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郭朝金，轩妍
儿童急性上呼吸道感染性疾病是由真菌、支原体、病毒、细菌等多种病原菌引发的一种炎症性疾病。儿童由于免疫力较弱，属于易感人群。如不及时诊治，常引发鼻咽部感染，导致血行传播，进而引发不同程度的并发症。故快速、早期诊断，给予针对性治疗措施是临床治疗及改善患儿预后的关键。目前，体格及病史检查结合外周血细胞技术为临床诊断儿童急性上呼吸道感染的常用手段。亦有研究显示，新型的炎症标志物可在一定程度上提高该病诊疗水平［1-2］。PU.1为Est家族最重要的一种转录因子，能够对Th9细胞表型进行特异性增强，且是Th9细胞分化所必需的转录因子，而Th9细胞可分泌促炎细胞因子，进而引发炎症，促进疾病进展［3-4］。白细胞介素4（interleukin-4，IL-4）作为一种炎性因子，可介导免疫，促进IgE分泌，在感染性疾病中呈异常表达，敏感度较高［5-6］。但是目前探究急性上呼吸道感染性疾病患儿血清中PU.1和IL-4表达的研究相对较少，仍处于初始研究阶段。本研究对急性上呼吸道感染性疾病患儿血清PU.1和IL-4表达进行分析并探究其临床诊断价值，为临床早期干预提供参考。
1.1 一般资料 选取2019年7月—2021年7月在本院接受治疗的急性上呼吸道感染疾病患儿78例作为疾病组，并选取同期体检的健康儿童78例作为对照组。纳入标准：（1）疾病组患儿均符合《内科学》［7］中急性上呼吸道感染性疾病诊断标准。（2）患儿家属配合本研究。（3）疾病组患儿检查前1 d未服用抗生素治疗。排除标准：（1）合并内分泌系统、免疫系统疾病。（2）同时参与其他临床研究。（3）合并肝肾功能障碍。（4）合并其他炎症性疾病。本研究经伦理委员会批准，患儿家长对本研究内容知情并签署同意书。
1.2 方法 抽取患者清晨空腹静脉血3 mL，常温下静置1 h，以3 000 r/min离心15 min。取血清，将其置于-80℃冰箱内保存。以荧光定量PCR检测血清PU.1相对表达量，具体操作步骤按照说明书严格进行，试剂盒购自HaiGene公司。以酶联免疫吸附试验（ELISA）检测血清IL-4、IL-6、C-反应蛋白（CRP）、降钙素原（PCT）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平，试剂盒购自江苏江莱生物科技有限公司。
1.3 统计学方法 使用SPSS 22.0软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差（±s）描述，组间比较采用t检验；
计数资料以例（%）表示，行χ2检验。通过绘制受试者工作特征（ROC）曲线评估血清IL-4、PU.1表达用于诊断上呼吸道感染性疾病的诊断价值。多因素Logistic回归分析上呼吸道感染性疾病发生的危险因素。以P＜0.05表示差异有统计学意义。
2.1 2组一般资料比较2组年龄、性别比较差异无统计学意义（P＞0.05），疾病组患儿血清IL-6、CRP、PCT、TNF-α水平明显高于对照组（P＜0.01）。见表1。
Tab.1 Comparison of general data between the two groups表1 2组一般资料比较 （n=78）
2.2 血清IL-4水平及PU.1相对表达量 疾病组血清IL-4水平及PU.1相对表达量均明显高于对照组（P＜0.05）。见表2。
Tab.2 Comparison of serum IL-4 level and relative expression of PU.1 between the two groups表2 2组血清IL-4水平及PU.1相对表达量比较（±s）
Tab.2 Comparison of serum IL-4 level and relative expression of PU.1 between the two groups表2 2组血清IL-4水平及PU.1相对表达量比较（±s）
＊＊P＜0.01。
组别对照组疾病组t n 78 78 IL-4（ng/L）6.74±1.78 8.43±1.78 5.937＊＊PU.1 0.74±0.12 0.82±0.18 3.127＊＊
2.3 IL-4及PU.1对急性上呼吸道感染性疾病的诊断价值 绘制ROC曲线评估血清IL-4水平、PU.1相对表达量及联合检测用于诊断上呼吸道感染性疾病患儿的价值显示，两者联合检测价值更高。见图1、表3。
Fig.1 ROC curve of the relative expression of serum IL-4 and PU.1 in the diagnosis of upper respiratory tract infectious diseases图1血清IL-4及PU.1相对表达量诊断上呼吸道感染性疾病的ROC曲线
Tab.3 Diagnostic value of serum IL-4 and PU.1 for upper respiratory tract infectious diseases表3血清IL-4及PU.1对上呼吸道感染性疾病的诊断价值
2.4 上呼吸道感染性疾病发生的影响因素 以是否发生上呼吸道感染性疾病为因变量（是=1，否=0），血清IL-4、PU.1、IL-6、CRP、PCT、TNF-α表达水平为自变量行多因素Logistic回归分析。结果显示，血清IL-4、PU.1、IL-6、CRP、TNF-α水平升高为影响上呼吸道感染性疾病发生的独立危险因素（P＜0.05）。见表4。
Tab.4 Multivariate Logistic analysis of factors affecting the occurrence of upper respiratory tract infectious diseases表4多因素Logistic回归分析上呼吸道感染性疾病发生的影响因素
上呼吸道感染性疾病为临床常见的儿科疾病，可发生于一年四季，多发于冬春季节及气温骤变时［8］。若不能及时防治，该病可引发多个器官感染，导致肺炎、气管炎、咽喉肿胀及中耳炎等疾病发生，严重影响患儿健康，因此，早期诊断并给予防治在临床中具有重要价值。
3.1 炎性因子在上呼吸道感染性疾病中的作用PCT主要由甲状腺C细胞分泌，为前体激素，可作为细菌感染的诊断标志物，能够预测急性上呼吸道感染病情［9］。CRP在组织受到损伤或机体发生细菌感染时水平明显上升，而且CRP水平的上升不受免疫功能、性别及年龄等因素的干扰，也不受免疫抑制剂或各种药物的干扰，为诊断急性上呼吸道感染的重要标志物［10］。IL-6为典型的炎性因子，也是临床诊断上呼吸道感染性疾病的常用指标［11］。TNF-α为重要的炎症介质，主要由巨噬细胞分泌，感染性疾病发生时其水平明显升高［12］。本研究对急性上呼吸道感染性疾病患儿及体检健康儿童以上指标进行检测分析，结果显示，疾病组患儿血清IL-6、CRP、PCT、TNF-α水平明显高于对照组，与陈娟等［13-14］研究基本一致。提示炎性因子参与上呼吸道感染性疾病的发生。
3.2 血清IL-4水平对上呼吸道感染性疾病的诊断价值 以往多需进行细菌培养、病毒分离及病毒血清学检查等方法才能确定上呼吸道感染病原体，易延误确诊时间。引入新的血清学指标有利于临床早期诊断及治疗上呼吸道感染患者［15］。因此，本研究通过检测血清学指标，以期为临床诊断上呼吸道感染性疾病提供参考。IL-4主要由T淋巴细胞产生，可提升T淋巴细胞活性，促进B细胞分裂增殖，还能够分泌IgE，促进肥大细胞增殖［16］。Saggini等［17］研究显示，中耳炎患者IL-4水平明显升高，IL-4可参与炎症反应的发生。本研究通过对上呼吸道感染性疾病患儿血清IL-4水平进行检测，结果显示，疾病组血清IL-4水平明显高于对照组，与Saggini等［17］研究类似，推测IgE通过与肥大细胞的特异性结合，导致大量生物活性物质（白三烯、组胺等）的合成与释放，促使机体增加呼吸道黏液分泌量，从而增加上呼吸道感染性疾病的发生风险。ROC曲线分析发现，血清IL-4水平为临床诊断上呼吸道感染性疾病的有效指标，提示检测IL-4水平对早期判断上呼吸道感染性疾病的发生有积极意义。
3.3 血清PU.1水平对上呼吸道感染性疾病的诊断价值 转录因子PU.1是Est家族中的一员，能够活化炎症相关的部分受体及相关细胞因子［18］。张明海等［19］研究显示，PU.1可直接结合IL-9基因启动子，诱导IL-9的表达，进而促进炎症反应的发生。郭锦均等［20］研究显示，PU.1在脓毒症患儿中呈高表达，与患儿预后关系密切。本研究中，疾病组血清PU.1相对表达量较对照组高，推测PU.1可能通过调控炎性因子IL-4、TNF-α等参与上呼吸道感染性疾病的发生，具体机制需深入探讨。ROC曲线结果显示，PU.1用于疾病诊断有一定的价值，且血清PU.1、IL-4联合检测诊断上呼吸道感染性疾病的效果更好。另外，多因素Logistic回归分析结果显示，血清IL-4、PU.1、IL-6、CRP、TNF-α表达水平为上呼吸道感染性疾病发生的独立影响因素。这也提示当患儿上述因子水平升高时应加强监测，同时与临床症状相结合进行诊断，及早干预，以改善患儿预后。
综上所述，急性上呼吸道感染性疾病患儿血清中PU.1、IL-4、IL-6、CRP、PCT、TNF-α表达水平较高，检测血清中PU.1、IL-4水平可能有助于辅助诊断急性上呼吸道感染性疾病。
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