内的免疫力促进免疫细胞的繁殖，从而增强机体细胞的免疫功能而达到扼制、杀伤癌细胞的作用。本实验为中西药结合，联合抗肿瘤提供了科学依据。为肿瘤的治疗开拓了新的思路。TNF-α是一种能够直接杀伤肿瘤细胞而对正常细胞无明显毒性的细胞因子，是迄今为止所发现的直接杀伤肿瘤作用最强的生物活性因子之一。白介素-8，Interleukin-8，IL-8），又称为趋化因子CXCL8是巨噬细胞和上皮细胞等分泌的细胞因子。白细胞介素-8结合趋化因子受体白细胞介素-8受体α（IL8RA，又叫CXCR1）和白细胞介素-8受体β（IL8RB，又叫CXCR2）而对中性粒细胞有细胞趋化作用而实现其对炎症反应的调节。本实验为中西药结合，联合抗肿瘤提供了科学依据。为肿瘤的治疗开拓了新的思路。全面提高了患者治疗期的生活质量。

参考文献

[1] 宋立人等，主编现代中药学大辞典（上册）[M]北京：人民卫生出版社，2001：301-302

[2] 朱彩平，张声华枸杞多糖对H22肝癌小鼠的抑瘤作用[J]中国公共卫生杂志，2006，22（6）：717-718

[3] Tilg H，Shapiro L，Atkins MB，et alInduction of circulating and erythrocyte-bound IL-8 by IL-2 immunotherapy and suppression fits in vitro production by IL-l receptor antagonist and soluble tumor necrosis factor receptor（p75）chimera[J]The Journal oflmmunology，1993，24（2）：3299-3307

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