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【摘要】 目的 研究带血供骨膜瓣对异体骨移植血管化的影响,修复骨缺损过程中对微血管生成的作用。方法 将兔的股骨经去抗原化后作为供体,制作带血供骨膜瓣包裹同种异体骨修复兔大段骨缺损的模型,实验设置对照组,即未用血管化骨膜瓣包裹移植物。分别在术后4、8、16周分别对移植物及周围软组织、骨组织进行组织学观察,观察内皮细胞生长因子(VEGF)的表达。对Ⅷ因子相关抗原特异性标记,比较不同时间微血管密度(MVD)的变化。结果 实验组骨组织哈佛氏管内较早出现微血管;在相同阶段,实验组VEGF的表达强于对照组,MVD高于对照组。结论 带血供骨膜瓣对异体骨移植的血管化过程有明显的促进作用。
【关键词】 骨膜瓣;异体骨移植;血管内皮生长因子;血管密度
Effect of vascularized bone flapon bone allograft vascular
ZHAO Jun,XU Hai-jin,LI Yun-jie,et al.
Huizhou Uninon Hopital Gudong,Huizhou 516000,China
【Abstract】 Objective To study the effect of vascularized bone flap on bone allograft vascular.To investigate the effect on microvessel of vascularized bone flap during bone allograft.Methods De-antigen rabbit femoral as the donor, a rabbit model of massive femoral defect was established and reconstructed with bone allograft covered with vascularized bone flap,and nonvascular bone flap as the control groups.Histological observation and immunohistochemical examination were done on bone and its surrounding tissues at 4,8,16 weeks postoperatively,and Ⅷ factor related antigen were marked to show the change of themicrovessel density (MVD). Results New micro vessel came into being in Harver’s channel in E group earlier, the expression of VEGF in E group were more stronger than in control group at the same stage, and the MVD of E group was higher than that of control group.Conclusion Vascularized bone flap can stimulate vascular during bone allograft.
【Key words】 Bone flap;Bone allograft;VEGF;MVD
作者单位:516000广东省惠州协和医院(赵军 李云杰);深圳市南岭医院(徐海锦);湖北蒲纺集团医院(张峰)
异体骨移植现已成为治疗骨缺损、骨不连的重要手段。血管化、骨再生、骨端融合是三个密切相关的环节,血管化是最初也是最基本的环节,血管的形成,恢复血供是骨折修复的前提。本实验通过建立带血供骨膜瓣包裹同种异体骨修复兔大段骨缺损的模型,选取Ⅷ因子相关抗原作为微血管的特异性标记,探讨移植物再血管化的过程,旨在为临床应用提供基础研究的资料。
1 材料与方法
1.1 材料 日本大耳白兔,6～10月龄,体质量2.0～2.6 kg,共48只,雄16只为供体,雌32只为受体。实验分为实验组16只(带血管蒂骨膜瓣包裹同种异体骨移植组)和对照组16只(异体骨移植组)。若动物出现意外死亡,则酌情补齐。
1.2 方法 供体的切取及制备:麻醉下取雄兔股骨干2.5 cm,去除骨膜、骨髓,生理盐水反复冲洗,经无菌密封保存于4℃ 12 h,再经-30℃降温2 h,最后储存于-196℃的液氮中保存2周。
模型的制作:受体兔麻醉后,取股内侧切口,分离并保护股血管及其分支,将薄层肌袖同骨膜保存,截除股骨干2.5 cm造成皮质骨缺损,将已制备的长管状同种异体骨按两步解冻法解冻,原位植入受体动物骨缺损处,直径2.0 mm的克氏
针固定,将骨膜瓣包裹移植物,分层缝合伤口,不予以外固定,术后静脉注射青霉素钠40万U/d抗感染治疗一周。对照组是在截取股骨干时连同骨膜及周围部分肌肉一并切除,其余手术步骤同实验组。
标本处理:分别于术后4、8、16周处死动物,并将移植骨和周围组织一起取材。常规HE染色,免疫组织化学染色(S-P法)。
MVD计数:低倍镜(40×)下寻找三个血管密度相对较高区域,然后分别计数其高倍视野(200×)MVD最大值,并取平均值。
1.3 统计学分析 采用SPSS 11.5统计分析软件,所有数据以(x±s)表示,利用单因素方差分析对MVD的检测结果进行组间分析,P 表1
两组动物骨周组织及骨痂血管密度的比较(x±s)
组别术后时间
4周8周16周
对照组16.37±0.9913.85±1.6215.88±1.22
实验组27.58±1.33*24.36±1.56*22.46±1.05*
注:与对照组比较,*P
